邱云青
- 作品数：28 被引量：39H指数：4
- 供职机构：北京市结核病胸部肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金北京市科委国际合作项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 单链构象多态性与核酸杂交联合检测耐氧氟沙星的结核分枝杆菌被引量：3
- 2005年
- 目的探讨聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)并Southern杂交检测耐氧氟沙星(OFLX)结核分枝杆菌的可行性,并探索结核分枝杆菌对OFLX敏感与耐药的界限。方法(1)体外筛选人工诱变的耐OFLX的耐药突变株,并检测OFLX对这些耐药株的最低抑菌浓度(M IC)和最低杀菌浓度(MBC)。(2)扩增结核分枝杆菌的gyrA基因,包括H37Rv 1株、H37Ra 1株、临床分离的OFLX敏感株10株及人工诱变的耐OFLX H37Rv(17株)、H37Ra(17株)及临床分离菌株(51株)共计85株,并对此扩增产物进行SSCP分析及Southern杂交,对比观察耐OFLX结核分枝杆菌的核酸单链条带位移的变化。为了验证PCR-SSCP并Southern杂交结果的可重复性,对36株临床分离的耐OFLX菌株的耐药界限进行初步检测。结果经PCR-SSCP及Southern杂交,85株人工诱变的耐OFLX菌株,全部检测到gyrA基因突变。在OFLX 10μg/m l这一点上,明显地存在着一个结核分枝杆菌对OFLX敏感与耐药并存的交叉区。对36株临床分离的OFLX耐药菌的PCR-SSCP合并Southern杂交检测结果显示,对比标准株H37Ra,在临床分离的耐OFLX菌株间观察到了类似的因单链构象变化而引起的单链位移的结果。结论PCR-SSCP合并Southern杂交可以清晰地区分对OFLX敏感与耐药的菌株,以10μg/m l为界作为判别结核分枝杆菌对OFLX是否已经产生耐药的标准是适宜的。
- 张健源王甦民李传友田苗张旭霞赵冰李卫民赵雁林邱云青马玙
- 关键词：氧氟沙星核酸杂交
- 脂多糖对感染卡介苗巨噬细胞表达细胞因子影响的研究．
- 2004年
- 目的 探讨脂多糖(LPS)对感染卡介苗巨噬细胞表达细胞因子的影响。方法 用ELISA方法比较单独巨噬细胞组。巨噬细胞+卡介苗+LPS组，巨噬细胞+卡介苗组以及巨噬细胞+LPS组细胞因子表达的差异。结果 单纯巨噬细胞产生较少量的IL-12，TNF-α，LPS能刺激巨噬细胞组特别是感染卡介苗巨噬细胞组产生大量的IL-12，TNF-α。与单纯巨噬细胞组相比，LPS也不能有效地刺激巨噬细胞产生更多的IL-1，IL-2，IL-18和IFN-γ。结论 LPS能诱导巨噬细胞(包括卡介苗感染巨噬细胞)产生更多的TNF-α和IL-12，而有利于宿主的免疫应答。提示LPS及其同系物有潜力作为抗结核药物和疫苗或其佐剂。
- 李传友刘忠泉李卫民邱云青郭艳玲韩喜琴葛建忠端木宏谨
- 关键词：巨噬细胞卡介苗LPSIL-12脂多糖细胞因子
- PCR-SSOP并Southern杂交检测实验室筛选耐氧氟沙星结核分枝杆菌的研究
- 2004年
- 目的 探讨PCR-SSCP并Southern杂交检测耐氧氟沙星(OFLX)结核分枝杆菌的可行性，并探索结核分枝杆菌对OFLX敏感与耐药的界限。方法 ①体外诱导筛选耐OFLX的自然突变株，并检测OFLX对这些耐药株的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)；②扩增结核分枝杆菌的gyrA基因(包括H37Rv、H37Ra、临床分离的OFLX敏感株及体外诱导筛选的耐OFLX的菌株)并对此扩增产物进行单链构象多态性(SSCP)分析及Southern杂交，以判定应用该技术的效果。结果经PCR-SSCP及Southern杂交检测，85株体外诱导的自然耐OFLX菌株，均检测到gyrA基因突变。研究发现．在OFLX 10μg／ml这一点上，明显地存在着一个耐OFLX结核分枝杆菌对OFLX敏感与耐药并存的交叉区。结论PCR-SSCP合并Southern杂交可清晰地区分OFLN敏感与耐药株。本研究结果显示，以10μg／ml为界作，为判别耐OFLX的标准是适宜的。
- 张健源王甦民李传友田苗张旭霞赵冰李卫民赵雁林邱云青马玙
- 关键词：结核分枝杆菌SOUTHERN杂交MBC敏感株PCR-SSOP
- 结核分枝杆菌天然黏附素HBHA的制备及其检测应用
- 目的探讨从BCG的苏通培养滤液中分离与纯化结核分枝杆菌天然黏附素 HBHA蛋白,以及天然HBHA蛋白和原核表达的HBHA蛋白应用ELISA检测方法诊断结核病方面的效果。并比较天然HBHA蛋白和原核表达的HBHA蛋白在结核...
