郭艳
- 作品数：6 被引量：31H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- J亚群禽白血病ELISA抗体检测方法的建立被引量：12
- 2005年
- 本研究分离纯化了具有反应活性的J亚群禽白血病JL_2株gp85表达蛋白,并以其为抗原,开展了相关反应条件、特异性、重复性、敏感性、现地应用以及国外试剂盒符合率等方面的研究,初步建立了J亚群禽白血病ELISA诊断方法。
- 郭艳付朝阳宋素泉高宏雷王笑梅王英张厚双王晓艳胡建民
- 关键词：J亚群禽白血病ELISA诊断方法
- 禽免疫抑制性传染病的危害和防制被引量：4
- 2003年
- 近年来,我国养禽业的发展非常迅速,已成为我国畜牧业的支柱产业之一.可是随着养禽业的快速发展,各种内在及外在因素也正严重地威胁着养禽业的健康发展,其中疫病已成为威胁养禽业的头号大敌.
- 郭艳付朝阳王笑梅
- 关键词：禽类免疫抑制性传染病防制病原免疫抑制性病毒
- J亚群禽白血病JL-2株gp85基因的克隆与表达被引量：6
- 2005年
- 本实验在分离鉴定J亚群禽白血病JL_2株的基础上,利用PCR方法扩增出包括gp85基因在内的长度为960bp的DNA片段。将其连到PGEX_6p_1载体上,构建了重组表达质粒PGEX_6P-1/gp85,对质粒进行序列分析并在IPTG的诱导下进行表达。SDS_PAGE分析结果表明,融合蛋白(54 Ku)在BL21中得到有效表达。表达产物占菌体总蛋白的31.8%。Western Blot结果表明,表达产物可与ALV_J阳性血清发生特异性反应。这些结果为进一步研究gp85蛋白的功能及研制ALV_J ELISA诊断试剂盒奠定了基础。
- 宋素泉付朝阳高宏雷王笑梅曾祥伟郭艳王英张厚双王晓艳魏萍
- 关键词：GP85基因克隆
- CIAV VP1 C端基因片段克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：5
- 2004年
- 将从组织病料中提取到的鸡传染性贫血病毒核酸经PCR扩增得到vp1基因,用DNAStar分析软件分析预测VP1的抗原表位,它们主要位于VP1氨基酸序列的第1～95、134～303、327～435位,分别命名为Ⅰ区、Ⅱ区、Ⅲ区。欲表达C端基因片段,含部分Ⅱ区和完整的Ⅲ区。把vp1基因克隆到表达载体pGEX＿6p＿1上,用BamHI消化重组表达质粒pGEX＿vp1,回收含C端基因的大片段,自连转化大肠杆菌感受态细胞,得到重组质粒pGEX＿vp1(C)。重组菌经IPTG诱导,SDS＿PAGE分析,结果VP1C端基因片段在大肠杆菌中成功表达,表达的融合蛋白以包涵体形式存在,分子量约为49kDa。蛋白纯化后作ELISA检测,可与阳性血清反应。本研究为研制应用重组抗原制备ELISA诊断试剂盒奠定了基础。
- 王英王笑梅高宏雷付朝阳张厚双宋素泉郭艳
- 关键词：VP1大肠杆菌克隆VP1基因病料
- J亚群禽白血病病毒Gp85蛋白的表达及ELISA诊断方法的建立
- J亚群禽白血病病毒是90年代初由英国鉴定出来的禽白血病病毒ALV新的亚群,主要引起肉鸡的骨髓瘤白血病.近年来该病毒在世界范围内迅速传播,给各国养禽业带来了巨大的威胁.中国于1999年首先在肉用型鸡群中分离鉴定出了J亚群禽...
- 郭艳
- 关键词：J亚群禽白血病间接ELISA
- 文献传递
- J亚群禽白血病Hrb-1分离株env基因克隆及gp85杆状病毒表达载体的构建被引量：7
- 2004年
- 自哈尔滨某送检患病鸡群中分离出一株病毒,经RT＿PCR检测、SPF鸡胚成纤维细胞增殖后,获取其前病毒DNA,采用依据原型毒株HPRS＿103cDNA序列设计并合成的一对引物,PCR扩增病毒的囊膜基因,连接pMD18＿T载体并转化大肠杆菌JM109,培养后提取质粒分别用HindIII,BamHI进行单酶切和双酶切鉴定,得到了阳性重组质粒pMD18＿T＿Hrb＿1/env,对其进行PstI酶切,回收包含J亚群禽白血病病毒株Hrb＿1gp85基因的997bp片段,应用BactoBac杆状病毒表达系统,将外源片段与线性化的杆状病毒载体pFastBacHTA进行连接,获得重组载体pFASTBacHTA/gp85,将该重组载体转化DH10Bac感受态细菌,在体内进行重组,经抗性和蓝白斑筛选,获得了杆状病毒重组载体Bacmid/gp85,为表达gp85并建立适于国内应用的ELISA诊断方法奠定了基础。
- 付朝阳宋素泉高宏雷王笑梅郭艳王英张厚双尹训南童光志
- 关键词：杆状病毒表达系统
