赵妍
- 作品数：65 被引量：128H指数：6
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家科技支撑计划黑龙江省杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学环境科学与工程经济管理医药卫生更多>>
- 鸡传染性喉气管炎病毒gC蛋白的多抗制备、细胞定位及功能研究被引量：4
- 2014年
- 为制备对鸡传染性喉气管炎具有诊断应用价值的抗体,并研究鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)gC蛋白在LMH细胞内的分布及gC蛋白对病毒在细胞间传播过程中的作用,本研究以ILTV—LJS09毒株基因组为模板,应用PCR方法扩增gC基因的主要抗原性片段,并克隆至原核表达载体pET-32a(+)构建pET-32a—gC质粒,经IPTG诱导表达并纯化,获得His—gC重组蛋白,免疫新西兰大白兔制备抗血清。Western blot结果表明,所制备的兔抗-ILTV gC抗体能与纯化的His—gC蛋白发生特异性反应且能检测到内源性gC蛋白。间接免疫荧光试验结果表明,所制备的兔抗ILTV-LJS09 gC蛋白的多抗能与ILTV LJS09、HLJ0507、MDJ0442、SD0203、Zhj1298毒株反应,特异性良好。采用获得的抗gC抗体观测LJS09-gC蛋白在LMH细胞内的分布,发现gC蛋白主要存在于病毒感染细胞的胞质和胞膜上,细胞核和未感染的细胞中没有gC蛋白。利用抗体中和ILTV gC蛋白的试验结果表明,gC蛋白可能直接参与病毒在细胞间传播,从而影响病毒蚀斑的形成。本研究成功制备了具有诊断价值的兔抗ILTV-LJS09 gC蛋白的多克隆抗体,并证实LJS09 gC蛋白在分布及功能上具有a-疱疹病毒的保守性,为gC蛋白生物学特性和ILTV感染机制的研究提供了重要数据。
- 孙永珍赵妍崔红玉王云峰
- 关键词：ILTV多克隆抗体细胞定位
- 使用烙铁进行黄牛子宫脱垂截除手术的体会被引量：1
- 2013年
- 黄牛是我国山区农民的重要使役动物，子宫脱垂是黄牛的一种常见产科疾病，可引起阴道及子宫水肿、子宫内膜炎、生产瘫痪甚至死亡，给山区农业生产造成巨大损失。轻微的子宫脱垂可通过整复手术进行复位，但遇到难以整复或是污染严重的状况时，则需要通过子宫截除术以保全黄牛。
- 夏齐培夏晓辉赵妍
- 关键词：子宫脱垂黄牛烙铁山区农民整复手术产科疾病
- 两株鸡传染性喉气管炎病毒的分离与鉴定
- 本研究对黑龙江省两个养鸡场临床疑似感染鸡传染性喉气管炎的病鸡喉头和气管进行病料采集，进行鸡胚绒毛尿囊膜接种和人工感染易感鸡实验，观察鸡传染性喉气管炎的典型病变和临床症状。根据GenBank发表的鸡传染性喉气管炎病毒gB、...
- 赵妍崔红玉王云峰
- 关键词：鸡传染性喉气管炎病毒基因序列病毒感染临床症状
- 马立克氏病病毒gE蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1
- 2013年
- 为了获得分泌抗鸡马立克氏病病毒(MDV)gE囊膜糖蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,将pGEX-6P-1表达的重组蛋白gE作为抗原,免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术,共筛选获得4株能够稳定分泌抗MDV gE蛋白抗体的杂交瘤细胞株。抗体亚型鉴定结果表明,4株均为IgG1型,轻链为κ链。间接免疫荧光结果显示,4株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体均能特异性识别MDV,并具有一定的中和活性。本研究对MDV诊断、抗原表位分析及鉴定等具有重要的应用价值。
- 李巧玲崔红玉牛军伟闫帅高明杨红亚赵妍王云峰
- 关键词：马立克氏病病毒原核表达单克隆抗体
- 表达鸡新城疫病毒F蛋白的重组马立克氏病毒的构建及其鉴定被引量：3
- 2012年
