王美清
- 作品数：25 被引量：97H指数：6
- 供职机构：中南大学湘雅医学院附属海口医院更多>>
- 发文基金：海口市重点科技计划项目海南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- FLAG Pull-down技术筛选人乳腺癌细胞中NGAL相互作用蛋白被引量：1
- 2017年
- 目的构建含有NGAL基因的p3XFLAG-NGAL真核表达载体并对其进行鉴定,获取人乳腺癌细胞MCF7中NGAL相互作用蛋白。方法提取MCF7细胞中总RNA,反转录为c DNA后采用聚合酶链反应扩增NGAL基因,上下游分别引入NotⅠ和Eco RⅠ酶切位点,双酶切后将其插入p3XFLAG-CMV-14质粒中,构建p3XFLAGNGAL重组质粒,并进行双酶切和测序鉴定。采用脂质体法转染该质粒至MCF7细胞中,经Western blot检测FLAG-NGAL融合蛋白的表达情况。再使用FLAG pull-down技术和蛋白质谱测定获取人乳腺癌细胞MCF7中NGAL相互作用蛋白。结果经过NotⅠ和Eco RⅠ双酶切及DNA测序验证,本研究成功构建p3XFLAG-NGAL真核表达载体,免疫印迹法证实转染了p3XFLAG-NGAL载体的人乳腺癌细胞MCF7高表达FLAG-NGAL融合蛋白,并利用FLAG pull-down技术筛选出人乳腺癌细胞MCF7中NGAL相互作用蛋白,经蛋白质谱测定为角蛋白-1(Keratin 1,KRT1)。结论成功构建p3XFLAG-NGAL真核表达载体,并获取人乳腺癌细胞MCF7中NGAL相互作用蛋白KRT1,为下一步研究乳腺癌的发生、发展机制提供新的思路和靶点。
- 毛山山程小珍崔荣花元建华王美清
- 关键词：乳腺癌相互作用蛋白
- 肝癌患者TACE治疗前后外周血PD-1、PD-L1的表达及临床意义被引量：11
- 2019年
- 目的探讨原发性肝癌患者行肝动脉化疗栓塞术(TACE)前后外周血程序性死亡分子1(PD-1)、配体(PD-L1)的表达及临床意义。方法采集中南大学湘雅医学院附属海口医院28例中晚期肝癌患者(肝癌组)TACE治疗前后外周血及20例健康体检者(对照组)外周血标本,流式细胞仪检测CD4+T、CD8+T细胞及抗原提呈细胞(APC)表面PD-1、PD-L1的表达,并随访PD-1、PD-L1表达与肿瘤分化、疗效的关系。结果肝癌组外周血CD4^+T、CD8^+T细胞及APC表面PD-1、PD-L1表达与对照组比较,差异有统计学意义(P <0.05),肝癌组均高于对照组;治疗前后肝癌组外周血CD4^+T、CD8^+T及APC表面PD-L1表达,差异有统计学意义(P <0.05),治疗后较治疗前下降;CD4+T、CD8^+T及APC表面PD-1表达也较治疗前下降,但差异无统计学意义(P>0.05);细胞分化差的肝癌组患者外周血PD-1、PD-L1表达较高;治疗效果差的肝癌组外周血PD-1、PD-L1表达较高。结论肝癌患者外周血PD-1、PD-L1表达升高,治疗前后监测PD-1、PD-L1表达可能预测患者预后状态。
- 程小珍李晓东王顺兰谢宗宙毛山山朱燕兴崔荣花王美清
- 脾多肽注射液联合mFOLFOX6方案治疗晚期结肠癌的效果及对免疫功能的影响被引量：12
- 2018年
- 目的探讨脾多肽注射液联合m FOLFOX6方案治疗晚期结肠癌的效果,以及了解其对患者免疫功能的影响。方法选择2013年1月~2016年12月中南大学湘雅医学院附属海口医院肿瘤化疗科收治的晚期结肠癌患者80例,按随机数字表法分为观察组和对照组,每组各40例。两组患者均给予m FOLFOX6方案化疗4个周期,观察组化疗同时加用脾多肽注射液。化疗结束后比较两组患者外周血T淋巴细胞亚群水平、近期疗效、毒副反应发生率及卡氏评分得分情况。