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濮剑威: 作品数：10 被引量：40H指数：4; 供职机构：浙江省淡水水产研究所更多>>; 发文基金：国家科技支撑计划浙江省重大科技专项基金上海市教育发展基金会“曙光计划”项目更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

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草鱼肌肉生长抑制素基因克隆及功能研究: 基因功能和转基因是鱼类育种领域重要的研究方向。通过对主效基因的研究，选育生长性状优良的个体从而建立良种，对大型鱼类的选育有着较为明显的实际意义。草鱼（Ctenopharyngodon idellus）是我国特有的经济鱼...; 濮剑威; 关键词：草鱼 MSTN 过表达; 文献传递

罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)幼体新暴发病病原阴沟肠杆菌的分离鉴定被引量：10: 2015年; 2010年,浙江湖州部分罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)育苗场在幼体培育阶段,暴发了幼体大规模发病死亡的新病害。从2个育苗场6个发病育苗池的发病幼体匀浆液中分离得到6株优势生长菌株(编号为NTH01、NTH02、NTH03、316D、316X、316C),菌落形态较为一致。取代表菌株NTH01,以浸泡方式进行人工回感,结果菌株NTH01能够导致幼体发病死亡,且症状与生产表现一致。经形态学观察、生理生化鉴定、16S r RNA与gyr B基因序列系统发育关系构建,鉴定菌株NTH01为阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)。以阴沟肠杆菌omp A基因片段为靶序列,建立了PCR检测方法,对另外5株优势菌进行检测,结果该5株菌都是阴沟肠杆菌。2011年,对4个发病育苗场幼体与亲虾进行检测,结果发病幼体中分离的优势菌检测呈阳性,亲虾肝胰腺与肠道组织检测到该菌存在,但亲虾不表现病症。对30种抗生素的药敏试验结果表明,菌株NTH01对恩诺沙星、氧氟沙星、庆大霉素等6种抗生素敏感,对发病幼体进行针对性用药,效果明显。本试验结果表明,阴沟肠杆菌是导致罗氏沼虾育苗期间幼体大规模发病死亡的致病菌。; 陈雪峰杨国梁高强夏正龙濮剑威慎佩晶黄振远; 关键词：罗氏沼虾幼体阴沟肠杆菌药敏试验

草鱼肌肉生长抑制素(MSTN)-1基因的克隆、表达、反义抑制及过量表达对胚胎发育的影响: 肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)是抑制肌肉生长和发育的重要生长调控因子.本文通过cDNA末端快速扩增法(RACE)克隆了草鱼MSTN-1全长cDNA,其全长为2190bp,开放阅读框长度为1128bp,可编...; 濮剑威沈睿杰邹曙明; 关键词：草鱼肌肉生长抑制素 MYOSTATIN MSTN 过表达反义RNA

罗氏沼虾Rab11基因cDNA克隆及其组织表达分析被引量：2: 2016年; 为了发掘罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)免疫相关基因,研究Rab蛋白(Ras-related proteins in brain)在罗氏沼虾免疫应答中发挥的作用,研究采用RACE-PCR技术克隆了罗氏沼虾Rab11基因全长c DNA序列,记为Mr Rab11。全长1381 bp,包括226 bp的5′UTR,511 bp的3′UTR和645 bp的开放阅读框,编码214个氨基酸,含有一个Rab结构域。氨基酸序列比对显示,罗氏沼虾与冈比亚按蚊(Anopheles gambiae)、蚤状溞(Daphnia pulex)、叶蝉(Homalodisca vitripennis)Rab11一致性分别为82%、83%和82%。软件预测,Mr Rab11编码的蛋白分子量约为23.75 k D,等电点约为5.34。实时荧光定量表达分析表明,Mr Rab11基因在罗氏沼虾各组织中都有表达,肝胰腺中的表达量最高,其次是肌肉和肠道。在阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)感染12h后,罗氏沼虾肝胰腺中Mr Rab11的表达量上升,显著高于对照组(P<0.05),推测这是Mr Rab11对阴沟肠杆菌的应激表达,Mr Rab11在肝胰腺中参与了罗氏沼虾免疫应答过程。; 夏正龙黄雪娜黄振远陈雪峰高强濮剑威慎佩晶彭菲杨国梁; 关键词：罗氏沼虾免疫应答

草鱼两个肌肉生长抑制素cDNA克隆、表达及过量表达对胚胎发育的影响被引量：18: 2011年; 肌肉生长抑制素(MSTN)是抑制肌肉生长和发育的重要生长调控因子。通过cDNA末端快速扩增法(RACE)克隆草鱼MSTN-1型和MSTN-2型全长cDNA。RT-PCR分析结果表明,MSTN-1在草鱼肌肉、脑和眼中的转录量较高,在肝胰脏、脾脏和心的转录量较低,在肠、腮、性腺和肾中无表达;MSTN-2只在脑和肌肉中有表达。在草鱼胚胎发育的0-36 hpf期间,MSTN-1的转录量较低;在胚胎发育的36-48 hpf期间,其转录量呈逐渐升高的趋势;MSTN-2各时相均无表达,可能因为该基因在草鱼胚胎发育过程中不起重要作用。通过分别显微注射MSTN-1型和MSTN-2型mRNA至斑马鱼1-2细胞期胚胎。结果显示,注射MSTN-1型mRNA过表达可导致斑马鱼体节发生期胚胎的前-后轴拉长,背-腹轴变短,脊索轻微扭曲,以及体节发育受到强烈抑制而不分化等现象。注射MSTN-2型mRNA胚胎早期发育有所延迟并未发生明显变化,但发育至60 h之后尾部明显发生严重弯曲。; 濮剑威孙成飞蒋霞云邹曙明; 关键词：草鱼肌肉生长抑制素克隆过表达

