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金卫林

作品数：45 被引量：174H指数：7
供职机构：上海交通大学生命科学技术学院更多>>
发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划军队医药卫生科研基金更多>>
相关领域：生物学医药卫生文化科学更多>>

合作作者

文献类型

  • 38篇期刊文章
  • 5篇会议论文
  • 2篇专利

领域

  • 22篇生物学
  • 21篇医药卫生
  • 1篇文化科学

主题

  • 16篇细胞
  • 9篇蛋白
  • 8篇NOGO-A
  • 7篇神经元
  • 7篇胶质
  • 6篇基因
  • 5篇克隆
  • 4篇神经营养
  • 4篇缺血
  • 4篇转导
  • 4篇分子
  • 3篇蛋白转导
  • 3篇营养因子
  • 3篇源性
  • 3篇源性神经营养...
  • 3篇再灌注
  • 3篇真核
  • 3篇真核表达
  • 3篇神经营养因子
  • 3篇受体分子

机构

  • 37篇第四军医大学
  • 14篇上海交通大学
  • 4篇第四军医大学...
  • 3篇南方医科大学...
  • 2篇第四军医大学...
  • 2篇解放军第30...
  • 1篇军事医学科学...
  • 1篇苏州大学
  • 1篇南方医科大学
  • 1篇哈佛医学院
  • 1篇西安医学院

作者

  • 45篇金卫林
  • 25篇鞠躬
  • 5篇龙梅
  • 4篇蒋晖
  • 4篇李容
  • 4篇姚琴
  • 4篇杨浩
  • 4篇赵湘辉
  • 4篇王颖
  • 3篇涂艳阳
  • 3篇陈绍洋
  • 3篇崔大祥
  • 3篇郑春霞
  • 3篇游思维
  • 3篇熊利泽
  • 3篇孙芳
  • 3篇王强
  • 2篇董辉
  • 2篇王春婷
  • 2篇黄文晋

传媒

  • 7篇第四军医大学...
  • 4篇细胞与分子免...
  • 3篇解剖学报
  • 3篇生物化学与生...
  • 3篇中国神经科学...
  • 2篇转化医学电子...
  • 1篇中国肿瘤生物...
  • 1篇中国神经科学...
  • 1篇中国中西医结...
  • 1篇生物技术通报
  • 1篇中国中西医结...
  • 1篇中华医学杂志
  • 1篇实验生物学报
  • 1篇上海交通大学...
  • 1篇牙体牙髓牙周...
  • 1篇中国临床解剖...
  • 1篇神经解剖学杂...
  • 1篇中国生物化学...
  • 1篇医学研究生学...
  • 1篇解剖学研究

