王艳霞
- 作品数：11 被引量：31H指数：3
- 供职机构：内蒙古农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 几种乳酸菌S-层蛋白的普查以及slp基因的克隆与序列分析被引量：5
- 2010年
- 从内蒙古传统发酵乳制品中分离的几种乳酸菌,包括干酪乳杆菌、乳酸乳球菌、发酵乳杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、双歧乳杆菌和嗜酸乳杆菌标准株(L.acidophilus ATCC4356)等为实验材料,应用SDS-PAGE方法和PCR方法分别进行S-层蛋白(S-layers pro-tein,SLP)的普查和slp基因的检测。结果表明:在各种乳酸菌中,经SDS-PAGE电泳方法检测,只有植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和其标准菌株的样品中出现膜外蛋白的可疑条带,大小为44～66ku之间,与文献报道的slp基因表达产物大小范围是一致;经PCR方法检测,只有嗜酸乳杆菌和其标准菌株L.acidophilus ATCC4356中扩增出slp基因可疑条带,其大小约为1 300 bp。并对嗜酸乳杆菌slp基因进行克隆、基因序列测序和分析。
- 双杰包秋华永胜王艳霞张和平格日勒图
- 关键词：嗜酸乳杆菌S-层蛋白克隆与序列分析
- 牛微小隐孢子虫表面抗原CP15基因原核表达及其表达产物的鉴定被引量：3
- 2012年
- 试验旨在构建微小隐孢子虫表面抗原CP15基因原核表达载体并获得重组CP15蛋白。试验以已知重组质粒pMD-CP15为模板,PCR方法扩增出CP15基因片段,并亚克隆到pGEX4T-3,构建了在E.coli BL21中GST融合表达载体pGEX-CP15;经1mmol/L IPTG进行诱导表达获得目的蛋白,其大小采用SDS-PAGE电泳和Western blotting进行鉴定。结果表明,扩增出约390bp的微小隐孢子虫表面抗原CP15基因片段并成功构建pGEX-CP15质粒,表达出分子质量为42ku的融合蛋白,与推导的理论值相符。Western blotting显示该蛋白能被GST血清识别。牛微小隐孢子虫表面抗原CP15基因在大肠杆菌中得到了高效表达。
- 满达兰丽王艳霞王敏格日勒图
- 关键词：原核表达
- Lactobacillus fermentum MG 2CRS突变体的构建及其益生作用变化
- 3制二者的生长：耐酸试验结果显示：在pH 4。5的条件下，Lf-Mutat 和Lf-Widy tipe均生长良好;在pH 3．0的条件下，Lf-Mutant生长受抑制，而Lf-Widy tipe则可良好生长;耐胆盐试验结...
- 王艳霞
- 关键词：发酵乳杆菌
- 向日葵苗期耐盐碱性鉴定及相关性状全基因组关联分析
- 我国北方土壤盐渍化严重,这些地区由于常年受到盐碱胁迫,造成农作物产质量下降。向日葵作为治理盐碱地的主要作物对盐碱有较强抗耐性,但是不同品种间对盐碱耐性存在显著差异,而鉴定和挖掘耐盐碱向日葵新种质和重要候选基因对培育耐盐碱...
- 王艳霞
- 关键词：向日葵苗期耐盐碱全基因组关联分析候选基因
- 几种食用乳酸菌内源性质粒DNA的普查、消除及其稳定性试验被引量：2
- 2008年
- 以内蒙古和青海等地区牛乳中分离的11种野生乳酸菌为材料,分别应用核酸电泳技术、药物敏感试验和SDS-变温质粒DNA消除等方法,进行了内源性质粒DNA的普查、消除及其稳定性试验。结果表明:11种野生乳酸菌均被检测出不同大小的质粒DNA的可疑条带,可分为大于23 kb和小于23 kb两个型;经SDS-变温方法消除质粒DNA后,除3种乳酸菌不宜生长而被淘汰以外,在剩余8种乳酸菌中,小于23 kb型的条带全部被消除,个别大于23 kb型的可疑条带也能被消除,与药物敏感补充试验所得到的结果基本相符;已被消除质粒DNA的8种乳酸菌经过转接培养20代,显示出良好的遗传稳定性。本研究为筛选和建立新型基因工程受体菌奠定了基础。
- 格日勒图张延超王艳霞张和平
- 关键词：乳酸菌稳定性
- 微小隐孢子虫P23抗原在重组干酪乳杆菌中的分泌表达及其免疫原性被引量：1
- 2012年
- 本实验以微小隐孢子虫 Cryptosporidium parvum 子孢子抗原P23基因和信号肽基因Usp45为材料,构建干酪乳杆菌 Lactobacillus casei 中分泌表达P23蛋白的重组载体pMG-Usp45-P23.在培养物上清和细菌裂解组分中,分别以SDS-PAGE、Western blotting、IFAT和ELISA等不同方法检测P23蛋白的分泌和表达情况,并用已获得的P23蛋白分泌产物体外刺激Wistar大鼠淋巴细胞,评价其淋巴细胞转化活性.结果表明,分别在细菌培养物上清和破碎菌体组分中检测到大小约为20 kDa（不含信号肽）和23 kDa （含信号肽）的P23蛋白分泌和表达产物.并且该P23蛋白分泌产物与ConA相当,具有显著的淋巴细胞转化活性.本实验为进一步研制动物微小隐孢子虫 C.parvum 活菌疫苗载体的构建奠定了基础.
