赵俸涌
- 作品数：41 被引量：30H指数：3
- 供职机构：上海市血液中心更多>>
- 发文基金：香港海洋公园保育基金国家自然科学基金卫生行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 应用流式细胞术对自身免疫性溶血性贫血患者自身抗体掩盖下血型同种抗体检测的研究被引量：4
- 2022年
- 目的在自身免疫性溶血性贫血(自免溶贫)患者血样的检测中,自身抗体往往易被同种抗体掩盖,本研究试图通过对流式细胞术与传统血清学方法的比较研究,分析两者对自身抗体中混合同种抗体的检测能力差异,为自免溶贫患者输血前检测提供更敏感可靠的方法。方法随机选择使用5例人源抗-D及4例抗-E分别与经验证不具血型特异性的自身抗体按比例梯度混合,配制模拟自免溶贫患者血浆,使用凝胶卡法与流式细胞术分别对上述模拟血浆进行检测。结果三个效价组中(16,32,64),流式方法可检测出效价为自身抗体1/8~1/16的同种抗体,灵敏度均明显强于凝胶卡方法,且检出下限为凝胶卡方法的4倍(P<0.05)。结论流式细胞术较传统血清学方法对自身抗体掩盖下同种抗体的检测具有更高的灵敏度,采用该方法用于自免溶贫患者输血前检查可降低已有同种抗体介导的输血免疫风险,提高此类患者输血安全。
- 赵俸涌张玉宇王中英徐婷李勤张嘉敏向东朱自严
- 关键词：自身抗体流式细胞术血清学方法
- 利用D--外周血B细胞构建单克隆抗-C杂交瘤细胞株被引量：1
- 2022年
- 目的以1例稀有的O型D--献血者外周血单个核细胞为实验对象,制备分泌Rh血型系统单克隆抗体的杂交瘤细胞株。方法无菌分离外周血白细胞,经淋巴细胞分离液分离得到单个核细胞(PBMCs),利用B95-8培养上清中的EB病毒(EBV),转化PBMCs中的B淋巴细胞使其母细胞化。血清学筛选分泌特异性抗体的单一B细胞克隆并扩大培养,与SHM-D33瘤细胞在电刺激下融合,经含有次黄嘌呤(Hypoxantine,H)、氨基蝶呤(Aminopterin,A)、胸腺嘧啶核苷(Thymidine,T)、脱氧胞嘧啶核苷(2-Deoxycytide,D)、毒毛旋花苷(Ouabain,O)的培养基,即HOTD(HATD+Ouabain)选择性培养、微量板抗体筛选以及有限稀释亚克隆,建立分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株,血清学和流式细胞试验鉴定抗体特异性。结果从D--外周血转化B淋巴细胞培养上清中,初筛得到与R;R;(DCe/DCe)O型红细胞凝集,与R;R;(DcE/DcE)O型红细胞不凝集的单个细胞克隆3A6-C6,初步鉴定抗体特异性为抗-C,与SHM-D33骨髓瘤细胞杂交后建立了持续稳定分泌IgM抗-C的杂交瘤细胞株。结论本研究从外周血B细胞开始构建单克隆杂交瘤细胞株,为Rh血型系统血清学单克隆试剂的研发和改造奠定了基础。
- 郭忠慧赵俸涌张德梅向东张嘉敏杨颖李勤杨启修王晨朱自严
- 关键词：人单克隆抗体抗-C杂交瘤技术
- 红细胞抗体介导的补体活化的定量检测被引量：1
- 2022年
