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赵宝锋: 作品数：10 被引量：39H指数：3; 供职机构：中国疾病预防控制中心更多>>; 发文基金：中国博士后科学基金北京市自然科学基金国家自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生环境科学与工程更多>>

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两种新的电离辐射诱导线粒体DNA缺失类型的分析鉴定: 目的：筛选电离辐射敏感的线粒体DNA(mtDNA)缺失类型,并进行鉴定。材料与方法：用10Gy60Co(射线照射正常人淋巴细胞细胞系,用2对引物的长PCR扩增照射前后样品的mtDNA基因组。发现可能缺失片段后...; 刘青杰封江彬赵宝锋陆雪田梅陈德清; 关键词：电离辐射淋巴细胞系线粒体DNA缺失生物信息学; 文献传递

pEgr-sTRAIL体外转染联合^(60)Co γ射线照射诱导肿瘤细胞凋亡及Caspase-3活化被引量：1: 2009年; 为探讨Egr-1启动子调控TRAIL基因表达的辐射增敏作用及其作用机制,采用体外瞬时转染pEgr-sTRAIL辐射诱导表达载体联合不同剂量60Coγ射线照射,观察其诱导肿瘤细胞凋亡的作用及其与凋亡执行分子Caspase-3活化的关系。结果表明重组质粒体外瞬时转染联合不同剂量60Coγ射线照射可诱导肿瘤细胞凋亡,并具有随剂量增高而增加的趋势。Western blot及分光光度法检测Capase-3活性均显示转染重组质粒pEgr-sTRAIL接受不同剂量γ射线照射后,其Caspase-3活性明显增高,亦有随着剂量增高而增高的趋势。提示γ射线可通过激活Egr-1启动子增加TRAIL诱导凋亡及活化Caspase-3的作用从而提高肿瘤细胞的辐射敏感性。; 田梅郭志英赵宝锋阮建磊苏旭; 关键词：Γ射线细胞凋亡 CASPASE-3

电离辐射诱导的两种新线粒体DNA缺失的分析鉴定被引量：3: 2008年; 目的筛选电离辐射诱导的线粒体DNA（mtDNA）缺失类型，并进行鉴定。方法用10Gy^60Coγ射线照射正常人淋巴细胞细胞系，用2对引物的长PCR扩增照射前后样品的mtDNA基因组。发现可能缺失片段后用限制条件的普通PCR进行确认，并对PCR产物进行纯化、克隆、测序和核酸同源性（BLAsT）分析。结果照射前的淋巴细胞系mtDNA样品只扩增出预期全长片段，照射后每对引物还扩增出可能为缺失造成的短片段；进一步限制条件的普通PCR证实了mtDNA缺失的存在。PCR产物经纯化、克隆后测序进行BLAST分析表明两种mtDNA缺失分别为7455bp（重链nt475～7929）、9225bp（重链nt7714～369）的mtDNA缺失，均发生在8bp正向重复序列之间。进一步的生物信息学检索得出两种mtDNA缺失为新发现的mtDNA缺失类型。结论电离辐射诱导出人淋巴细胞mtDNA 7455bp和9225bp缺失。; 刘青杰封江彬赵宝锋陆雪田梅陈德清; 关键词：电离辐射淋巴细胞系线粒体DNA BP BP

Smac基因对γ射线照射诱导的宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响被引量：10: 2007年; 将Smac基因全长cDNA转染HeLa细胞,以探讨Smac基因过表达对γ射线诱导的宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响及其可能机制。转染24小时后Western Blot结果表明,转染Smac基因全长cDNA的HeLa/Smac细胞其Smac基因表达量与转染pcDNA3.1空载体的HeLa/pcDNA3.1细胞Smac基因表达量相比上调,而相反Smac基因的底物Survivin基因表达量下调。γ射线照射后HeLa/Smac细胞与HeLa/pcDNA3.1细胞相比凋亡率显著升高,Caspase-3活性上调,但HeLa/Smac细胞与HeLa/pcDNA3.1细胞相比DNA损伤及修复无显著变化,对细胞周期也无明显影响。; 赵宝锋田梅阮建磊苏旭; 关键词：SMAC基因 Γ射线 HELA细胞细胞凋亡

Smac基因联合电离辐射抑瘤作用及其机制的实验研究: 本文首先从HeLa细胞总RNA中克隆了Smac基因全长cDNA，构建了其真核表达载体pcDNA3.1/Smac。将pcDNA3.1/Smac转染肿瘤细胞后，利用RT-PCR，Westem Blot，免疫组化，实时荧光定量...; 赵宝锋; 关键词：SMAC基因 Γ射线肿瘤细胞; 文献传递

细胞凋亡抑制蛋白：肿瘤治疗的障碍与靶点被引量：3: 2005年; 细胞凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein,IAP)主要通过结合并抑制细胞凋亡执行分子caspase蛋白家族而抑制细胞凋亡。肿瘤细胞高表达IAP是其获得抗凋亡特性的原因之一,成为肿瘤传统治疗(放疗,化疗等)的障碍。但特异的在肿瘤细胞内高表达而在正常细胞特别是高分化细胞中低表达或无表达也为肿瘤治疗提供了新靶点。干涉IAP分子在肿瘤细胞内的表达或功能已被作为肿瘤传统治疗方法的辅助治疗方法来研究。; 赵宝锋刘建香苏旭; 关键词：细胞凋亡 IAP 肿瘤治疗