- 为构建表达鸡新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)的重组马立克氏病毒(MDV),本研究采用RT-PCR方法从NDV强毒株F48E9基因组中扩增出病毒的融合蛋白F基因,构建由CMV启动子和BGH polyA组成的2.7 kb F基因表达盒。将其插入带有黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶基因(gpt)和MDV US2同源臂的中间转移载体pUAB-gpt中获得重组MDV转移载体pUAB-gpt-wF。将该转移载体与MDV-814疫苗株感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)总DNA共转染CEF,经同源重组及gpt选择系统筛选,获得带有F基因表达盒的重组MDV(rMDV814-wF)。其体外增殖与亲本病毒没有差异。经间接免疫荧光试验、PCR、Southern-blot及western blot等试验证明,重组病毒在CEF中传至13代以上仍稳定表达NDV的F蛋白。该重组病毒的构建为MDV活载体疫苗的筛选及应用奠定了基础。
- 闫帅崔红玉李巧玲赵妍石星明赵晓岩胡顺磊王玫高明李越王云峰
- 关键词：马立克氏病毒重组病毒F基因
- 鸡传染性喉气管炎及其防治
- 2010年
- 鸡传染性喉气管炎（ILT）是由鸡传染性喉气管炎病毒（ILTV）引起的一种急性、高度接触性呼吸道传染病。其特征是呼吸困难，咳嗽和咳出血样渗出物或黄色干酪样假膜，剖检可见喉头、气管黏膜肿胀、大面积出血，最终糜烂、坏死。
- 赵妍石星明王云峰
- 关键词：鸡传染性喉气管炎病毒呼吸道传染病接触性渗出物血样
- 特异性沉默鸡马立克氏病病毒gI、gE基因的siRNA序列及其载体和应用
- 本发明提供了一种能有效地特异性沉默鸡马立克氏病病毒(MDV)gI和gE的siRNA序列及其载体和在MDV基因治疗和制备基因工程疫苗中的应用。本发明使用http//www.ambion.com的靶位点筛选和设计工具，通过一...
- 王云峰赵妍石星明崔红玉刘长军王玫
- 文献传递
- 禽源U6启动子介导鸡马立克氏病病毒gI、gE基因特异siRNA的筛选及干扰活性鉴定
- 2011年
- 为筛选鸡马立克氏病病毒(MDV)gI、gE基因特异性siRNA,本研究以鸡胚成纤维细胞(CEF)的DNA为模板,扩增禽源cU6-3启动子序列,并合成针对gI和gE基因各5个靶位点的10条shRNA序列。通过重叠PCR将cU6-3启动子与shRNA融合扩增制备shRNA表达盒,将制备的shRNA表达盒分别与重组质粒pEGFP-gI或pEGFP-gE共转染CEF细胞,并根据荧光显微镜观察和流式细胞仪检测结果评价siRNA抑制融合荧光蛋白表达的效率。结果表明,gI和gE基因的抑制效率为10%～80%。分别将其中抑制效率最高的一条shRNA插入pGEM-T载体中构建重组表达质粒pcU6-shgI735和pcU6-shgE936,通过不同细胞系稳定干扰试验和抑制病毒复制试验评价其干扰活性。结果显示,pcU6-shgI735和pcU6-shgE936能够明显抑制融合蛋白的表达及MDV在CEF细胞中的增殖,并且禽源U6启动子构建的表达盒在禽源细胞(DF1)中的活性比在哺乳动物细胞(Vero、MDCK)的活性高1.21～1.45倍。本研究鉴定获得了gI和gE基因的特异性siRNA,筛选出能够抑制MDV复制的靶位点,为MDV基因的功能和抗MDV病毒研究奠定了基础。
- 全炎铭崔红玉赵妍赵晓岩石星明高宏博闫帅张晓艳王玫王云峰
- 关键词：鸡马立克氏病病毒SIRNA
- 鸡传染性喉气管炎病毒gJ蛋白的单克隆抗体及其应用
- 本发明公开了鸡传染性喉气管炎病毒gJ蛋白的单克隆抗体及其应用。本发明筛选得到一株稳定分泌抗gJ蛋白蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株(3B1E6F6)，其微生物保藏号是：CGMCC No.4337。本发明杂交瘤细胞株所分泌的该...
- 王云峰石星明赵妍王玫
- 文献传递
- 抗禽网状内皮组织增生症gp90蛋白的单克隆抗体及其应用
- 本发明公开了一种抗禽网状内皮组织增生症病毒gp90蛋白的单克隆抗体及其应用。本发明采用原核表达系统，用大肠杆菌表达的禽网状内皮组织增生症病毒gp90蛋白作为免疫原，免疫小鼠，经细胞融合，筛选得到一株稳定分泌抗gp90蛋白...
- 王云峰石星明赵妍王玫
- 文献传递
