王敏君
- 作品数：20 被引量：20H指数：3
- 供职机构：第二军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 移植细胞实现肝脏有效再殖的机制研究
- 2020年
- 细胞移植是目前代替原位肝移植治疗终末期肝脏疾病最具可行性的方法。然而由于细胞来源、移植细胞植入受体肝脏效率低、增殖缓慢等问题,极大地限制了细胞移植治疗方式在临床上的广泛应用。近年来,通过人为修饰改变移植细胞和宿主肝脏微环境和肝细胞的特性,使得移植细胞再殖肝脏取得了实质性的进展。本文主要综述目前已经成功实现肝脏再殖的研究成果,并探讨移植细胞在不同动物模型中再殖肝脏的潜在机制。
- 阎琛刘清桂陈佳佳孙宇杨桃朱海英陈费王敏君
- 关键词：细胞衰老
- 诱导胆囊源干细胞分化为功能性肝实质细胞的方法与应用
- 本发明涉及生物技术和细胞治疗领域，公开了诱导胆囊源干细胞分化为功能性肝实质细胞的方法与应用；包括步骤：在第一培养基、第二培养基、第三培养基的存在下，在培养体系中培养胆囊源干细胞，从而获得功能性肝实质细胞。本发明获得的功能...
- 陈费王敏君金宜强徐守佳
- 医学细胞生物学课程的调查分析和改进建议
- 2016年
- 《医学细胞生物学》是医学院校本科生基础课程之一。随着当今社会医学和生物学的进步,如何顺应发展,与时俱进,提高该跨学科课程的教学效果是教师的重要职责和目标。为了探讨医学本科生《医学细胞生物学》的教学方法和提升教学效果,对第二军医大学医学本科生进行了问卷调查。根据调查结果,从课程兴趣,教学效果以及改进建议等方面进行了分析,并提出了相应的具体改进方法。主要包括优化、整合与适当拓展教学内容,增加教学过程中的互动,开设专题知识讲座,改进实验课的内容以及适当开放实验室、增加课外研究课题等方面。总的来说,通过对《医学细胞生物学》的改进建议,以优化该课程的教学方法,为教学质量的提高以及学生综合能力的培养奠定基础。
- 陈费王敏君李建秀朱海英胡以平
- 关键词：医学细胞生物学问卷调查教学改进
- 肝脏发育相关信号通路
- 2011年
- 肝脏发育从肝芽的出现开始,到肝祖细胞的形成,接着肝祖细胞的增殖、分化和迁移,直至最后器官的形成,经历了复杂的细胞信号调控过程。本文综述了肝脏发育过程中常见的信号调控作用,包括成纤维生长因子(fibroblast growth factor,FGF)、骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)、β-转化生长因子(transforming growth factor-β,TGF-β)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)和Wnt等信号通路,并重点讨论了在胚胎阶段调控肝脏发育的信号途径以及肝细胞和胆管细胞发育成熟过程中的信号因子作用,最后对肝脏再生相关的信号调控进行了简要介绍。
- 陈费王敏君向导刘长城何志颖王欣胡以平
- 关键词：信号通路肝细胞肝再生
- 人成体肝细胞在Fah^(-/-)Nod/Scid小鼠肝脏中的显著增殖被引量：1
- 2010年
- 利用人肝细胞异种移植到受体鼠肝内建立人源化肝脏的嵌合体小鼠(人鼠嵌合肝)对药物代谢、乙型肝炎病毒等嗜肝性病毒及其疫苗的研究具有重要意义.研究表明,利用Fah-/-Rag2-/-Il2rg-/-三基因剔除小鼠可获得人肝细胞在小鼠肝脏中的显著再殖,但较高的死亡率及纯合子不能用于繁殖,制约着该小鼠模型的规模化应用.本研究结合延胡索酰乙酰乙酸水解酶基因剔除(Fah-/-)小鼠的肝脏再殖优势和Nod/Scid小鼠异种移植的特点,将这两种小鼠进行杂交繁育建立Fah-/-Nod/Scid小鼠品系,Fah-/-Nod/Scid小鼠可以纯合保种并能正常繁殖.采用提前停药的预处理方案,结合FK506处理,移植的人成体肝细胞能够实现在Fah-/-Nod/Scid小鼠肝脏中的显著增殖,肝脏再殖程度达到30%以上.采用体重曲线、肝功能和人肝细胞功能蛋白表达等三方面指标评价嵌合肝脏中人肝细胞的功能,结果表明再殖的肝细胞具有正常的人肝细胞功能.这些结果表明,Fah-/-Nod/Scid小鼠可以作为理想的可规模应用的人鼠嵌合肝模型,该技术体系的改进简化了Fah-/-小鼠作为人源化肝脏小鼠模型的实用性问题.
