郑燕玲
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
- 供职机构：南京农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 蛋鸡TRPV6基因的原核表达、纯化及抗体制备
- 2012年
- 为制备蛋鸡TRPV6蛋白多克隆抗体,根据其基因序列,设计1对特异性引物,以卵巢组织中提取的总RNA为模板,扩增蛋鸡TRPV6基因1 801～2 176nt的375bp序列,构建原核表达质粒pET-32a(+)-TRPV6;将重组质粒转化BL21(DE3),经IPTG诱导表达TRPV6融合蛋白,通过镍离子螯合柱纯化后免疫新西兰大白兔,获得兔抗鸡TRPV6多克隆抗体,分别通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法和Western blot检测抗体的效价和抗体特异性。结果表明,试验成功构建原核表达载体pET-32a(+)-TRPV6,SDS-PAGE蛋白电泳检测发现目的蛋白大小约35 000;Western blot分析显示,表达的TRPV6融合蛋白具有良好的免疫原性,其抗体可与大肠杆菌表达的产物特异性结合;ELISA显示其抗体效价达1∶100 000。获得纯化的融合蛋白和多克隆抗体对研究TRPV6钙离子通道在蛋鸡髓质骨形成的作用机理具有重要作用。
- 郑燕玲杨俊花张建鹏江莎侯加法
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 蛋鸡TRPV6基因的原核表达、纯化及抗体制备
- 为制备蛋鸡TRPV6蛋白多克隆抗体,根据基因序列,设计一对特异性引物,以卵巢组织中提取的总RNA为模板,扩增蛋鸡TRPV6基因1801至2176位置的375 BP序列,构建原核表达质粒PET-32A(+)-TRPV6；将...
- 邓益锋郑燕玲杨俊花周振雷夏继飞侯加法
- 关键词：多克隆抗体原核表达纯化蛋鸡
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- 蛋鸡TRPV6基因的原核表达、纯化及抗体制备
- 为制备蛋鸡TRPV6蛋白多克隆抗体,根据基因序列,设计一对特异性引物,以卵巢组织中提取的总RNA为模板,扩增蛋鸡TRPV6基因1801至2176位置的375 bp序列,构建原核表达质粒pET-32a(+)-TRPV6;将...
- 邓益锋郑燕玲杨俊花周振雷夏继飞侯加法
- 关键词：多克隆抗体原核表达纯化蛋鸡
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