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膀胱癌肿瘤干细胞DNA损伤修复介导的化疗药耐受机制研究: 临床研究显示肿瘤干细胞的耐药性是导致治疗失败的主要原因。尽管大多数肿瘤化疗药物的药理机制在于造成DNA损伤,但肿瘤干细胞中DNA损伤修复能力在耐药中的作用尚不清楚。近年来的研究显示DNA损伤修复与所在的染色质环境有密切的...; 石家仲张艺张岳陈志文杨劲; 关键词：肿瘤干细胞 DNA损伤修复染色质 NANOG; 文献传递

衰老可导致间充质干细胞氧化损伤修复能力降低被引量：2: 2013年; 背景:DNA损伤及损伤后的应答异常会导致基因组不稳定,基因组不稳定是肿瘤形成的重要因素之一。在细胞衰老过程中,衰老细胞基因组稳定性下降,对于端粒、端粒酶的研究以及对于原癌基因和抑癌基因的研究,表明细胞衰老和肿瘤有密切的联系。目的:以氧化损伤为模型,探索DNA损伤应答异常是衰老细胞基因组不稳定性的直接原因。方法:培养骨髓间充质干细胞,流式细胞术进行检测鉴定。衰老相关β-半乳糖苷酶检测细胞衰老情况,BrdU掺入实验检测细胞增殖情况。建立体外培养人间充质干细胞衰老模型,通过CCK-8法检测细胞存活情况,DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧,单细胞凝胶电泳观察细胞DNA损伤情况。结果与结论:人间充质干细胞经长期培养发生衰老,培养40代以后,衰老相关β-半乳糖苷酶染色阳性细胞明显增多,BrdU掺入能力显著下降,提示间充质干细胞长期培养后发生衰老。生存曲线结果显示H2O2作用下,年轻间充质干细胞存活率明显高于衰老间充质干细胞;活性氧及单细胞凝胶电泳结果显示,H2O2处理后衰老间充质干细胞DNA损伤更严重,修复时间更长,说明衰老间充质干细胞比年轻间充质干细胞对H2O2损伤更为敏感。; 张岳余瑾张艺石家仲黄亚琴杨劲; 关键词：干细胞间充质干细胞衰老 DNA损伤修复单细胞凝胶电泳国家自然科学基金

干性基因Nanog在膀胱癌组织中的表达及其对膀胱癌细胞增殖与耐药的作用被引量：2: 2014年; 目的探讨胚胎干细胞关键转录因子Nanog在膀胱癌组织中的表达及在膀胱癌5637细胞中的作用。方法采用免疫组化方法检测Nanog蛋白在46例膀胱癌组织中的表达。应用慢病毒载体上调5637细胞中Nanog的表达,通过克隆形成实验检测细胞增殖,通过MTT法检测细胞对化疗药物顺铂的敏感性。结果膀胱癌组织中Nanog的阳性率为50%,且其表达与组织的病理分级呈正相关,相关系数为0.989(P<0.05);Real-time PCR和Western blot结果表明感染慢病毒LV-Nanog的5637细胞株中Nanog mRNA和蛋白的表达明显高于感染慢病毒LV-Con的对照组细胞株。5637-C和5637-Nanog的克隆形成率分别为(4.6±0.9)%和(9.0±1.0)%,显示过表达Nanog的5637细胞克隆形成率上升(P<0.01)。以5、10、20、40μmol/L顺铂处理细胞72 h,对照组5637-C的存活率分别为(64.5±4.9)%、(53.1±4.6)%、(43.4±3.9)%和(21.0±2.7)%,5637-Nanog的存活率分别为(80.9±5.6)%、(68.5±4.2)%、(47.9±5.1)%和(25.2±4.2)%,在浓度为5μmol/L和10μmol/L时5637-Nanog对顺铂的敏感性降低。结论 Nanog的表达增高与膀胱癌病理分级相关,Nanog基因的表达升高能增强膀胱癌细胞的增殖能力,降低对顺铂化疗药物的敏感性。; 王志张艺黄亚琴余瑾石家仲陈志文杨劲; 关键词：NANOG 膀胱癌增殖顺铂