结果化疗后,观察组CD_3^+、CD_4^+T细胞数值及CD_4^+/CD_8^+比值较化疗前均增高,差异有统计学意义(P<0.05),CD_8^+T细胞数值较化疗前下降,差异有统计学意义(P<0.05);化疗后,对照组患者CD_3^+、CD_4^+T细胞数值及CD_4^+/CD_8^+比值较化疗前均降低,差异有统计学意义(P<0.05),CD_8^+T细胞数值较化疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05);化疗后,观察组患者CD_3^+、CD_4^+T细胞数值及CD_4^+/CD_8^+T细胞比值较对照组均升高,差异有统计学意义(P<0.05),CD_8^+T细胞数值则降低,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者总有效率和疾病控制率均略高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。观察组患者化疗后Ⅲ+Ⅳ度贫血、白细胞减少的发生率均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而两组恶心呕吐、血小板减少、外周感觉神经毒性、腹泻及肝肾功能损害发生率的比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组患者化疗后的卡氏评分和生活质量改善率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在晚期结肠癌患者化疗过程中辅以脾多肽注射液能提高患者近期T淋巴细胞亚群免疫功能并促进其恢复,同时,在一定程度上减轻化疗造成的血液毒性,改善化疗后患者的生活质量。
- 毛山山程小珍崔荣花元建华王美清
- 关键词：结肠癌免疫功能
- 新辅助放化疗对直肠癌病人术后临床效果及预后研究被引量：3
- 2019年
- 目的:探讨新辅助放化疗前后直肠癌病人肿瘤微血管密度(MVD)、增殖细胞核抗原(PCNA)及血管内皮生长因子(VEGF)的变化及其临床效果和对预后的影响。方法:选择行新辅助放化疗+手术切除的直肠癌病人96例为观察组,同期仅行手术切除的直肠癌病人86例为对照组,观察组病人采用术前新辅助放化疗:术前采用6 MV X线直线加速器进行常规分割放疗、化疗;新辅助放化疗结束后4～6周进行直肠癌根治性手术。观察组取未行新辅助放化疗前及行新辅助放化疗后手术切除标本进行MVD、PCNA及VEGF表达检测;对照组取手术前病检标本及手术切除标本进行MVD、PCNA及VEGF表达检测。比较2组病人手术前后MVD、PCNA及VEGF表达及临床效果与预后情况。记录3年随访统计复发率。结果:手术后,观察组病人MVD、PCNA表达显著降低,与对照组差异均有统计学意义(P<0.01);2组病人VEGF表达差异无统计学意义(P>0.05)。术后随访3年,对照组复发率为9.3%,观察组复发率为2.1%,2组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:新辅助放化疗可以降低直肠癌病人MVD及PCNA表达。
- 李兴马丽娜彭大为王美清
- 关键词：直肠肿瘤新辅助放化疗肿瘤微血管密度增殖细胞核抗原
- 吉非替尼对晚期肺癌患者PD-L1、PD-1及Th1、Th17相关指标影响研究被引量：9
- 2017年
- 目的:研究吉非替尼对晚期肺癌患者外周血PD-L1、PD-1及Th1、Th17相关指标的影响。方法:选取晚期肺腺癌患者66例,EGFR基因检测均有突变,按治疗方法不同将其分为对照组33例和观察组33例;对照组进行含铂两药联合化疗,观察组为含铂两药联合化疗加吉非替尼治疗。采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测并分析两组治疗前后外周血PD-L1、PD-1及Th1、Th17相关指标变化。结果:治疗前两组患者的外周血PD-L1、PD-1及Th1、Th17相关指标对比无统计学差异(P均>0.05),但治疗后观察组的外周血PD-L1及PD-1均低于对照组,Th1及Th17相关指标也均显著地优于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论:吉非替尼对晚期肺癌患者PD-L1、PD-1及Th1、Th17相关指标的影响较为积极,在晚期肺癌患者中的免疫调节作用明显。
