裴光前
- 作品数：12 被引量：48H指数：5
- 供职机构：中国农业科学院果树研究所更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 我国葡萄主栽区卷叶病相关病毒种类的检测分析被引量：11
- 2011年
- 田间调查200个葡萄品种,结果82个品种表现葡萄卷叶病症状,其中欧亚种群表现葡萄卷叶病症状的品种最多,发病率最高,发病症状最重;欧美杂种发病率和严重度均比欧亚种群低;未发现美洲种群的品种表现葡萄卷叶病症状。从58株表现卷叶病的葡萄上采集休眠枝条进行卷叶病毒ELISA和RT-PCR检测,葡萄卷叶病毒-1,2,3,4,5和7(GLRaV-1,2,3,4,5和7)等6种葡萄卷叶病毒的检出率分别为20.7%,17.2%,62.1%,3.4%,5.2%和15.5%。回收PCR产物进行克隆和序列分析,并将测序结果提交至GeneBank。以葡萄卷叶病毒HSP70基因序列构建系统进化树分析其进化关系,GLRaV-1、3和7,GLRaV-2、4和5分别聚为2大类,其中GLRaV-1和3,GLRaV-4和5在各自的聚类中关系更近。
- 裴光前董雅凤张尊平范旭东任芳
- 关键词：葡萄卷叶病毒田间调查RT-PCR进化树
- 葡萄卷叶伴随病毒4和5简并引物和多重PCR检测被引量：1
- 2012年
- 研究建立了葡萄卷叶伴随病毒4和5(Grapevine leafroll associated virus 4and 5,GLRaV-4and 5)的简并引物及多重PCR检测方法。比较了单一PCR、多重PCR和简并引物检测方法的灵敏度,并对简并引物的特异性进行了分析。结果表明,采用简并引物和多重PCR对这两种病毒进行检测,其灵敏度与单一PCR相同,且简并引物仅对葡萄卷叶伴随病毒4和5具有特异性。本研究建立的方法能够同时、快速、灵敏地检测上述2种葡萄卷叶病毒,提高了检测效率,降低了检测费用。
- 范旭东董雅凤张尊平任芳裴光前
- 关键词：多重RT-PCR
- 苹果茎痘病毒RT-PCR检测及分子变异分析被引量：7
- 2010年
- 利用RT-PCR技术对采自6个苹果品种和7个梨品种的33个样本中的苹果茎痘病毒（Applestem pitting virus,ASPV）进行了检测,ASPV感染率为63%（19/33）。对6个ASPV中国分离物外壳蛋白（Coat protein,CP）基因进行了扩增、克隆和测序,测序结果显示CP基因全长为1191nt,编码397个氨基酸。中国分离物与GenBank中其他分离物核苷酸序列同源性为70.2%~91.7%。系统进化分析显示不同ASPV分离物分为3个大的类群,呈现一定的寄主相关性,并未呈现明显的地理相关性。第一和第三大类群的寄主皆为苹果,第二大类群包含6个梨分离物和2个苹果分离物。不同ASPV分离物的抗原指数差异较大,推断可能由于序列变异引起抗原表位变异,从而引起血清型差异。
- 李丽丽董雅凤张尊平张志宏范旭东裴光前
- 关键词：苹果苹果茎痘病毒RT-PCR检测
- 葡萄病毒及类似病害指示植物鉴定初报被引量：4
- 2010年
- 葡萄指示植物可以鉴定多种葡萄病毒及类似病害。采用绿枝嫁接技术分别在指示植物110R、Kober5BB、河岸葡萄、沙地葡萄圣乔治和LN33上嫁接18个葡萄样品。结果表明,在河岸葡萄上观察到脉斑驳病典型症状,在110R上观察到脉坏死病典型症状,在沙地葡萄圣乔治上观察到斑点病和扇叶病典型症状,在Kober5BB上观察到叶片黄斑和皱缩症状,在LN33上观察到卷叶病症状。其中河岸葡萄显症最早,嫁接后3个月即表现症状,其余则在第2年春季开始表现症状。
- 张尊平董雅凤范旭东裴光前
- 关键词：葡萄病毒病指示植物
- 苹果茎痘病毒外壳蛋白的原核表达及抗血清制备被引量：5
- 2010年