草鱼肌肉生长抑制素(MSTN)-1基因的克隆、表达、反义抑制及过量表达对胚胎发育的影响: 濮剑威沈睿杰邹曙明; 关键词：草鱼肌肉生长抑制素 MYOSTATIN MSTN 过表达反义RNA

团头鲂形态发育相关基因HoxB1b的克隆及功能研究: 2011年; 脊椎动物Hox族基因是一类重要的生长和发育调控基因,它编码具有螺旋—转角—螺旋结构的转录因子,能与下游靶基因特定区域结合并激活表达,从而调节脊椎动物胚胎发育过程中前后轴的形态建成。利用cDNA末端快速扩增法(RACE)克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)HoxB1b基因的全长cDNA序列,并研究了该基因的表达模式。结果表明:(1)团头鲂HoxB1b基因cDNA全长为1 479 bp,其中包括一个编码306个氨基酸残基的921 bp阅读框,聚类分析结果表明,该基因与斑马鱼、红鳍东方鲀、青鳉的相似度分别为89%、45%、40%,在脊椎动物中具有一定的保守性;(2)RT-PCR分析结果显示,HoxB1b在团头鲂胚胎发育过程的各时期均有稳定表达,但在成熟卵中未检测到该基因的表达,表明该基因属非母源表达类型。进一步的整胚原位杂交结果显示,HoxB1b在团头鲂不同时期胚胎存在明显的空间表达差异,受精后20 h(20 hours post fertilization,20hpf)胚胎主要在后脑表达,受精后40 h(40hpf)胚胎除了在后脑表达外,在胸鳍也检测到表达;(3)HoxB1b基因在团头鲂成鱼部分组织或器官中有表达,且在雌雄鱼中基因表达量有一定差别。综上所述,团头鲂HoxB1b基因的功能与胚胎前后轴上的后脑和胸鳍发育密切相关,并在团头鲂成鱼相关组织中具有重要生理功能。; 濮剑威何珠子邹曙明; 关键词：团头鲂克隆 RT-PCR

罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)幼体病原肠杆菌PCR检测技术的建立与应用被引量：4: 2015年; 根据罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)幼体培育期主要细菌性病原阴沟肠杆菌omp A基因序列、产气肠杆菌gry B基因序列设计特异性引物,通过对PCR扩增产物进行测序鉴定与特异性和敏感性试验,建立了两种病原菌的PCR快速检测方法,并对发病样品进行了检测。结果显示,设计的阴沟肠杆菌与产气肠杆菌检测引物能分别扩增出与预计大小一致的385 bp和201 bp的特异性片段,与其余供试菌株无交叉反应。两种检测方法的灵敏度分别为103 CFU/ml和102 CFU/ml。罗氏沼虾幼体样品的检测结果与实际发病情况一致,建立的检测方法也可直接对样品进行PCR检测,而无需细菌分离培养。本研究建立的阴沟肠杆菌与产气肠杆菌PCR检测方法具有较高的特异性与灵敏度,可缩短检测时间,该方法的建立对罗氏沼虾幼体病原的快速诊断、分子流行病学的调查及无特定病原(SPF)群体的建立具有重要意义。; 陈雪峰杨国梁高强夏正龙濮剑威慎佩晶黄振远; 关键词：罗氏沼虾阴沟肠杆菌产气肠杆菌 PCR检测

草鱼肌肉生物抑制素基因克隆及功能研究: 基因功能和转基因是鱼类育种领域重要的研究方向。通过对主效基因的研究，选育生长性状优良的个体从而建立良种，对大型鱼类的选育有着较为明显的实际意义。　　草鱼(Ctenopharyngodonidellus)是我国特有的经...; 濮剑威; 关键词：草鱼过表达; 文献传递

罗氏沼虾“南太湖2号”种虾与2个引进群体形态特征的比较被引量：4: 2018年; 采用主成分分析与方差分析以及判别分析等统计学方法比较研究采用BLUP(best linear unbiased prediction)技术选育出的罗氏沼虾"南太湖2号"与引种自缅甸及孟加拉群体的体质量、体长、头胸甲长、尾扇长、体高等11个性状数据及它们之间的比值。主成分分析结果表明,全长、头胸甲长、体宽和体高为主要变量。雄虾第一主成分有统计学意义上的显著差异,雌虾无显著差异。方差分析结果表明,3个群体雄虾的体质量/体长差异极显著,雌虾的体质量/体长、体高/体长和尾扇长/体长差异极显著,头胸甲长/体长差异显著。建立了3个罗氏沼虾群体判别函数,雄虾综合判别准确率为54.6%,而雌虾综合判别准确率为71.2%。"南太湖2号"体质量和体长分布集中,雄虾更加明显。整体上"南太湖2号"规格较大且整齐,雌虾具有较大的头胸甲,较高的体高和较小的尾扇,这可能表示着该群体潜在的繁育优势,与弱化的运动能力。定向选育是"南太湖2号"规格较大且整齐的主要成因。; 黄振远陈雪峰李喜莲濮剑威高强慎佩晶彭菲张宇飞; 关键词：罗氏沼虾方差分析

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