王敏强
- 作品数：37 被引量：199H指数：8
- 供职机构：烟台大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学环境科学与工程更多>>
- 细胞生物学实验教学改革与实践被引量：4
- 2014年
- 细胞生物学实验是生命科学专业的一门专业基础实验课，我们结合多年的实验教学，从实验课程安排．教学手段和考核体系三方面进行了改革。旨在提高教学效果，调动学生学习的积极性和主动性，培养学生的创新和科研能力。
- 李倩石慧赵振军刘晓玲王敏强崔龙波
- 关键词：细胞生物学教学改革
- 大通牦牛4种血清激素浓度变化规律研究被引量：1
- 2005年
- 首次对生长牦牛3个年龄段(5～15、17～27、29～39月龄)的4种血清激素:生长激素、胰岛素、甲状腺素和三碘甲腺原氨酸(GH、INS、T4和T3)浓度进行了1年6次的跟踪测定.结果表明,生长牦牛的4种血清激素浓度在性别间没有明显差异(P＞0.05).5～39月龄牦牛血清GH、INS、T4和T3平均浓度分别为(1.635±0.914)ng·mL-1、(261.916±85.987)μg·mL-1、(46.775±17.74)ng·mL-1和(1.190±0.707)ng·mL-1.血清4种激素浓度在3个年龄段间和月份-季节间的变化十分明显.GH、INS和T4浓度从1月份到3月份都有所下降,特别是GH浓度迅速由1月份的2.913ng·mL-1下降至3月份的0.793 ng·mL-1,是此时生长牦牛在严寒(通常低于-20℃)和饥饿双重打击下,机体动员体组织贮备以适应环境的变化、维持基本生命活动的结果.INS、T4和T3浓度在暖季表现出与牧草营养供应基本同步一致的变化规律,与机体加强合成代谢有关.GH在暖季维持相对稳定或稍高水平,但这一时期生长牦牛日增重达到600～700g,证明改善机体营养状况,有提高激素受体的敏感性、促进家畜生长之作用.血清INS和T4平均浓度与平均日增重的相关系数分别达到0.738和0.805(P＜0.01),说明血清INS和T4浓度是相对重要的经济性状,可用以监控生长牦牛的营养状况和生长发育速度.
- 王敏强李萍莉渊锡藩贾青
- 关键词：牦牛
- 12个中国地方鸡种群体遗传结构及遗传多样性分析被引量：47
- 2006年
- 利用29对微卫星引物对我国的12个地方鸡种进行群体遗传结构及遗传多样性评估,结果表明:每个座位的等位基因数从2到23不等,所有的12个群体均显示较高水平的杂合度,固始鸡最低,为0.453 2,大骨鸡最高,为0.627 1。鸡种间存在较大的遗传分化,16.7%的遗传变异源于品种间的差异。基于Reynolds’遗传距离的邻近(NJ)聚类图显示,12个群体可以分为2个主要的类群:重体型的鸡种首先聚在一起,然后轻体型鸡种加入。struc-ture程序同时也被用于评价鸡种间的遗传关系,结果与NJ聚类法相似,重体型的鸡种首先与轻体型鸡种分成两类。
- 陈国宏季从亮王敏强Steffen Weigend
- 关键词：地方鸡种微卫星
- 以栉孔扇贝闭壳肌为例的几种DNA提取方法的比较研究被引量：2
- 2004年
- 以栉孔扇贝(Chlamys farreri)闭壳肌为试验材料,采用浓盐法、酚抽提法、LiCl法及改进的浓盐法和酚抽提法等提取其DNA,通过紫外吸收值测定及琼脂糖凝胶电泳法对提取的DNA质量进行分析比较。结果表明,这5种方法都能提到DNA,但改进的浓盐法和酚抽提法可将其中的蛋白质及RNA较为有效地除去,得到比较纯净的DNA。
