王立林
- 作品数：12 被引量：14H指数：2
- 供职机构：十堰市太和医院更多>>
- 发文基金：湖北省教育厅青年基金湖北省卫生厅科研基金湖北省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- pET15b-pep-1-p27mt的构建、表达及意义
- 2005年
- 构建细胞穿膜肽(cell-penetrating peptides,CPPs)PEP-1和细胞周期抑制蛋白p27mt的重组体,并在大肠杆菌中表达。将已构建的表达细胞周期抑制蛋白p27mt的基因,克隆入pET15b-pep-1原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)LysS内,以IPTG诱导融合蛋白表达。表达产物用SDS-PAGE及Western blot分析鉴定。结果:成功地构建PEP-1-p27mt融合蛋白原核表达载体,并在IPTG诱导下获得特异性的表达。PEP-1-p27mt融合蛋白表达载体的构建,为体内应用细胞周期抑制蛋白诱导肿瘤细胞凋亡提供了理论基础。
- 王立林严世荣汪炳华王家宁黄永章
- 关键词：PEP-1抑癌基因
- PEP-1-P27mt融合蛋白原核载体的构建、表达及意义
- 目的：构建细胞穿膜肽(CPPs)PEP-1和细胞周期抑制蛋白P27mt融合蛋白的原核载体，并在大肠杆菌中表达。
方法：用PCR法扩增pORF9-hp27mt中含有目的片段的DNA区域，低熔点琼脂糖电泳回收607bp...
- 王立林
- 关键词：抑癌基因克隆
- 文献传递
- 腰麻与听力损害被引量：1
- 2007年
- 周龙王立林李元涛
- 关键词：麻醉腰麻听力损害
- 术中用冷盐水冲洗胸腔致室颤一例被引量：1
- 2008年
- 周龙王立林李元涛
- 关键词：胸腔冲洗心室颤动冷盐水
- 右侧颈丛神经阻滞诱发同侧一过性听力障碍1例
- 2009年
- 患者，男性，14岁，41kg，162cm，因右侧锁骨骨折术后1年，愈合良好，拟行内固定钢板取出术入院，选择右侧颈丛神经阻滞。各项术前常规检查未见明显异常，ASAI级，无慢性疾病及耳疾病史，无应用耳毒性药物史，无长期配戴耳机史。麻醉前30min肌肉注射阿托品0．4mg和苯巴比妥80mg。局麻药采用0．25％左旋布比卡因与1％利多卡因的混合液，不加肾上腺素。消毒，铺巾后用22G穿刺针于右侧乳突至锁骨中点连线的中点垂直皮肤进针，抵达横突后注射局麻药3ml，然后退针至肌膜下向乳突、锁骨和颈前方向各注射局麻药3ml局部浸润，每次注药前均回抽无血或脑脊液。
- 周龙王立林李元涛杨京利
- 关键词：颈丛神经阻滞听力障碍一过性同侧肌肉注射
- 异丙酚对氯化钾和咖啡因诱发豚鼠耳蜗外毛细胞钙离子移动的影响
- 2008年
- 目的:评价异丙酚对氯化钾和咖啡因诱发豚鼠耳蜗外毛细胞钙离子移动的影响,探讨其对听觉外周感受器(耳蜗)的作用。方法:急性分离豚鼠耳蜗外毛细胞,选择30个活力较高的外毛细胞,随机分为3组(n=10):对照组(C组)、30μmol/L异丙酚组(P1组)和100μmol/L异丙酚组(P2组)。用Fluo-3AM钙荧光指示剂染色后,P1组和P2组分别给予30、100μmol/L异丙酚或咖啡因处理5min,然后加入氯化钾,采用激光共聚焦显微镜测定细胞内荧光强度的峰值,反映细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的变化。结果:异丙酚可抑制氯化钾诱发的[Ca2+]i增加并与浓度呈正相关,而对咖啡因诱发的[Ca2+]i增加无明显影响。结论:异丙酚可抑制豚鼠耳蜗外毛细胞Ca2+跨膜内流,降低[Ca2+]i,而对内质网功能无明显影响。
- 周龙王立林李元涛秦成名刘菊英
- 关键词：毛细胞耳蜗
- 1PEP-1-p27mt融合蛋白的原核表达及纯化
- 2008年
- 目的:构建融合蛋白PEP-1-p27mt的原核表达质粒,并进行诱导表达和蛋白纯化。方法:通过PCR方法自pORF9-hp27mtv21质粒中扩增p27mt基因,克隆入中间载体pGEM-TEasy Vector。经XhoI和BamH1双酶切后,构建原核表达载体pET15b-pep-1-p27mt,经测序证实构建成功后转化EcoliBL21(DE3)pLysS,表达PEP-1-p27mt融合蛋白,经Ni-NTA树脂亲合层析,纯化产物进行SDS-PAGE及Western Blot分析鉴定。结果:成功构建PEP-1-p27mt融合蛋白原核表达载体,表达并纯化了相对分子量为32×103的PEP-1-p27mt融合蛋白。结论:PEP-1-p27mt融合蛋白表达载体的构建及目的蛋白的表达纯化,为体内应用细胞周期抑制蛋白诱导肿瘤细胞凋亡的研究提供了理论基础。
- 周龙王立林朱明磊王家宁黄永章严世荣
- 关键词：蛋白质类提纯方法双酶
- 细胞穿膜肽的研究进展被引量：7
- 2006年
- 细胞穿膜肽是一类能携带大分子物质进入细胞的短肽,其穿膜能力不依赖经典的胞吞作用。经过对天然存在的细胞穿膜肽的生物化学性质研究,已经逐渐掌握了细胞穿膜肽的一些共有特性,这类物质均为带有正电荷的长短不等的多肽片段,其中富含精氨酸、赖氨酸等碱性氨基酸残基,二级结构皆具有α-螺旋的空间构象。利用这些特性,目前已人工合成了穿透力更强、效率更高的穿膜肽PEP-1、MPG,并且成功地携带大分子物质进入细胞发挥生物学活性。
- 严世荣王立林邱方城
- 关键词：蛋白转导域基因治疗
- 改革生化实验教学，培养学生创新能力
- 对生物化学实验教学的教学内容、教学方法、成绩考核等方面进行了一系列改革。将实验教学分为基本实验,综合型实验和设计型实验。精选教学内容,合理安排实验顺序,由浅入深,循序渐进。实践证明,在新的教学机制下,学生充分认识到生物化...
- 唐微孙设宗王立林李强孙剑
- 文献传递
- 水稻茎尖离体培养发育和成苗的研究
- 王立林
- 关键词：水稻离体培养茎尖
