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薛美: 作品数：20 被引量：43H指数：4; 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>; 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家自然科学基金黑龙江省留学归国人员基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

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利用杆状病毒表达系统表达猪IFN-L3及其抗PEDV活性的研究被引量：4: 2019年; 利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在昆虫细胞上表达重组猪干扰素L3(rPoIFN-L3)进行抗猪流行性腹泻病毒(PEDV)的研究。首先通过间接免疫荧光和Western-blot验证rPoIFN-L3表达,并用Protein A亲和层析柱进行蛋白纯化;采用表达绿色荧光蛋白的水疱性口炎病毒(VSV*GFP)检测rPoIFN-L3的抗病毒活性,含rPoIFN-L3的细胞上清的抗病毒活性为1×10^3AU/mL,纯化的rPoIFN-L3抗病毒活性为5×10^5AU/mg。进一步对纯化的rPoIFN-L3蛋白在IPEC-J2细胞上进行抗PEDV活性探究,结果显示,rPoIFN-L3可呈剂量依赖性抑制PEDV复制,并且上调相关干扰素-刺激基因(ISGs)的表达。由此证明,本研究表达的rPoIFN-L3具有抗病毒活性,并可有效抑制PEDV在IPEC-J2上的复制,对预防和治疗PEDV感染有重要意义。; 郭珊珊陈伟业薛美尹灵丹罗毅冯力刘平黄; 关键词：昆虫细胞猪流行性腹泻病毒

猪NLRC5基因启动子克隆及生物信息学分析: 2021年; 为了构建猪NLR家族含CARD结构域5(NOD-like receptor family caspase recruitment domain family domain-containing 5,NLRC5)基因启动子双荧光素酶报告质粒,确认其活性,进而探索其转录调控机制,试验采用PCR方法从猪睾丸细胞(swine testicular cell,ST细胞)中扩增出猪NLRC5基因启动子,将其与pGL3-Basic载体连接,测序正确后将猪NLRC5基因启动子双荧光素酶报告质粒转染至ST细胞中,通过双荧光素酶报告检测试剂盒检测荧光素酶的表达活性,并使用生物信息学软件预测该基因启动子区域的CpG岛、调控元件及转录因子结合位点。结果表明:试验成功构建猪NLRC5基因启动子双荧光素酶报告质粒,该质粒的相对荧光素酶活性极显著高于pGL3-Basic载体(P<0.01)。NLRC5基因启动子区域中存在2个CpG岛,TATA box、CCAAT box和GC box等多种调控元件,以及IRF1、IRF3、STAT1、STAT3、STAT4和NF-κB转录因子结合位点。说明猪NLRC5基因的表达可能受甲基化的影响,同时也可能受顺式作用元件以及干扰素和NF-κB相关转录因子的调控。; 刘翔尹灵丹薛美李亮赵立媛蒋成凡王文哲冯力刘平黄; 关键词：转录因子结合位点生物信息学

猪IL-22的原核表达及其活性研究被引量：2: 2016年; 为表达猪白细胞介素22(PoIL-22)并研究其活性,本研究从猪小肠上皮细胞IPEC-J2中扩增出568 bp的PoIL-22编码序列,并以其为模板进一步扩增去除信号肽的PoIL-22 471 bp序列。将该去信号肽基因克隆到原核表达载体pET-30a(+)中,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达了重组蛋白PoIL-22(rPoIL-22),经过Ni-NTA亲和层析纯化。此外,以纯化的rPoIL-22刺激IPEC-J2后,能够上调IPEC-J2表达猪beta防御素2,并表现剂量依赖效应。由此证明本实验中表达的rPoIL-22具有生物学活性。rPoIL-22的制备为进一步研究其在猪粘膜免疫中的作用奠定了基础。; 应兰薛美李麟符芳冯力赵静刘平黄; 关键词：蛋白表达黏膜免疫

禽网状内皮组织增殖病病毒SYBR GreenⅠ实时荧光PCR检测方法的建立被引量：1: 2015年; 为了探究禽网状内皮组织增殖病的快速检测方法,根据禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)LTR和gag基因的保守区域各设计并合成一对引物,建立检测插入感染与全病毒感染的SYBR Green I模式的实时荧光PCR方法(Real-time PCR)。以pMD-LTR,pMD-gag重组质粒为标准品建立标准曲线,并对该方法的特异性、敏感性、重复性进行评价。结果表明:该方法线性关系良好;敏感性能检测到10拷贝标准品;能特异性检测REV样品,不与其它禽相关病原发生交叉反应;板内、板间重复试验的变异系数均低于3%。应用该方法对人工感染REV的鸡的心、肝、脾、肺、肾、盲肠扁桃体、腺胃和法氏囊进行初步检测,结果显示法式囊中的含量最高。; 牛秀杰赵妍薛美王云峰; 关键词：SYBR 实时荧光PCR GAG基因