- 王敏强张晓雯王小涛孙力龚雪琴
- 关键词：栉孔扇贝闭壳肌DNA浓盐法琼脂糖凝胶电泳
- MG132对小鼠卵母细胞排卵后老化的调控作用
- 2013年
- 为了研究蛋白酶体抑制剂MG132对小鼠卵母细胞排卵后老化的调控作用,找到抑制卵母细胞老化的方案,通过孤雌激活和胚胎发育试验系统研究了MG132在不同温度下对小鼠卵母细胞老化的调控作用,并通过体外受精发育以及细胞免疫组化试验,分别研究了15℃时MG132对卵母细胞受精后胚胎发育能力、皮质颗粒分布与BCL2蛋白水平的影响。结果表明,15℃时卵母细胞在添加1μmol/L MG132的HCZB中培养12 h,然后在37℃恢复6 h,是筛选的抑制卵母细胞老化的优化方案,说明一定低温联合适当浓度的蛋白酶体抑制剂MG132,可以有效抑制小鼠卵母细胞排卵后老化。
- 李倩赵振军崔龙波石慧刘晓玲王敏强
- 关键词：小鼠卵母细胞MG132皮质颗粒BCL2
- 黄牛、牦牛和水牛MyoG基因单核苷酸多态性分析被引量：5
- 2011年
- 采用PCR-SSCP结合DNA直接测序技术,分析黄牛(鲁西牛、渤海黑牛)、牦牛和水牛肌细胞生成素基因(MyoG)外显子1和5′侧翼部分序列的DNA多态性,旨在揭示中国3个主要家养牛种的群体遗传变异并为开展分子育种提供试验依据。结果表明,鲁西牛和水牛群体存在SSCP多态性。序列分析结果显示,渤海黑牛和牦牛MyoG外显子1和5′侧翼部分序列与GenBank相应序列完全一致。鲁西牛在外显子1发生g.48 G→C颠换,由此形成GG、GC和CC 3种基因型,G、C等位基因频率分别为0.743 7、0.266 4;水牛分化明显,发生6处突变,位于g.-5 A→T颠换导致形成AA和AT 2种基因型,A、T等位基因的频率分别为0.825 0、0.175 0;另外5处突变发生在外显子1序列中,其中g.210 T→C颠换是水牛特异性的限制性酶切位点。所有突变均发生在三联体密码子的第3位,且均为同义替代。编码氨基酸在4个牛群体间完全一致。推测鲁西牛MyoG基因外显子1的g.48 G→C突变可能是一个与生长发育性状存在一定相关性的潜在SNP位点。
- 王敏强苏培刘晓玲赵振军武拴虎张志强李倩
- 关键词：黄牛水牛牦牛肌细胞生成素基因
- 线粒体COⅢ基因分析三种常见鲳鱼的亲缘关系被引量：2
- 2018年
- 金鲳(Trachinotusovatus)、银鲳(Pampusargenteus)和中间低鳍鲳(Peprilusmedius)是重要经济鱼种,其中后两种鱼外形较为相似,分类一直存在分歧.本研究随机采集烟台、青岛地区银鲳、中间低鳍鲳和金鲳的生鲜海鱼样本,提取3种鱼的全基因组DNA,设计通用引物对目标基因进行PCR扩增和测序,后对其线粒体COⅢ全序列及ATP6部分序列进行基因多态性分析,探讨3种鱼的亲缘关系;依据测序结果,设计各鱼种的特异引物,用特异引物和通用引物进行复合PCR扩增方法对各鱼种进行种源性鉴定.通过比对分析测序结果,获得了中间低鳍鲳COⅢ基因全序列及ATP6基因部分序列且收录在NCBI核苷酸数据库中,登录号分别为KT210112和KT210113.证明NCBIGenBank中发布的刺鲳(Psenopsis anomala)序列(KP334103.1)实为中间低鳍鲳.遗传距离分析发现银鲳与金鲳的距离最大,与中间低鳍鲳次之,中间低鳍鲳与金鲳的遗传距离最小.采用复合PCR方法,实现了在同一复合PCR体系中有效区分3种鱼的方法,具有更加便捷、准确的优势.