XPC蛋白促进膀胱癌细胞DNA损伤修复的作用被引量：4: 2014年; 目的探讨着色性干皮病基因C(xeroderma pigmentosum group C,XPC)对膀胱癌T24细胞紫外线(ultraviolet ray,UV)介导的DNA损伤修复的作用及机制。方法利用shRNA策略,Western blot鉴定XPC沉默效果,建立稳定抑制XPC的膀胱肿瘤T24细胞模型;CCK-8法检测UV对细胞增殖的影响;宿主反应实验检测细胞DNA损伤修复能力的差异;免疫荧光检测UV损伤处理、XPC干扰前后p-ATM蛋白分子向细胞核DNA损伤部位募集情况。结果成功建立稳定抑制XPC的膀胱肿瘤T24细胞模型,干扰XPC后,细胞对UV损伤敏感性出现显著差异(P<0.01),干扰组DNA损伤修复能力较对照组降低(P<0.01),p-ATM向损伤区域的募集作用降低(P<0.01)。结论 UV损伤条件下,膀胱癌T24细胞通过XPC介导p-ATM向损伤区域的募集,以降低细胞UV损伤修复能力。; 王欢欢黄亚琴余瑾石家仲陈志文杨劲; 关键词：膀胱癌 DNA损伤紫外线

干性基因Oct4在膀胱癌发生发展中作用的研究: 膀胱癌是我国男性泌尿生殖系统发病率最高的恶性肿瘤,并呈逐年上升趋势,严重影响人们健康.近年来提出的肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)学说,认为在肿瘤组织中存在少数具有干细胞性质的细胞亚群,这些细胞...; 王志张艺石家仲陈志文杨劲; 关键词：膀胱癌肿瘤干细胞 OCT4

c-Myc在小鼠毛囊形成和毛发生长过程中的作用研究: 目的 c-Myc是体内重要的转录因子,也是Wnt,TGF-beta,EGF等多条具有重要信号通路的下游效应分子.毛囊是皮肤重要的附属器之一,集聚于毛囊峡部的表皮干细胞可以在生理状态下和创伤修复时为皮肤表皮组分提供细胞来源...; 王宁李进雷明星石家仲邱伟明杨恬连小华; 关键词：C-MYC 毛发周期

膀胱癌肿瘤干细胞DNA损伤修复介导的化疗药耐受机制研究: 临床研究显示肿瘤干细胞的耐药性是导致治疗失败的主要原因.尽管大多数肿瘤化疗药物的药理机制在于造成DNA损伤,但肿瘤干细胞中DNA损伤修复能力在耐药中的作用尚不清楚.近年来的研究显示DNA损伤修复与所在的染色质环境有密切的...; 石家仲张艺张岳陈志文杨劲; 关键词：肿瘤干细胞 DNA损伤修复染色质 NANOG

肿瘤细胞XPF表达量与顺铂耐药的相关性研究: 目前,顺铂广泛应用于临床抗肿瘤治疗中,但肿瘤耐药的出现严重制约其抗肿瘤效果.因而,寻找克服顺铂耐药的有效方法成为当前抗肿瘤研究的一个新方向.DNA损伤修复能力的增强是肿瘤耐药的重要机制之一.; 张乔袁方余瑾黄亚琴石家仲王志王欢欢杨劲; 关键词：XPF 肿瘤顺铂耐药

肿瘤细胞XPF表达量与顺铂耐药的相关性研究: 目前,顺铂广泛应用于临床抗肿瘤治疗中,但肿瘤耐药的出现严重制约其抗肿瘤效果。因而,寻找克服顺铂耐药的有效方法成为当前抗肿瘤研究的一个新方向。DNA损伤修复能力的增强是肿瘤耐药的重要机制之一。通过研究DNA损伤修复系统中的...; 张乔袁方余瑾黄亚琴石家仲王志王欢欢杨劲; 关键词：XPF 肿瘤顺铂耐药; 文献传递

着色性干皮病C组基因蛋白缺失对膀胱癌细胞自噬的影响被引量：1: 2016年; 目的探讨膀胱癌细胞中着色性干皮病C组基因(xeroderma pigmentosum group C,XPC)蛋白缺失对自噬的影响。方法利用shRNA策略,建立稳定干扰XPC的膀胱癌T24细胞模型,蛋白印迹技术检测干扰XPC后自噬表征蛋白LC3Ⅱ的表达,瞬时转染GFP-LC3,荧光显微镜观察细胞荧光聚集情况,CCK-8法检测细胞的增殖状况,免疫印迹技术检测自噬及凋亡相关蛋白的表达。结果成功建立干扰XPC的膀胱癌T24细胞模型;干扰XPC后,膀胱癌T24细胞自噬小体的形成[(1.53±0.81)%vs(3.30±0.70)%,P<0.05]明显减少,顺铂作用下膀胱癌T24细胞自噬小体的形成[(2.19±0.37)%vs(3.20±0.29)%,P<0.05]明显减少;顺铂促进XPC缺失后的膀胱癌T24细胞自噬;XPC缺失后的自噬为非保护性自噬。结论 XPC蛋白参与调控膀胱癌T24细胞的自噬。; 刘宇王欢欢石家仲黄亚琴余瑾杨劲陈志文; 关键词：膀胱癌自噬 DNA损伤

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石家仲

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