- 程小珍毛山山谢宗宙崔荣花张曙波王美清
- 关键词：TH1细胞
- KAI1/CD82和P27在胃癌中的表达及临床意义被引量：5
- 2019年
- 目的:研究KAI1/CD82和P27蛋白与胃癌临床病理特征之间的关系。方法:运用免疫组织化学SP法检测58例胃癌组织与23例正常胃组织中KAI1/CD82、P27蛋白的表达。结果:在胃癌组织中KAI1/CD82蛋白和P27蛋白的阳性表达率分别为29.3%、34.4%,在正常胃组织中KAI1/CD82蛋白和P27蛋白阳性表达率分别为90%、85%,两组之间差异均有统计学意义(P<0.05);并且KAI1/CD82蛋白和P27蛋白的阳性表达率在肿瘤的浸润深度、组织的分化程度、临床分期和淋巴结是否转移间差别具有统计学意义(P<0.05);而与年龄、性别无关(P>0.05)。KAI1/CD82与P27蛋白在胃癌组织中的表达呈正相关(r=0.286,P<0.05)。结论:KAI1/CD82蛋白和P27蛋白可能参与了胃癌的发生发展过程,联合检测KAI1/CD82与P27可能成为胃癌诊断及预后评估的新的分子标记物。
- 崔荣花王美清毛山山程小珍元建华李兴
- 关键词：KAI1/CD82P27胃癌免疫组化
- 肿瘤相关巨噬细胞的极化与原发性胃肠道弥漫大B细胞淋巴瘤复发的相关性分析被引量：1
- 2019年
- 目的:检测肿瘤相关巨噬细胞(TAM)分子表面标志物CD68、CD206在胃肠道弥漫大B细胞淋巴瘤(PGI-DLBCL)初诊和首次复发的表达变化,分析其变化与临床相关参数的关系,探讨TAM的极化在PGI-DLBCL复发中的作用。方法:收集28例PGI-DLBCL患者初诊和首次复发后淋巴瘤标本,采用免疫组织化学法分别检测TAM的分子标志物CD68和CD206的表达变化。根据CD68和CD206初诊至首次复发后表达的变化,将28例患者分为"增强"、"稳定"和"减弱"3种情况,分析其变化与临床病理参数、疾病复发的相关性。结果:CD68和CD206不同程度表达的病例所占比例间存在显著差异(P<0.05),且CD68和CD206间存在一定相关性(P=0.008)。CD68和CD206表达变化与患者年龄、性别、分期、有无B症状、病理类型、ECOG评分和IPI评分无关,CD206的表达变化与原发部位有关(P<0.05)。CD68(P=0.23)和CD206 (P=0.818)变化与肿瘤复发时间无关。结论:M2-TAM的极化促进了PGI-DLBCL复发,可能成为预测PG-DLBCL复发的相关指标。
- 孟娟高元慧徐海霞王美清陈正义
- 关键词：复发时间肿瘤相关巨噬细胞复发
- IEX-1蛋白在胃癌中的表达及其意义
- 2017年
- 目的揭示即刻早期反应X-1(IEX-1)蛋白在胃癌组织及细胞系中的表达,探讨其对人胃癌细胞凋亡和增殖的影响。方法采用免疫组织化学法检测100例胃镜活检标本中IEX-1蛋白的表达,用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot检测人正常胃黏膜细胞GES-1和胃癌细胞MKN28中IEX-1基因和蛋白的表达,同时转染IEX-1的过表达质粒pc DNA3-FLAG-IEX-1和干扰质粒p LL3.7-si-IEX-1,分别采用流式细胞术及四甲基偶氮唑盐比色法检测IEX-1对细胞周期、凋亡及增殖的影响。结果胃癌组织中IEX-1蛋白表达水平高于正常胃组织和慢性胃炎组织(P<0.05),且随着病情进展,IEX-1表达水平有逐渐升高的趋势。相对于人正常胃黏膜细胞GES-1,胃癌细胞MKN28中IEX-1基因和蛋白表达更高(P<0.05)。与对照组相比,IEX-1蛋白表达增高后S期细胞比例升高,G2期细胞比例降低,细胞增殖率升高,凋亡减少(P<0.05),而干扰IEX-1蛋白表达后,G1期细胞升高,G2期细胞比例下降,细胞增殖率下降,细胞凋亡增加(P<0.05)。结论 IEX-1蛋白在胃癌组织中呈高表达,在人胃癌细胞中上调IEX-1蛋白能促进细胞增殖,发挥抗凋亡能力,干扰IEX-1蛋白表达能阻滞细胞周期进程,并诱导凋亡。