- 目的本研究旨在构建红细胞抗体介导补体活化的体外模型,并建立基于流式细胞与分光光度的定量检测方法,以探究抗体滴度与补体活化速度的相关性,为研究抗体介导补体溶血的输血反应提供方法学依据。方法使用识别人C3b的鼠单抗和荧光二抗标记红细胞上的C3b片段,流式检测补体活化后C3b片段的沉积;使用分光光度法测定补体活化反应体系中上清液在540nm处的吸光度,血红蛋白的释放量与吸光度相关。结果按照3%红细胞悬液(6人份混合)1∶抗-Tj^(a)1∶补体2的比例构建了补体活化体系,采用不同的红细胞混合重复检测,重复性良好(P>0.05);32×、64×和128×稀释的抗-Tj^(a)介导补体活化,分别在30 s、1 min和2 min时,流式检测出C3b片段的沉积,且分别在5、10和30 min时,MFI达到峰值,但在1.5 h内皆无明显溶血。结论在抗-Tj^(a)介导补体活化的体外模型中,补体活化的速度与抗体的浓度相关。在一定的抗体浓度下,其介导补体活化的速度变慢,不发生明显溶血。
- 王中英李健赵俸涌钱呈睿沈伟范亮峰金沙郑皆炜张玉宇向东
- 关键词：补体活化红细胞抗体流式细胞术分光光度法
- 大熊猫与亚洲黑熊的红细胞膜蛋白质谱检测
- 2021年
- 熊科动物分布于我国的各个地区,不同的生存条件与生活习性导致其机体生理生化存在差异。红细胞作为气体运输的重要载体,对机体代谢及生命学过程有重要作用。本研究中,通过流式分选技术对大熊猫及亚洲黑熊红细胞进行纯化,并通过液相色谱偶联二级质谱的方法,对大熊猫及亚洲黑熊红细胞膜蛋白进行检测。通过检测,同检测到大熊猫红细胞膜蛋白388种,亚洲黑熊红细胞膜蛋白315种,并对上述检测中膜蛋白功能进行分类检索,发现二者红细胞膜蛋白主要功能较为一致,但也发现大熊猫参与能量代谢的膜蛋白略多于亚洲黑熊。
- 邓林华赵俸涌李勤黄山魏明张亚辉王承东李德生朱自严
- 关键词：大熊猫亚洲黑熊红细胞膜蛋白代谢
- 君子兰的捡漏
- 2012年
- 漏，可以捡，但不可有贪念。你想想，哪有天上掉馅饼的好事？捡，需要机遇。需要智慧，需要理性，也需要知识。惟有这样，才可能捡到超值的漏。
- 赵俸涌闫鹏
- 关键词：君子兰花卉观赏园艺盆景栽培技术
- 56℃水浴灭活处理对红细胞血型抗原影响的研究
- 2020年
- 目的灭活是指用物理或化学手段破坏微生物使其丧失生物学活性,但不损害其重要抗原的方法。新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者输血前血型鉴定试验需将血样经56℃水浴30分钟灭活后再进行,本研究旨在发现灭活过程对红细胞血型抗原检测的影响。方法采用滴定后的血型鉴定试剂,对5例56℃灭活前后血液样本的红细胞血型抗原进行检测。结果在使用标化后的抗体对A、B、RhD及Fy^a抗原分别进行微柱凝胶法检测后发现:A、B抗原在各稀释度中均未出现统计学差异,而RhD抗原在各稀释度检测时均出现统计学差异(8倍稀释度时:P<0.05;16~256倍稀释度时:P<0.01),对Fya抗原在各稀释度检测时均出现统计学差异(P<0.01)。结论56℃灭活程序会造成红细胞血型抗原减弱对血型抗原检测产生较大影响。
- 赵俸涌郭忠慧李勤杨启修朱自严
- 关键词：红细胞膜蛋白稳定性抗原检测
- RhCE表型对RhD抗原量及抗-D效价测定的影响研究被引量：2
- 2020年