一种利用单个B细胞PCR技术生产全猪源单克隆抗体的方法: 本发明公开了一种利用单个B细胞PCR技术生产全猪源单克隆抗体的方法，属于生物技术领域。本发明利用已有的猪抗体基因文库，设计了多套引物，利用套式PCR，从单个B淋巴细胞扩增出抗体可变区基因，进而筛选出具有中和抗体活性的全猪...; 刘平黄符芳薛美冯力; 文献传递

内质网应激抑制冠状病毒TGEV复制的分子机制研究: 传染性胃肠炎病毒（Transmissible Gastroenteritis Virus,TGEV）属于alpha冠状病毒家族成员,其感染导致新生仔猪的水泻和脱水,是引起规模化养猪场新生仔猪腹泻性死亡的重要原因,给我国养...; 薛美符芳马艳龙张鑫李亮冯力刘平黄; 关键词：未折叠蛋白反应传染性胃肠炎病毒; 文献传递

NLRP1炎性小体的激活机制被引量：2: 2023年; 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白1(NLRP1)是NOD样受体(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptors,NLRs)家族的成员,是人们发现的第一个能形成炎性小体的蛋白。NLRP1的激活可引起半胱氨酸蛋白酶-1前体(pro-caspase-1)的活化并进一步促进炎性因子的成熟和释放,在天然免疫中发挥着重要作用。NLRP1的结构在不同种属间存在差异,目前能引起NLRP1激活的机制,主要包括通过蛋白酶体途径降解并激活NLRP1、通过抑制DPP9激活NLRP1以及弓形虫和部分代谢抑制剂激活NLRP1等。某些病毒蛋白或RNA也能够激活NLRP1,其具体激活机制以及NLRP1在抗病毒感染中发挥的作用尚未明确,还有待于进一步研究。; 何豪杰薛美冯力; 关键词：病毒

口蹄疫病毒一个构象型中和表位的鉴定及相关研究: @@口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的侵害偶蹄动物的最重要的传染病。为研究亚洲1型口蹄疫病毒江苏谱系Asia1/YS/CHA/05株抗原表位的性质，利用纯化的全病毒免疫BALB/c鼠制备了一株具有高度中和活...; 王海伟杨德成薛美于永忠赵磊李万于力; 关键词：口蹄疫病毒中和表位病毒鉴定单克隆抗体; 文献传递

猪IL-21的真核表达及其与CD40L共刺激抗体分泌的活性研究: 2019年; 为研究猪白介素21(IL-21)的生物学功能,本研究在猪IL-21基因(456 bp)的3’端加上猪Ig G Fc标签序列后,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-)中,构建重组质粒pcDNA-IL-21-Fc。将该重组质粒转染293T细胞瞬时表达后,利用protein A亲和纯化介质纯化转染上清中的目的蛋白,并检测其纯度与生物学活性。结果显示,构建的重组质粒pcDNA-IL-21-Fc能够在293T细胞中表达相对分子量约为44 ku的猪IL-21融合蛋白;亲和纯化后的猪IL-21融合蛋白能够与CD40L协同呈剂量依懒性地刺激猪外周血淋巴细胞(PBMCs)分泌Ig G。本研究为进一步探究猪IL-21在适应性免疫应答中的作用提供依据。; 杨贝贝符芳薛美冯力刘平黄; 关键词：真核表达蛋白纯化抗体分泌

鸡传染性喉气管炎病毒TaqMan real-time PCR检测方法的建立被引量：4: 2012年; 为建立鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)TaqMan Real-time PCR检测方法,本研究根据GenBank中登录的ILTV gB基因序列设计了2对引物与一条特异性TaqMan探针,通过对反应体系和反应条件的优化,特异性、敏感性以及重复性试验,证明该方法在核酸含量108拷贝/μL～101拷贝/μL范围内具有良好的线性关系;能够检测初始模板中10-3EID50的病毒核酸及16拷贝的标准品;与其它相关的鸡源病毒均无交叉反应,并且批内、批间变异系数均小于2%,具有良好的重复性。该检测方法的建立为ILTV的临床检测和定量分析提供了一种快速、准确的技术手段。; 赵妍孔聪聪张晓敏崔红玉石星明赵晓岩薛美胡顺磊闫帅牛秀杰李巧玲王玫王云峰; 关键词：鸡传染性喉气管炎病毒 GB基因 TAQMAN REAL-TIME PCR

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