- 苏宝亮刘长城向导张海斌袁斯明王敏君陈费朱海英何志颖王欣胡以平
- 关键词：人肝细胞细胞移植NOD/SCID小鼠
- 医学细胞生物学实验教学模块教学设计探讨被引量：9
- 2014年
- 医学细胞生物学实验课教学的重要地位日益凸显,而实验课教学中课程内容设置的问题不容忽视。常规课程内容多以验证性实验为主,缺乏综合能力和创新能力的培养,也不利于发挥学生的积极性和主观能动性。在教学实践中,以"模块"为单位组织教学内容,各模块之间具有相对的独立性,在同一模块中可以进行内容、设备和师资的更新和补充,可针对不同的教学对象和教学层次的需要而选择相应的教学模块进行组合,从而更加强调系统集成的特点,使教学内容更具先进性、针对性、灵活性和可选择性,解决了教学内容陈旧过时和学时分配不合理的问题。
- 何志颖王敏君陈费谢志芳张红霞李建秀朱海英胡以平
- 关键词：细胞生物学实验课教学模块
- 肝细胞多倍化的研究进展
- 2017年
- 多倍体肝细胞含有两组或两组以上的DNA染色体组,是哺乳动物成熟肝细胞的典型特征。肝细胞多倍化过程首次发生在出生后的肝脏发育过程中,主要由胰岛素-Akt信号通路调控的细胞质不完全分裂导致。随着年龄的增加,多倍体肝细胞的比例还会继续升高,老年小鼠和人肝脏中多倍体肝细胞比例可高达90%和40%。而当肝脏受到肝脏切除、毒性刺激和代谢过载以及氧化应激等病理损伤时,肝细胞多倍化现象会再次发生。但是,当衰老的多倍体肝细胞在年轻小鼠肝脏中发生增殖时,不仅可产生低倍体肝细胞,还可以逆转其衰老特征。生理和病理过程中多倍体肝细胞的生物学功能备受争议,一般认为与细胞的成熟和终末分化、细胞衰老以及疾病有着重要的关系。本文主要阐述正常生理发育和病理条件下多倍体肝细胞形成过程及潜在的生物学意义,以及多倍体肝细胞逆转对临床肝脏疾病研究的可能提示。
- 阎琛刘清桂陈佳佳孙宇韩进陈费朱海英王敏君
- 关键词：多倍化
- 依托医学细胞生物学课程,以专业特色推进干细胞教学被引量：1
- 2016年
- 干细胞研究是当今生命医学领域的前沿,由于其在生物和临床医学领域有非常强的应用潜力和理论价值受到世界各国的高度关注。以医学细胞生物学课程为依托,专业化、针对性地进行干细胞生物学的教学,使得医学院校各个专业学生快速地理解专业相关干细胞生物学基础知识和前沿进展,是培养专业人才、提高教学质量的有效途径。
- 王敏君陈费朱海英胡以平
- 关键词：细胞生物学
- 下调SIRT6对肝癌干细胞干性维持的抑制作用被引量：1
- 2020年
- [目的]探讨抑制SIRT6表达在肝癌干细胞干性维持中的作用及潜在机制。[方法]在不同肝癌细胞系中构建肝癌干细胞模型(Lv-Pnanog-GFP),利用流式细胞术分选出不同来源的肝癌干细胞,采用蛋白免疫印迹(Western blot,WB)和免疫细胞化学(immunocytochemistry,ICC)技术检测SIRT6蛋白在肝癌干细胞中的表达水平;构建SIRT6慢病毒短发卡RNA感染载体(shSIRT6)感染肝癌干细胞,采用WB技术检测shSIRT6的干扰效率;采用实时定量反转录聚合酶链反应(real-time PCR)检测抑制SIRT6后肝癌干细胞的干性基因(Nanog、OCT4、CD13、SOX2、EpCAM、CD44)mRNA的表达水平,ICC方法检测EpCAM蛋白的表达水平;采用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)试剂盒和细胞增殖活力(CCK8)试剂盒检测抑制SIRT6表达后肝癌干细胞的增殖能力;采用克隆形成和成球实验检测抑制SIRT6后肝癌干细胞的自我更新能力;利用衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)试剂盒检测抑制SIRT6后肝癌干细胞的衰老水平。[结果]WB和ICC检测结果显示,Nanog阳性肝癌干细胞中SIRT6表达水平明显高于Nanog阴性肝癌细胞;real-time PCR检测结果显示,抑制SIRT6后,肝癌干细胞的干性基因(Nanog、OCT4、CD13、SOX2、EpCAM、CD44)mRNA表达水平降低。与real-time PCR结果一致,ICC结果也表明,抑制SIRT6后,干性标志物EpCAM的蛋白表达水平降低(P<0.01)。细胞增殖检测结果进一步显示,抑制SIRT6,肝癌干细胞的增殖水平降低(P<0.05)。克隆形成实验和细胞成球实验结果显示,抑制SIRT6导致肝癌干细胞的克隆形成能力和成球能力一致性降低(P<0.01)。SA-β-Gal活性检测结果显示,抑制SIRT6后,肝癌干细胞的SA-β-Gal活性显著性提高(P<0.01)。[结论]肝癌干细胞高表达SIRT6,通过抑制SIRT6表达可诱导肝癌干细胞发生衰老,导致其干性标志物表达水平下降,增殖能力降低,肝癌干细胞克隆形成和成球能力下降。
- 刘清桂苏静陈佳佳陈费杨桃向桂齐阳王敏君
- 关键词：组蛋白去乙酰化酶肝癌干细胞NANOG干细胞特性衰老
- 终末期肝病细胞治疗供体细胞来源的研究进展
- 2015年
- 许多因素所致的肝脏疾病都有可能发展为终末期肝病,而终末期肝病目前唯一有效的治疗方法就是原位肝移植。然而,由于受供体肝脏短缺等因素的限制,细胞治疗方法一直被临床上所期待。近年来,基于谱系重编程的诱导型肝干细胞和诱导型肝实质细胞的技术体系的出现,为解决肝脏疾病细胞治疗中细胞来源匮乏的问题提供了新的思路,也加速了肝脏疾病细胞治疗研究向临床转化的进程。该文介绍了肝脏疾病细胞治疗研究中供体细胞来源的现状,并重点介绍了谱系重编程获取肝系细胞的研究进展。
- 孙筱于兵陈费王敏君何志颖胡以平
- 关键词：终末期肝病细胞移植肝实质细胞肝脏干细胞