- 石泉玉斯日古楞兰丽王艳霞贾洪林玄学南张和平格日勒图
- 关键词：干酪乳杆菌微小隐孢子虫分泌表达
- 应用表达微小隐孢子虫P23的重组干酪乳杆菌建立微小隐孢子虫IFAT诊断方法
- 2010年
- 本试验旨在建立IFAT和间接ELISA方法作为微小隐孢子虫病诊断方法。应用DNA重组技术,构建原核表达载体pGEX-P23,经IPTG诱导表达出GST-P23融合蛋白,并进行纯化,将该重组融合蛋白作为包被抗原,建立ELISA诊断方法;同样构建重组载体pMG-P23,用电转化方法将其转入干酪乳杆菌中,称为重组活干酪乳杆菌(含pMG-P23),以此为已知抗原,建立IFAT诊断方法。应用ELISA和IFAT方法检测来自内蒙古地区的508份牛血清、187份绵羊血清和197份山羊血清:其中ELISA方法在各种动物血清中阳性率依次分别为0.59%、5.88%和4.57%,而IFAT方法则为0.19%、5.88%和4.57%。2种检测方法阳性符合率在牛血清样品中为33.33%,在绵羊和山羊中则均为100%。试验结果表明,重组抗原P23具有良好的反应原性,2种诊断方法的结果基本吻合,显示出良好的一致性和敏感性,可在微小隐孢子虫病的诊断实践中推广应用。
- 格日勒图石泉王艳霞兰丽满达张和平
- 关键词：微小隐孢子虫ELISAIFAT
- 一种盆栽水分监测装置
- 本实用新型涉及盆栽水分监测技术领域，尤其涉及一种盆栽水分监测装置，其技术方案包括：育苗箱，所述育苗箱正面设有控制面板，所述控制面板后端设有监测探头，所述育苗箱内壁后端固定安装有放置架，所述放置架内活动放置有育苗杯，所述监...
- 石慧敏侯建华邬阳李丹丹伊六喜王艳霞周佳岭
- 三种提取乳酸菌中内源性质粒DNA方法的比较被引量：2
- 2008年
- 采用3种不同抽提质粒DNA的方法普查了6株不同乳酸菌的内源性质粒DNA,并对3种不同方法进行比较。在相同条件下,琼脂糖凝胶电泳检测的结果显示:效果最佳者为改进的Anderson-Mckay方法,其次为液氮反复冻融方法,最差者为改进的碱裂解方法。为抽提革兰阳性细菌乳酸菌类的内源性质粒DNA提供了行之有效的方法。
- 王艳霞石泉包秋华张和平格日勒图
- 关键词：乳酸菌抽提方法
- 短小乳杆菌内蒙古分离株S-层蛋白的普查、鉴定和基因分析
- 2012年
- S-层蛋白(S-layers protein)是位于某些细菌表面的高度有序的具有超微结构的一种外膜蛋白。本试验以蒙古族传统乳制品中分离的短小乳杆菌(Lactobacillus brevis)为材料,应用SDS-PAGE技术对若干乳杆菌进行S-层蛋白的普查,并应用PCR方法克隆出L.brevis的slp基因,对该slp基因进行测序及序列分析。试验结果表明,SDS-PAGE电泳结果显示L.brevis样品在44～55 ku之间出现目的条带,与文献报道的S-层蛋白大小范围一致;PCR方法正确扩增出大小约为1300 bp的slp基因,经DNAStar软件遗传分析发现该基因与鸡乳酸杆菌株(GenBank登录号:AY597266.1)的亲缘关系和遗传距离最近,与其他种类乳酸菌遗传距离也非常相近;经Genetyx生物软件推导出的S-层蛋白大小理论值约为47 ku,具有显著的外膜蛋白的特性。本试验为后续遗传改造等研究工作奠定基础。
- 兰丽魏建民王艳霞王敏满达格日勒图
- 关键词：S-层蛋白克隆与序列分析