年份

  • 1篇2021
  • 1篇2018
  • 1篇2017
  • 2篇2014
  • 1篇2013
  • 3篇2012
  • 2篇2011
  • 2篇2009
  • 3篇2007
  • 3篇2006
  • 6篇2005
  • 9篇2004
  • 6篇2003
  • 2篇2002
  • 2篇2001
  • 1篇2000
共 45 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
LINGO-1-Fc蛋白对低钾诱导小脑颗粒神经元凋亡的保护作用被引量：7
2006年
髓鞘抑制因子Nogo-A、MAG和OMgp通过共同的受体信号复合物NgR/p75NTR(或者TROY)发挥对中枢神经纤维再生的抑制作用.新近克隆的跨膜蛋白LINGO-1是该信号途径的另一个重要组成成分和调节分子.LINGO-1特异表达于中枢神经系统,神经元上的LINGO-1被证明参与调节中枢神经再生的抑制信号,而少突胶质细胞表达的LINGO-1分子参与负调节少突胶质细胞的髓鞘化过程.为探讨LINGO-1分子在神经元凋亡过程中的作用,利用包含LINGO-1分子胞外段LRR和IgC2结构域的Fc融合蛋白作为功能性拮抗剂,研究LINGO-1对低钾诱导的小脑颗粒神经元凋亡的保护作用.利用成熟的Hoechst标记凋亡细胞的方法,观察到经LINGO-1-Fc蛋白预处理2h能够显著阻止小脑颗粒神经元的凋亡.仅包括LRR结构域的GST-LINGO-1与LINGO-1-Fc蛋白,虽同样具有与颗粒神经元的结合活性,但是GST-LINGO-1不能有效地阻止低钾诱导的细胞凋亡.这些结果提示,LINGO-1-Fc蛋白能够阻止低钾诱导的小脑颗粒神经元凋亡,并且这种作用可能是IgC2结构域依赖的.
赵湘辉金卫林MI Sha鞠躬
关键词：LINGO-1小脑颗粒神经元凋亡
细胞毒力因子CagA上调人胃黏膜上皮GES-1细胞TET2蛋白的表达被引量：1
2013年
目的:探讨幽门螺旋杆菌细胞毒素相关基因A(cytotoxin associated gene A,CagA)与胃黏膜中TET2(ten-eleventranslocation 2)蛋白表达的关系,以及TET2在CagA致癌过程中可能的作用。方法:Real-time PCR检测人胃黏膜上皮细胞株GES-1和胃癌细胞株MGC-803中TET2 mRNA的表达水平,细胞免疫染色法检测TET2蛋白的细胞定位及表达。将pEGFP-CagA通过脂质体介导转染GES-1细胞,用200μmol/L H2O2处理GES-1细胞建立氧化应激模型,流式细胞仪检测细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)和细胞周期的变化。结果:TET2 mRNA在GES-1细胞的表达水平低于胃癌MGC-803细胞(1.00±0.08 vs 1.68±0.07,P<0.05),TET2蛋白在GES-1细胞表达水平低于胃癌MGC-803细胞(8.09±3.57 vs14.60±2.31,P<0.05)。与阴性对照组pEGFP-N1相比,pEGFP-CagA转染组GES-1细胞中TET2 mRNA表达水平升高(1.00±0.04 vs 0.06±0.00,P<0.05),TET2蛋白表达水平也升高(16.45±4.40 vs 10.82±3.39,P<0.05),ROS积累水平升高(18.39±4.52 vs 15.31±4.40,P<0.05),细胞周期检测出现明显的凋亡峰。氧化应激(H2O2处理)模型中GES-1细胞与空白对照GES-1细胞相比,TET2 mRNA水平升高(1.44±0.02 vs 1.00±0.04,P<0.05),TET2蛋白表达水平增高(15.72±4.52vs 11.74±4.34,P<0.05)。结论:幽门螺旋杆菌毒力因子CagA可诱导GES-1细胞ROS增高和细胞周期的失衡,氧化应激可以诱导TET2表达上调,TET2可能参与CagA的致癌过程。
张昕付华林郅晓金卫林崔大祥
MicroRNA．218通过靶向多梳家族Bmil基因抑制胶质瘤的侵袭、迁移、增殖和肿瘤干细胞样细胞的自我更新被引量：1
2014年
