程林峰
- 作品数：21 被引量：14H指数：2
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划陕西省科技统筹创新工程计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 汉坦病毒感染C57BL/6小鼠组织中特异性抗原的检测被引量：3
- 2011年
- 目的通过检测汉坦病毒感染C57BL/6小鼠组织中特异性病毒抗原,以建立汉坦病毒感染动物的评价体系。方法将汉坦病毒陈株按照原病毒液、10-1、10-2三个滴度经肌肉注射感染C57BL/6小鼠,在感染后的第3、6、9、12、15天,分别取小鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑等组织研磨后制成病毒悬液,以ELISA法检测各组织中的病毒特异性抗原。结果 C57BL/6小鼠感染汉坦病毒后短期内在其肝脏和脾脏可以检测到特异性抗原,随着时间的延长,这些抗原逐步消失。结论上述结果为建立汉坦病毒感染动物的评价体系提供了一种参考。
- 程林峰白露李凯李璞媛胡刚于澜吴兴安徐志凯张芳琳
- 关键词：汉坦病毒C57BL/6小鼠抗原
- 基孔肯雅病毒病毒样颗粒的制备及初步鉴定被引量：1
- 2017年
- 目的通过杆状病毒表达系统表达制备基孔肯雅病毒(CHIKV)病毒样颗粒并进行初步鉴定。方法首先将基孔肯雅病毒的结构蛋白基因C-E3-E2-6K-E1克隆入p Fast-Bac^(TM) Dual转移载体中并鉴定;然后将构建正确的重组转移载体转化DH10Bac感受态细胞后提取重组杆粒并鉴定;再将重组杆粒转染Sf9昆虫细胞后获得重组杆状病毒,并利用免疫荧光法(IFA)鉴定其感染Sf9细胞后E2蛋白的表达;最后通过透射电镜(TEM)和Western-Blot鉴定CHIKV病毒样颗粒。结果成功获得了含有CHIKV结构蛋白基因的重组杆状病毒,该重组病毒经过IFA及WB验证在昆虫细胞中能够表达CHIKV的E蛋白,并在电镜下观察到了直径约60~80 nm的CHIKV病毒样颗粒。结论通过杆状病毒表达系统成功表达并获得CHIKV的病毒样颗粒,为CHIKV早期快速检测法的建立奠定基础。
- 陈何嵩程林峰马宏炜叶伟韩佩君张亮雷迎峰张芳琳
- 关键词：基孔肯雅病毒杆状病毒表达系统病毒样颗粒
- 联合应用抗原递呈分子HSP70C基因的汉滩病毒嵌合基因GnS0.7、GcS0.7重组腺病毒的构建及鉴定
- 2014年
- 目的构建含有抗原加工递呈分子基因HSP70C的HTNV嵌合基因GnS0.7、GcS0.7重组腺病毒。方法通过PCR扩增获得HSP70C基因,分别克隆入本室已构建的重组腺病毒转移载体pShuttle-pCAG-GnS0.7及pShuttle-pCAGGcS0.7中,进而构建新的重组腺病毒转移载体pShuttle-pCAG-GnS0.7-HSP70C及pShuttle-pCAG-GcS0.7-HSP70C。进一步通过双酶切将转移载体中的目的嵌合基因再分别克隆入腺病毒载体,得到重组腺病毒载体rAd-pCAG-GnS0.7-HSP70C、rAd-pCAG-GcS0.7-HSP70C,使用Pac I线性化后转染HEK293细胞,包装后获得重组腺病毒,感染HEK293细胞后用免疫荧光法检测表达产物。结果经过酶切、PCR扩增和测序结果显示,各重组腺病毒转移载体及重组腺病毒载体构建正确。免疫荧光实验检测到各重组腺病毒中目的蛋白的表达。结论成功制备了含抗原递呈分子HSP70C基因的汉滩病毒嵌合基因GnS0.7、GcS0.7重组腺病毒,为进一步研究构建的汉滩病毒重组腺病毒的免疫学特性奠定了实验基础。
- 张亮程林峰于澜刘梓谕李璞媛徐志凯张芳琳
- 关键词：汉滩病毒腺病毒热休克蛋白70
- 肾综合征出血热新型疫苗研究进展被引量：5
- 2011年
- 肾综合征出血热（hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS）是由汉坦病毒（hantavirus）引起,由鼠类传播的一种急性病毒性传染病,临床上以发热、出血、急性肾功能损害和免疫功能紊乱为主要特征。HFRS流行于世界上近40个国家和地区,
