赵贺华
- 作品数：4 被引量：16H指数：2
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- 受体相互作用蛋白140敲低对小鼠小胶质瘤细胞增殖的影响被引量：3
- 2008年
- 目的探讨受体相互作用蛋白（RIP）140基因敲低对小鼠小胶质瘤细胞（BV-2）增殖的影响。方法用脂质体转染方法将RIP140-短发夹RNA（shRNA）质粒导入BV-2细胞，用嘌呤霉素筛选稳定表达RIP140-shRNA的细胞系，用实时定量PCR和Western印迹法检测RIP140敲低的效果，用四甲基偶氮唑蓝（MTY）法检测RIP140敲低对细胞增殖的影响。结果成功构建稳定表达RIP140-shRNA的BV-2-71674和BV-2-71080；与BV-2细胞相比，BV-2-71674和BV-2-71080细胞中RIP140的表达无论mRNA水平还是蛋白质水平均明显低，下调率（mRNA）分别为73％和75％（均P〈0．01）；MTT法检测显示，BV-2细胞在24、48、72、96h 4个时间点增殖率分别为3．03±0．01、7．36±0．08、14．15±0．25、23．35±0．09，BV-2-71674细胞则分别为2．15±0．03、6．43±0．08、11．77±0．31、18．47±0．04，BV-2-71080细胞分别为1．77±0．03、4．74±0．25、10．03±0．02、17．66±0．21；BV-2-71674和BV-2-71080细胞增殖率均明显低于BV-2细胞，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论RIP140敲低可以抑制BV-2细胞的增殖。
- 晁爽郁卫东杜军保曾超美梁蓉杨丽君陈敏霞赵贺华郭静竹
- 关键词：神经胶质瘤细胞增殖
- ERG甲基化作为无创产前诊断唐氏综合征标记的可行性研究被引量：12
- 2009年
- 目的探讨ERG基因是否可以作为孕早期血浆中检测胎儿DNA的通用标志物。方法随机选择早期妊娠孕妇70例,并以经体检确定为未孕健康妇女70例、分娩过21-三体胎儿的妇女11例和顺产后3 d妇女20例作为对照组。利用甲基化敏感限制性内切酶HpaⅡ、MspⅠ酶切后进行常规PCR的方法,检测血细胞、绒毛和血浆DNA目的基因ERG21-128序列的甲基化模式,并对妊娠组和对照组样本进行统计学分析。结果位于21号染色体上的ERG基因21-128序列在70例孕8、9、10周孕妇绒毛组织中甲基化而在母体血细胞中未甲基化,绒毛甲基化检出率为100%;在血浆中游离胎儿DNA ERG基因21-128序列的甲基化检出率为77.1%,敏感度为77.1%。其中8、9、10周甲基化差异无统计学意义(P>0.05)。在70例未孕健康妇女、11例生产过21三体胎儿的健康妇女和20例产后3 d妇女的对照组的血浆中ERG 21-128序列均未甲基化。结论在母体和胎儿DNA中,ERG基因21-128区的甲基化有显著性差异,实验方法也比较简单,提示了ERG是无创性产前诊断DS的一个潜在标记物。
- 赵贺华郁卫东梁蓉章利琴谢丽娜郭静竹
- 关键词：胎儿DNA孕妇血浆无创性产前诊断ERG
- TIMP-1基因缄默削弱SH-SY5Y细胞的增殖潜能并诱导其凋亡增强
- 2008年
- 前期研究发现,人基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(tissue inhibitors of metalloproteinases-1,TIMP-1)在唐氏综合征(Down’s syndrome,DS)胎儿脑组织内表达下调.为了探讨TIMP-1表达下调参与DS脑病变发生的可能机制,本研究以人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)为模型,观察TIMP-1基因沉默后对其增殖和凋亡的影响.应用LipofectaminTM2000将TIMP-1特异性短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)导入SH-SY5Y细胞,经嘌呤霉素筛选获得稳定表达TIMP-1-shRNA细胞株;应用RT-PCR、real-time PCR和Western印迹对干扰效率进行鉴定:与SH-SY5Y细胞相比,无论在mRNA水平还是蛋白水平,SH-SY5Y-TIMP-1-shRNA细胞中TIMP-1的表达显著下调(下调率接近100%).结果显示,已成功构建了TIMP-1基因沉默的SH-SY5Y细胞模型.在此基础上,通过MTT检测发现,TIMP-1基因沉默后SH-SY5Y细胞增殖减慢;流式细胞仪和荧光显微镜凋亡检测显示,TIMP-1基因沉默后SH-SY5Y细胞凋亡明显增加.这些研究结果表明,TIMP-1基因沉默能削弱SH-SY5Y细胞的增殖能力并增强SH-SY5Y的凋亡效应,提示TIMP-1可能是通过影响神经细胞的增殖和凋亡参与DS智力低下的发病过程.
- 陈敏霞郁卫东梁蓉杨丽君晁爽赵贺华郭静竹
- 关键词：TIMP-1基因沉默增殖凋亡SH-SY5Y细胞
- 受体相互作用蛋白140对神经胶质细胞生物学行为的影响被引量：2
- 2011年
- 目的明确受体相互作用蛋白140（RIP140）基因过表达对小鼠小胶质瘤细胞（BV-2）增殖、凋亡、侵袭及迁移行为的影响。方法采用脂质体转染和G418筛选法构建RIP140过表达的BV-2细胞模型，用实时定量PCR及Western印迹法鉴定过表达模型构建是否成功，用四甲基偶氮唑蓝（Mrrr）法、流式细胞仪和Transwell小室检测RIPl40过表达对BV-2细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移行为的影响。结果成功构建RIP140过表达模型BV-2—1，BV-2—1细胞RIP140mRNA与蛋白表达量均高于BV-2细胞（t=49．794，P〈0．01）。细胞增殖检测显示：BV-2细胞24、48、72h吸光度（A）值分别为1．157±0．013、1．679±0．005、2．609±0．008，BV-2—1细胞3个时间点的A值分别为0．929±0．013、1．188±0．008、1．528±0．012，BV-2，1细胞48及72h增殖率明显低于BV-2细胞（t=6．058、9．245，均P〈0．01）。凋亡检测显示：BV-2—1细胞凋亡率明显高于BV-2细胞[（5．35±0．23）％比（3．46±0．45）％，t=6．619、P=0．003]。侵袭检测显示：BV-2—1细胞侵袭平均数多于BV-2细胞[（166±43）个比（93±32）个，t=3．403，P=0．007]。迁移检测显示BV-2—1细胞迁移平均数高于BV-2细胞[（202±50）个比（101±25）个，t=4．104，P=0．002]。结论RIP140过表达抑制BV-2细胞增殖，促进其凋亡；RIP140过表达促进BV-2细胞的侵袭和迁移能力。
- 谢丽娜郁卫东梁蓉张晓蕊晁爽赵贺华章利琴马淑云郭静竹
- 关键词：神经胶质瘤细胞增殖细胞运动