- 利用基因重组技术将苹果茎痘病毒Applestempittingvirus(ASPV)完整cp基因在大肠杆菌中表达,以纯化蛋白为抗原免疫新西兰兔制备其抗血清,并采用ACP-ELISA法测定其效价和应用PAS-ELISA法对其抗血清的有效性进行初步鉴定。结果显示,cp基因获得了高效表达,表达产物与Anti-His抗体产生特异性免疫反应。制备的抗血清具有较强的特异性,效价为1:800。PAS-ELISA检测结果显示,9个苹果样品中有8个样品与RT-PCR检测结果一致,仅1个样品RT-PCR检测为阳性,而PAS-ELISA检测为阴性。表明所制备的抗血清具有一定的应用潜力。
- 李丽丽张志宏董雅凤张尊平范旭东裴光前
- 关键词：苹果茎痘病毒外壳蛋白抗血清
- 苹果优新品种无病毒母本树的培育
- 2009年
- 采用盆苗或试管苗热处理方法对昂林等16个苹果优新品种进行脱毒处理,采用木本指示植物2重芽接法和RT-PCR技术检测ASGV、ASPV和ACLSV 3种病毒,共获得11个苹果品种35株无病毒母本树,其中,盆苗热处理平均脱毒株率为46.1%,试管苗热处理平均脱毒株率为79.2%。
- 董雅凤张尊平范旭东李丽丽裴光前
- 关键词：脱毒
- 3种苹果潜隐病毒多重RT-PCR检测体系的建立被引量：12
- 2009年
- 研究建立了能同时检测苹果茎沟病毒(Applestem grooving virus,ASGV)、苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)和苹果茎痘病毒(Apple stem pitting virus,ASPV)的多重RT-PCR方法。以复合感染3种病毒的苹果‘望山红’组培苗为试材,对影响多重PCR的反应条件进行了一系列的调整和优化。多重RT-PCR体系灵敏性测验显示,最低能从RNA总量187.5ng的样品中检测3种病毒的存在。多重RT-PCR产物的序列与报道的病毒序列有较高的同源性,12个田间苹果样品的多重RT-PCR检测结果与单一PCR的结果一致,初步证明了多重RT-PCR检测的准确性。
- 范旭东董雅凤张尊平李丽丽裴光前
- 关键词：苹果多重RT-PCR苹果茎沟病毒苹果褪绿叶斑病毒苹果茎痘病毒
- 我国葡萄卷叶病病原分子检测技术研究
- 葡萄卷叶病（Grapevine leafroll disease, GLD）是分布最广泛,危害葡萄最为严重的病毒病之一。迄今为止,全世界已报道了11种血清学不相关的葡萄卷叶病毒（Grapevine leafroll-as...
- 裴光前
- 关键词：葡萄葡萄卷叶病毒RT-PCR基因克隆
- 文献传递
- 主要葡萄病毒RT-PCR检测技术研究
- 葡萄卷叶病、扇叶病、斑点病、皱木复合病等病毒病在我国各葡萄产区分布广泛,发生和危害严重。葡萄病毒病主要随砧木和接穗传播扩散,葡萄一旦被病毒侵染,即终生带毒,持久危害,无法采用化学药剂进行有效治疗。栽培无病毒苗木是目前防止...
- 董雅凤张尊平李丽丽裴光前
- 关键词：葡萄病毒病病毒检测RT-PCR检测技术
- 文献传递
- 4种葡萄卷叶伴随病毒多重RT-PCR检测被引量：20
- 2010年
- 葡萄受卷叶伴随病毒侵染后,树势减弱,抗逆性变差,果穗着色不良,成熟期推迟,含糖量降低。目前已报道11种葡萄卷叶伴随病毒(Grapevine leafroll-associated virus,GLRaV)。为提高检测效率,降低检测费用,本文在研究单个卷叶伴随病毒RT-PCR检测技术基础上,对4种葡萄卷叶伴随病毒的多重RT-PCR模板浓度、引物浓度和退火温度进行优化,建立了同时检测葡萄卷叶伴随病毒-1(GLRaV-1)、葡萄卷叶伴随病毒-3(GLRaV-3)、葡萄卷叶伴随病毒-4(GLRaV-4)和葡萄卷叶伴随病毒-5(GLRaV-5)的多重RT-PCR技术体系。模板浓度、引物浓度、TaqDNA聚合酶浓度、退火温度和循环次数对多重RT-PCR检测结果均有较大影响,而在一定范围内改变延伸时间和dNTP浓度对检测结果影响较小。对4种葡萄卷叶伴随病毒的PCR产物进行克隆和测序,扩增基因片段与GenBank中登录的基因序列同源性为95%～99%。所建立的多重RT-PCR技术检测田间样品效果良好。
- 裴光前董雅凤张尊平范旭东李丽丽
- 关键词：葡萄卷叶伴随病毒多重RT-PCR