- 程林峰张芳琳徐志凯
- 关键词：汉坦病毒肾综合征出血热疫苗
- 抗汉滩病毒鼠/人嵌合抗体工程细胞的驯化、抗体表达及鉴定
- 2016年
- 目的:通过对稳定表达抗汉滩病毒鼠/人嵌合抗体的CHO细胞进行驯化,检测其抗体的表达情况,并对所表达抗体的生物学活性进行初步鉴定。方法:将本课题组前期筛选得到的稳定高表达细胞株1-D9进行无血清驯化,使其适合悬浮培养后接种到摇瓶,通过调整不同的培养条件,每天检测细胞的活率和抗体表达量,并对表达的抗体进行生物学活性鉴定。结果:通过驯化得到了适合悬浮培养的CHO细胞株,其抗体表达量高,生产周期短;并优化了其悬浮培养条件,表达的抗体经鉴定其生物学活性稳定。结论:优化了抗汉滩病毒鼠/人嵌合抗体表达条件,为下一步工业化生产提供了实验依据。
- 张晓晓冯伟张尧程林峰应旗康马瑞雪马铁军刘梓谕刘蓉蓉王芳张亮叶伟张芳琳徐志凯吴兴安
- 关键词：汉滩病毒CHO细胞嵌合抗体
- 汉滩病毒核蛋白CTL表位肽联合不同免疫佐剂的免疫学特性研究
- 2016年
- 目的:研究汉滩病毒(HTNV)核蛋白细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位肽联合不同免疫佐剂免疫C57BL/6小鼠后的免疫学特性,确立一种免疫效果良好的多肽免疫C57BL/6小鼠方案。方法:分别用氢氧化铝、弗氏佐剂和脂质体作为免疫佐剂与汉滩病毒核衣壳蛋白上的CTL表位肽段混合,经皮下注射免疫C57BL/6小鼠,共免疫3次,每次间隔2周;免疫结束后分离小鼠脾细胞,并分别采用ELISPOT和CTL杀伤试验进行检测。结果:HTNV核蛋白CTL表位肽联合弗氏佐剂加脂质体组小鼠脾细胞分泌IFN-γ能力和CTL杀伤能力优于其他各实验组(P<0.01)。结论:HTNVCTL表位肽联合弗氏佐剂加脂质体免疫C57BL/6小鼠效果最佳,可为HTNV多肽疫苗的免疫策略提供参考。
- 马瑞雪程林峰马铁军王敬增应旗康张晓晓刘蓉蓉王芳刘梓谕张亮叶伟张芳琳徐志凯吴兴安
- 关键词：免疫佐剂汉滩病毒表位肽C57BL/6小鼠
- 汉滩病毒糖蛋白HLA-A*02限制性CTL表位的鉴定及其在HLA-A2.1/Kb转基因小鼠体内的免疫保护作用研究
- <正>目的 :汉滩病毒(Hantaan virus,HTNV)感染在人类可引起严重的肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)疾病。已知病毒特异性T细胞应答在抗...
- 唐康程林峰张春梅张宇丝张赟庄然张芳琳马樱金伯泉
- 关键词：汉滩病毒表位
- 文献传递
- 含汉滩病毒包膜糖蛋白重组假病毒的构建及其免疫学活性检测
- 目的:构建含汉滩病毒(HTNV)包膜糖蛋白(GP)的重组假病毒,并对其免疫学活性进行检测,为进一步研制新型的肾综合征出血热(hemorrhagic feverwithrenal syndrome,HFRS)疫苗打下一定的...
- 于澜张亮程林峰王芳张晓晓刘梓谕吴兴安张芳琳徐志凯
- 关键词：汉滩病毒包膜糖蛋白
- 文献传递
- 含汉滩病毒包膜糖蛋白重组假病毒的构建及其免疫学活性检测
- 目的:构建含汉滩病毒(HTNV)包膜糖蛋白(GP)的重组假病毒,并对其免疫学活性进行检测,为进一步研制新型的肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)疫苗打下一...
- 于澜张亮程林峰王芳张晓晓刘梓谕吴兴安张芳琳徐志凯
- 关键词：汉滩病毒包膜糖蛋白
- 汉滩病毒糖蛋白HLA-A*02限制性CTL表位的鉴定及其在HLA-A2.1/Kb转基因小鼠体内的免疫保护作用研究
- 目的：汉滩病毒(Hantaan virus,HTNV)感染在人类可引起严重的肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)疾病.已知病毒特异性T细胞应答在抗病毒免疫...
- 唐康程林峰张春梅张宇丝张赟庄然张芳琳马樱金伯泉
- 关键词：汉滩病毒表位