- 刘军曹佳宝刘彩玲刘云国王敏强
- 关键词：系统进化分析复合PCR种属鉴定
- 基于NCBI核酸数据库资源的黑曲霉微卫星序列的筛选
- 2017年
- 为了筛选黑曲霉微卫星序列,丰富黑曲霉的基因组资料,从而为开发黑曲霉多态性高的微卫星标记提供参考,本研究利用生物信息学方法在黑曲霉基因组中查询微卫星序列,并对其基因组中微卫星数量、丰度进行了研究.利用SSRHunter 1.3在长度为2704975 bp的黑曲霉基因组中找到了171个微卫星序列.结果表明:在黑曲霉微卫星序列所有重复类型中,以两碱基重复数目最多,为92个,占重复序列总数目的 53.80%;其次是三碱基重复,为70个,占40.94%;再次是四碱基9个,占5.26%.在两碱基重复序列中,AG重复类型最多(24.56%),GC最少(1.17%).三碱基重复序列中,共发现10种重复类别,其中以ACC重复类型最多(7.01%),最少的是AAT,ATC和GCC,占1.75%.四碱基重复中,共发现8种重复类别,除GGAT重复序列为2个(1.17%)外,其他分别各有1个(0.58%).同时选取黑曲霉中二碱基的重复次数在七次以上的微卫星序列和三碱基的重复次数在六个以上的微卫星序列,利用Primer Premier5.0软件来设计引物,为后续微卫星标记的筛选奠定基础.
- 李瑶瑶刘云国张亮高新玉王敏强刘凌霄
- 关键词：黑曲霉微卫星序列生物信息学基因组
- 保存温度与时间对动物组织DNA提取质量的影响被引量：14
- 2009年
- [目的]研究不同保存温度、不同保存时间对蟹肉总DNA提取质量的影响,为同类研究提供借鉴。[方法]将样品在4、-20和-40℃下分别保存4、8和15d,提取螯足内肌肉总DNA,测定总DNA的紫外吸收值,并设计引物扩增其mtDNAND6基因,采用琼脂糖凝胶电泳分别对提取的总DNA及PCR结果进行检测。[结果]由鲜活蟹组织提取的DNAA260与A280的比值因蛋白污染而较低;15d内4℃与-40℃条件下保存的DNA提取率和条带检出率均无明显差异,而-20℃下的保存效果受时间影响明显。各处理组合总DNA的A260与A280比值在1.79～2.00;利用上述DNA作模板,扩增其特定基因mtDNAND6均可获得预期长度的PCR条带。[结论]短期保存组织宜选择4℃,若需较长时间保存时则宜选择-40℃以下的低温。
- 王敏强王斌刘晓玲
- 关键词：三疣梭子蟹肌肉组织DNA提取
- 牛亚科3个主要家养牛种MyoG基因多态性及其遗传分化被引量：3
- 2011年
- 对普通牛(鲁西牛、渤海黑牛)、天祝牦牛和中国广西水牛的MyoG基因部分核苷酸序列变异进行了分析,旨在揭示不同牛种群的DNA多态性及其遗传分化.采用PCR和DNA直接测序技术获得4个牛群体的MyoG基因exon 1和5’侧翼部分序列,与GenBanK公布的牛亚科动物同源序列作比对分析.结果显示,在渤海黑牛和牦牛未发现多态位点;鲁西牛存在1个多态位点,定义了2个单倍型;水牛有6个突变位点,但群内只发现1个多态位点.核苷核苷酸多样性(Pi)在0.000 00～0.001 35之间,说明群体内遗传多态性程度较低。核苷酸歧义度(Dxy)以水牛与鲁西牛之间比较最高,为0.013 97,表明水牛遗传分化明显.种系进化树分析表明,牦牛与普通牛亲缘关系很近,二者与水牛关系较远,支持将牦牛归为牛属(Bos)的一个亚属或一个种的观点.
- 王敏强苏培刘晓玲武拴虎张志强
- 关键词：普通牛MYOG基因遗传分化
