王继成
- 作品数：4 被引量：51H指数：1
- 供职机构：中山大学中山医学院医学遗传学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 变性高效液相色谱技术在糖原贮积症Ⅰa型基因诊断中的应用
- 目的 糖原贮积症Ⅰa型(GSD Ⅰ a)是一种由于葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)缺陷所导致的常染色体隐性遗传的糖原代谢障碍性疾病。目前,GSD Ⅰ a型尚无有效的治疗方法 ,基因治疗尚在探索研究中,很多患儿在成年前死...
- 王继成陈淑芬蒋玮莹
- 关键词：变性高效液相色谱葡萄糖-6-磷酸酶基因诊断
- 广东地区地中海贫血致病基因的基因型及β珠蛋白基因多态性研究被引量：51
- 2013年
- 目的了解近年来广东地区人群中α、β珠蛋白基因的基因型分布，并对β珠蛋白基因的单核苷酸多态性（SNP）进行研究，为更准确地进行地中海贫血的遗传诊断提供理论依据。方法利用单管多重PCR检测3种5缺失型地中海贫血，采用反向杂交（RDB）／PCR技术检测α^CS、α^QS、α^WS 3种α非缺失型及中国人常见的18种β珠蛋白的基因突变，对454份广东籍受检者标本进行地中海贫血基因分型，对其中的142份标本进行变性高效液相色谱（DHPLC）分析和β珠蛋白全基因测序，分析广东地区人群β珠蛋白基因SNP。结果在438例基因分析确诊的地中海贫血患者中，α、β、αβ复合型地中海贫血分别为246、164和28例。246例5地中海贫血患者中，检出αα/--^SEA197例、αα／-α^3.7 20例、αα／-α^4.2 9例。164例β地中海贫血中，152例（92．7％）为杂合子，以CD41—42、IVS-Ⅱ-654、-28和CD17为主；8例（4．9％）为复合杂合子，4例（2．4％）为纯合子。DHPLC结合测序筛查B珠蛋白基因与RDB诊断结果一致，并发现9种SNP，其中IVS—Ⅰ-13G〉A、IVS-Ⅱ-310 T〉C未见报道。在检测标本中，有4种SNP频率较高，73．2％的患者同时合并其中3种SNP（rs713040、rs10768683、rs1609812）。结论在α地中海贫血中，主要以αα／--^SEA基因型为主；β地中海贫血以CD41—42、IVS—Ⅱ-654、-28、CD17为主要突变类型；β地中海贫血复合杂合子、纯合子及αβ复合型地中海贫血的频率较高。DHPLC结合β珠蛋白全基因测序可以快速、有效地检出常见β地中海贫血突变型。rs713040、rs10768683、rs7480526、rs1609812在筛查人群中频率较高。
- 刘玲蒋玮莹许世艳陈娟陈路明田秋红王继成
- 关键词：地中海贫血基因检测珠蛋白类
- 聚合酶链式反应非特异性扩增抑制因子的发现以及全血直接PCR检测G 6PD基因外显子3-4突变
- 2010年
- 目的(1)研究消除PCR反应非特异性扩增新技术。(2)研究全血直接PCR能否用于葡萄糖6-磷酸脱氢酶基因突变检测。方法(1)将新鲜全血混合基因组DNA进行PCR扩增,看全血能否抑制基因组DNA非特异性扩增,将新鲜人血清混合基因组DNA进行PCR扩增,看新鲜人血清能否抑制基因组DNA非特异性扩增。(2)将1μl全血加入PCR反应液,98℃变性后转入PCR循环,使用Taq(Fermentas)扩增G6PD基因外显子3-4,取扩增产物50μl进行DNA双向自动测序,使用ClustalX软件将测序结果与基因库中标准G6PD基因外显子3-4序列进行比对分析。结果(1)发现新鲜全血能抑制基因组DNA非特异性扩增,进一步研究发现是新鲜人血清抑制了基因组DNA非特异性扩增。(2)全血直接PCR加上DNA测序找到一例G6PD突变g.13503A>G。结论(1)新鲜人血清中存在PCR非特异性扩增抑制因子。(2)使用Taq DNA聚合酶(Fermentas)能进行全血直接PCR扩增,加上DNA测序可用于G6PD基因突变研究。
- 余升红丁峰王继成蒋玮莹
- 关键词：突变检测
- X-连锁隐性遗传鱼鳞病患者STS基因及其侧翼序列断裂位点的分析
- 目的 X-连锁隐性遗传鱼鳞病(XLRI)是一种与类固醇硫酸酯酶(STS)缺乏有关的遗传性角化障碍性皮肤病.近90％的XLRI病人存在STS整个基因或其侧翼序列大片断缺失,少部分病人是因STS基因部分缺失或点突变引起.XL...
- 王继成蒋玮莹
- 关键词：基因缺失变性高效液相色谱技术