- 张旭霞孙照刚李妍刘洋李卫民邱云青张健源端木宏瑾李传友
- 文献传递
- 实时荧光定量PCR检测耐药菌中耐药相关基因whiB7的表达
- 目的结核分枝杆菌对链酶素的耐受已经被证明与whiB7有关,whiB7的表达异常是否与对于目前临床应用的其它一线和二线药物的耐药也相关目前还未见报道, 本研究的目的是探讨结核分枝杆菌对一线和二线类治疗药物的耐受性是否与wh...
- 孙照刚张旭霞张健源柴利泉李妍田苗李卫民邱云青李传友
- 文献传递
- 分枝杆菌分泌蛋白及膜蛋白的分离被引量：1
- 2006年
- 目的探讨一种新发现的分枝杆菌Mycobac- terium Immunogenum分泌蛋白及膜蛋白的分离方法。方法1用7H9液体培养基培养分枝杆菌Mycobac- terium Immunogenum。2膜蛋白的分离采用酶消化及超声的方法。3分泌蛋白的分离采用Millipore公司的蛋白质浓缩滤器多次离心浓缩获得。4对分离的分枝杆菌Mycobacterium
- 田苗邱云青李传友
- 关键词：分泌蛋白分枝杆菌膜蛋白液体培养基酶消化离心浓缩
- 实时荧光定量PCR检测耐药结核分枝杆菌中耐药相关基因whiB7的表达被引量：5
- 2006年
- 目的探讨结核分枝杆菌耐药性与whiB7基因表达水平之间的关系。方法以耐受利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇和氟喹诺酮的结核分枝杆菌临床分离株为研究对象,利用实时定量PCR的方法,检测药物刺激结核分枝杆菌后whiB7基因表达水平的变化。结果除利福平刺激相应的菌株后,whiB7基因的表达水平变化不明显外,其余药物的刺激均会引起结核分枝杆菌耐药株的whiB7基因表达水平发生显著变化。结论结核分枝杆菌的whiB7基因是对多种抗生素刺激发生反应的基因,推测whiB7的表达参与结核分枝杆菌的耐药过程。
- 孙照刚张旭霞张健源柴利泉李妍田苗李卫民邱云青李传友
- 关键词：结核分枝杆菌耐药基因
- MBL免疫治疗结核病小鼠的实验研究
- 目的观察甘露聚糖结合凝集素 （mannan-binding lectin,MBL）对结核分枝杆菌感染小鼠的免疫治疗作用。方法将 BALB/c 小鼠18只随机分成 MBL 免疫治疗组、微卡治疗组和结核菌感染对照组,每组6只...
- 邱云青田苗张海青李传友
- 文献传递
- 结核分枝杆菌毒力分泌系统Rv3871基因的分子克隆及蛋白表达研究被引量：1
- 2008年
- 目的为探索参与结核分枝杆菌(MTB)毒力分泌系统相关基因的分子功能,对MTB H37Rv株编码Rv3871蛋白基因进行克隆、表达及鉴定分析。方法以结核分枝杆菌H37Rv基因组为模板,用PCR扩增Rv3871基因片段,并重组到原核表达载体pET32a(+)中,转化E.coliBL21(DE3)菌株,用IPTG诱导蛋白表达,通过SDS-PAGE和Western blot对目的蛋白进行检测分析。结果阳性重组质粒经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切得到1 776和5 900 bp两条片段,与预期大小一致。重组质粒测序,与NCBI上Rv3871编码序列比对完全一致,且输入片段读码框与表达载体读码框相吻合。SDS-PAGE检测表达蛋白分子质量单位为84 ku;Western blot检测出特异性阳性信号。结论本研究成功构建了结核杆菌毒力分泌系统重要相关基因Rv3871的原核表达质粒,并在大肠埃希菌中表达Rv3871蛋白,为进一步探讨该基因在MTB毒力分泌中的功能奠定了基础。
- 秦紫芳邱云青黄毕高蕾鲍朗
- 关键词：蛋白表达
- 健康成人牛奶不耐受症的研究
- ＜正＞有关资料表明:牛奶乳糖酶缺乏率在我国成人中高达75%以上,由此造成牛奶吸收不良和不耐受症的发生,影响牛奶营养成分的利用,本次采用问卷调查和氢呼气试验（HBT）对 183名健康成人进行研究,旨在了解我国成人牛奶不耐受...
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- 文献传递