- 毛山山程小珍崔荣花元建华王美清
- 关键词：胃癌增殖凋亡
- VEGF、MMP及IL-6相关指标的表达与非霍奇金淋巴瘤的相关性被引量：3
- 2016年
- 目的观察血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、白细胞介素-6(IL-6)的表达,并探讨其与非霍奇金淋巴瘤(NHL)的关系。方法选择2010年1月至2013年12月在我院肿瘤化疗科接受治疗的NHL患者61例作为观察组,选择同期在我院接受治疗的良性淋巴结病变患者50例作为对照组。比较两组患者的VEGF、MMP-9及IL-6表达情况,同时分析其与不同病理的关系。结果观察组患者的VEGF、MMP-9及IL-6阳性表达率分别为75.41%(46/61)、63.93%(39/61)、54.10%(33/61),均明显高于对照组的14.00%(14/50)、8.00%(4/50)、4.00%(2/50),差异均有统计学意义(P<0.05);在侵袭性病理分型、Ⅲ~Ⅳ期临床分期、肿瘤≥3 cm、高度恶化、LDH升高患者中VEGF表达阳性率更高,差异均有统计学意义(85.11%vs 42.86%,95.83%vs 35.14%,94.12%vs 68.18%,91.43%vs 53.85%,94.74%vs 61.90%,均P<0.05)。在Ⅲ~Ⅳ期临床分期、肿瘤≥3 cm、高度恶化患者中MMP-9表达阳性率更高,差异均有统计学意义(91.67%vs 18.92%,88.24%vs 54.55%,82.86%vs 38.46%,均P<0.05)。在Ⅲ~Ⅳ期临床分期以及肿瘤≥3 cm患者中IL-6表达为阳性的比例更大,差异均有统计学意义(87.50%vs 32.43%,76.47%vs 45.45%,均P<0.05)。结论 NHL患者的VEGF、MMP-9及IL-6均呈现高水平表达,同时与病理分型、恶化程度、肿瘤大小等存在显著的关系,临床上可以根据这些指标进行肿瘤治疗及预后判断,具有较高的应用价值。
- 李兴马丽娜彭大为王美清毛山山
- 关键词：非霍奇金淋巴瘤基质金属蛋白酶白细胞介素
- rAd-p53联合顺铂对胃癌细胞生长及KAI1/CD82蛋白表达的影响被引量：2
- 2016年
- 目的观察rAd-p53、顺铂(DDP)单独及联合作用于人胃癌SGC7901细胞后,对肿瘤细胞增殖凋亡情况、KAI1/CD82蛋白表达情况的影响。方法 rAd-p53、DDP单独及联合作用于胃癌SGC7901细胞株24、48、72 h后,CCK-8法测定SGC7901细胞体外增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫组化法检测KAI1/CD82蛋白表达情况。结果rAd-p53、DDP单独及联合作用于SGC7901细胞后,细胞增殖被抑制,并呈剂量和时间依赖性,且两药联合组细胞增殖抑制率明显高于单用组,与阴性对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05);rAd-p53、DDP单独及两药联合作用SGC7901细胞48h后,细胞凋亡率为36.94%±0.78%、28.79%±2.37%,69.26%±0.63%;rAd-p53、DDP单独及两药联合均可上调KAI1/CD82蛋白表达,且两药联合组更明显。结论 rAd-p53、DDP单独及两药联合均可抑制胃癌SGC7901细胞的生长,诱导其凋亡,二者联合对胃癌细胞的抑制作用增强,rAd-p53可能通过上调KAI1/CD82的表达诱导SGC7901细胞凋亡,同时增强DDP的抗肿瘤作用。
- 崔荣花王美清彭大为李建旺张曙波谢宗宙程小珍毛山山元建华
- 关键词：重组人P53腺病毒注射液SGC7901KAI1/CD82