^12C^6＋重离子诱导可溶性TRAIL表达增强及其抗肿瘤作用的实验研究被引量：2: 2007年; 目的构建可被辐射诱导激活的表达载体pEgr-sTRAIL,研究其体外瞬时转染联合不同剂量的^12C^6＋离子辐照对人宫颈癌HeLa细胞凋亡和增殖活性的影响。方法SOEing PCR法克隆可溶性TRAIL基因,测序正确后连入pcDNA3.1-Egr质粒,构建pEgr-sTRAIL表达载体;采用GeneCompanionTM聚阳离子转染试剂体外瞬时转染人宫颈癌HeLa细胞;接受不同剂量的^12C^6＋照射后,RT-PCR法检测目的基因 mRNA水平的表达,流式细胞术检测细胞凋亡,克隆形成实验检测细胞增殖存活。结果成功构建了辐射诱导表达载体pEgr-sTRAIL;瞬时转染联合^12C^6＋离子照射可在mRNA水平上诱导sTRAIL表达增强;随照射剂量的增加,转染pEgr-sTRAIL的HeLa细胞凋亡率明显增加,克隆形成率明显下降。结论^12C^6＋离子可诱导重组质粒pEgr-sTRAIL在被转染的HeLa细胞中表达增高,体外基因-^12C^6＋离子联合治疗可诱导肿瘤细胞凋亡明显增多,具有显著的肿瘤抑制作用。; 田梅赵宝锋阮建磊李文建苏旭; 关键词：细胞凋亡克隆形成人宫颈癌HELA细胞

细胞凋亡信号通路调控与肿瘤辐射敏感性被引量：17: 2005年; 赵宝锋刘建香苏旭; 关键词：细胞凋亡信号通路电离辐射肿瘤细胞

Smac基因联合^12C^6＋离子照射对膀胱癌EJ细胞的生物效应观察: 2007年; 目的观察smac基因能否提高膀胱癌EK细胞^12C^6＋离子照射的生物效应。方法实验分为3组：空白对照组、转染空载体组、转染smac基因组。利用免疫组化及流式细胞仪方法检测3组细胞内smac基因表达。转染24h后对3组分别进行0、2和4Gy ^12C^6＋离子照射，用克隆形成实验对3个组分别检测细胞的存活分数并利用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果免疫组化结果表明转染pcDNA3．1／smac的细胞其smac基因表达量明显高于转染空载体pcDNA3．1的细胞和空白组细胞。流式细胞仪数据显示，smac基因转染细胞smac基因的荧光强度（3080）显著高于转染空载体组（2256）（P〈0．05），而后者与空白对照组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。克隆形成实验结果表明，转染smac基因组细胞^12C^6＋离子照射后的存活分数较转染空载体组细胞显著降低（P〈0．05）。流式细胞仪测定结果表明，^12C^6＋离子照射的转染smac基因组的细胞凋亡率明显高于转染空载体组（P〈0．05）。结论外源smac基因转染膀胱癌细胞株能显示高表达，并能提高膀胱癌细胞的凋亡率，与^12C^6＋离子照射结合后能显著降低细胞存活分数和进一步增高凋亡率。; 赵宝锋田梅阮健磊苏旭李文建; 关键词：SMAC基因碳离子 EJ细胞细胞凋亡

smac基因的克隆及过表达对宫颈癌HeLa细胞γ射线敏感性的影响被引量：6: 2006年; 目的克隆smac(thesecondmitochondria-derivedactivatorofcaspases,smac)基因,构建真核表达载体pcDNA3·1/smac,并转染宫颈癌HeLa细胞,探讨smac基因过表达对宫颈癌HeLa细胞γ射线敏感性的影响。方法用RT-PCR的方法从HeLa细胞总RNA中克隆smac基因,连入pcDNA3·1载体并测序。将测序正确的pcDNA3·1/smac载体转染HeLa细胞系,利用RT-PCR法及Westernblot鉴定HeLa细胞内smac基因的表达。γ射线照射后48h利用MTT法检测各组细胞生长抑制率。结果测序结果表明成功的从HeLa细胞总RNA中扩增了全长smac基因。RT-PCR及Westernblot结果表明,转染pcDNA3·1/smac的HeLa/smac细胞中,smac基因表达量明显高于未转染的HeLa细胞及转染空载体pcDNA3·1的HeLa/pcDNA3·1细胞的表达量。不同剂量的γ射线照射48h后,MTT结果表明,γ射线对转染pcDNA3·1/smac的HeLa/smac细胞的生长抑制率(38·85%)显著高于空白组HeLa细胞(17·64%)及转染空载体pcDNA3·1的HeLa/pcDNA3·1细胞(20·32%)。结论成功地克隆了smac基因,在宫颈癌HeLa细胞中过表达外源smac基因能够提高其对γ射线的敏感性,有望开辟提高宫颈癌放疗敏感性的新途径。; 赵宝锋田梅雷宏伟苏旭; 关键词：SMAC基因 Γ射线 HELA细胞

赵宝锋

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