- 目的目前对Rh系统抗-D的定量或效价检测(相对定量)方法皆依赖于试剂红细胞。日常工作中,绝大多数实验室采用单人份红细胞作为效价测定的试剂红细胞,若RhCE表型对RhD抗原表达量影响显著,则不同RhCE表型必然会产生不同的抗-D效价测定结果。本研究旨在通过RhCE分型,RhD抗原定量试验及相应抗体进行效价测定,比较分析RhCE表型对RhD抗原量及抗-D效价测定的影响。方法采用血清学方法筛选获得CCee、Ccee、ccEE、CcEe表型的RhD阳性标本,并使用流式细胞术检测上述红细胞RhD抗原量,最后使用不同RhCE表型单人份标本红细胞对同一份抗-D进行效价测定。分析RhCE表型对RhD抗原量及抗-D效价测定的影响。结果在99例细胞红细胞标本进行Rh血型血清学分型后,对CCDee(n=17)、CcDee(n=15)、CcDEe(n=8)、ccDEE(n=8)分型细胞进行流式免疫荧光检测,发现CcDee与ccDEE及CcDEe间、CCDee与ccDEE之间RhD抗原的荧光量比较存在较大统计学意义差异(P<0.001),CcDee与CCDee比较存在统计学意义差异(P<0.01),其余各组间均不具统计学意义的差异;再对其中CCDee(n=15)、CcDee(n=14)、CcDEe(n=8)、ccDEE(n=8),使用同1份抗-D血浆进行效价测定分析,将效价结果与红细胞RhD抗原免疫荧光值(MFI)进行比较后,发现红细胞表面RhD抗原量与效价二者呈现正相关关系(r=0.907;P<0.001),对效价与RhD抗原MFI值进行统计分析发现:对同一份抗-D血浆,效价值为32、64、128各组内红细胞MFI具有统计学意义的差异(P<0.05);将效价与RhCE分型进行统计分析,发现CCEE与Ccee间、CcEe与Ccee间存在统计学意义的差异(P<0.05)。结论不同的RhCE表型会造成D抗原表达差异,D抗原量对效价测定有较大影响,提示在效价测定试验中,使用相同RhCE分型红细胞作为试剂细胞或对RhD抗原进行定量分析可提高效价试验的准确度。
- 赵俸涌王中英徐婷王晨郭忠慧李勤张嘉敏向东朱自严
- 关键词：试剂红细胞质控
- NLRP3炎性小体在单核细胞清除老化红细胞过程中的活化
- 目的 分析单核细胞在体外清除老化红细胞时,NLRP3炎性小体是否活化.方法 THP-1细胞经PMA诱导,使其具有吞噬能力,和42℃水浴老化红细胞,及IgG抗D致敏红细胞分别共培养.镜检观察THP-1对这两种红细胞的吞噬率...
- 李勤周洁张嘉敏赵俸涌朱自严
- 关键词：老化红细胞细胞因子
- 大熊猫输血基础研究
- 大熊猫作为中国特有的珍稀动物,一度濒临灭绝的边缘。经过多年有效的保护,目前已由濒危水平降至易危水平。医疗救治是大熊猫保护的重要环节,而输血则是医疗救治中不可缺少的手段。对现有大熊猫死亡病例(n=71)的分析发现,大约有2...
- 赵俸涌
- 关键词：大熊猫输血免疫血液学红细胞膜蛋白
- 文献传递
- RhC弱表达变异型标本同时发生RHCE、RHD基因突变1例
- 2020年
- 目的分析1例血清学RhC抗原弱表达标本的RH基因背景。方法标本经RhD阴性确认及Rh分型后,抽取基因组DNA。QRT-PCR检测是否具有RHD基因,由于该标本具有RHD基因,对RHD和RHCE基因同时进行测序分析,并对RHD基因进行合子型分析。结果标本血清学RhC弱表达,同时RhD阴性,RHD和RHCE基因同时发生突变,RHD基因突变为RHD*01N.16(c. 711delC;p. Val238Cysfs*8),合子型为RHD/-。RHCE基因发现2个突变,分别是RHCE*01.01(c. 48G>C;p. Trp16Cys)及RHCE-D(4)-CE。结论 RhC/c/E/e抗原同样具有大量变异型,RH基因背景也相当复杂,为进一步提升输血安全性,开展针对RhC/c/E/e变异型的研究具有一定意义。
- 李勤王菲郭忠慧武云香王晨赵俸涌张德梅朱自严
- 关键词：RHCE基因变异型