目的：探讨microRNA-218抑制胶质瘤侵袭、迁移、增殖和抑制肿瘤干细胞样细胞自我更新的分子机制．方法：在胶质瘤细胞中过表达miR-218，利用定量逆转录PCR（qRT-PCR）和免疫印迹法（Westernblotting）检测Bmil的表达水平，并利用创伤修复和体外迁移实验检测胶质瘤细胞的迁移和增殖能力；通过裸鼠移植瘤实验，检测体内过表达miR-218对胶质瘤生长的影响；利用生物信息学手段预测miR-218的直接靶标，并通过qRT—PCR、蛋白质印记技术、荧光素酶报告系统和免疫荧光实验对预测的靶标基因进行验证；以胶质瘤细胞球形成实验和极限稀释法验证miR-218对胶质瘤干细胞样细胞自我更新能力的影响；构建Broil干扰载体下调胶质瘤细胞中Bmil的表达，检测对胶质瘤迁移和增殖的影响；利用基因表达芯片分析胶质瘤细胞中miR-218对基因表达的影响．结果：Bmil是miR-218的一个直接靶标，miR-218通过下调Broil的表达来削弱胶质瘤细胞的迁移和增殖能力，并抑制胶质瘤干细胞样细胞的自我更新．另外，miR-218还参与调控一系列与胶质瘤细胞发育相关的基因．结论：作为一种肿瘤抑制因子，miR-218能阻止胶质瘤细胞的迁移、侵袭、增殖，并削弱其干细胞样特征．
涂艳阳高兴春李刚付华林崔大祥刘辉金卫林张永生
关键词：胶质瘤迁移增殖自我更新
逆转录病毒介导的人NT-3在嗅神经鞘细胞中的表达及活性检测被引量：3
2003年
本文构建了pRev-TRF-NT-3的逆转录病毒表达载体,通过Fcopack293细胞将其与pRev-Tet-On分别进行包装,制备了重组缺陷型的hNT-3和Tet-on逆转录病毒,用这两种病毒感染原代培养大鼠嗅神经鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs),并经强力霉素(Dox)诱导,获得Dox浓度依赖性hNT-3表达的OECs,最后经过Western-Blot检测hNT-3的表达以及通过DRG与NT-3转染后OECs联合培养来对表达的hNT-3活性进行鉴定,结果:(1)hNT-3-pcDNA的多克隆位点,用EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ酶切,PCR扩增,再用Sall和Hind Ⅲ切下全长编码的hNT-3 cDNA,定向连接到pRev-TRF上,pRev-TRF全长为6.5kb,NT-3全长为0.78kb,pRev-TRE-NT-3重组体经过鉴定,确认插入子的方向和完整性,结果与预期相符。(2)hNT-3修饰的OECs培养上清经Western-blot检测,与hNT-3抗体结合的蛋白条带分子量约为28kd,hNT-3修饰过的OECs上清表达量明显高于未转染组OECs的表达量,且hNT-3表达量与Dox浓度有依赖性。(3)与hNT-3修饰的OECs联合培养背根神经节(dorsal root ganglion,DRG),有许多DRG细胞向外迁移,这些细胞折光性强,突起较长而纤细,并形成复杂的网络。而未修饰的OECs组,只有少量的细胞迁移生长,细胞迁移和突起生长都很局限,空白对照组的DRG没有向外迁移的细胞和向外延伸的突起;且对照组的突起生长长度明显比NT-3修饰的实验组短(P<0.01)。这些结果表明,Tet-On调控NT-3表达在OECs转染成功,为进一步体内移植修复损伤提供了理想的材料。
杨浩金卫林王春婷游思维鞠躬
关键词：逆转录病毒介导嗅神经鞘细胞活性检测神经营养素-3
新型神经营养因子TAT—BDNF生物合成及生物活性研究被引量：4
2006年
目的:合成新型神经营养因子TAT-BDNF并验证其生物活性,为进一步应用功能蛋白质治疗中枢神经损伤提供研究方法。方法:采用分子克隆方法构建带有TAT蛋白转导区序列及无信号肽序列人BDNF基因的原核表达载体pTAT-HA-BDNF。经原核表达系统表达、纯化、复性获得纯净TAT-BDNF融合蛋白。利用体外培养的新生大鼠小脑颗粒细胞,通过双重免疫荧光细胞染色检测其蛋白转导活性;Hoechst33342染色观察TAT-BDNF对颗粒细胞谷氨酸兴奋性毒性损伤神经保护作用。结果:重组质粒能有效的通过原核表达系统表达并获得高纯度TAT-BDNF。免疫荧光细胞染色显示TAT-BDNF能快速转导入小脑颗粒细胞中,并能显著减少由谷氨酸诱导的细胞凋亡坏死的比例,改善神经元的存活状态。结论:合成的新型神经营养因子TAT-BDNF具有蛋白转导活性及神经保护作用。
蒋晖金大地鲁凯伍金卫林鞠躬
关键词：蛋白转导脑源性神经营养因子中枢神经损伤
血糖升高水平对大鼠低血糖性脑损伤的影响被引量：14
2012年
目的探讨胰岛素诱导大鼠低血糖后，血糖升高水平对大鼠低血糖性脑损害的影响。方法30只Wistar4月龄雄性大鼠，体重（300±50）g，用简单随机抽样方法分为实验组（20只）、正常血糖对照组（A组，5只）和空白对照组（B组，5只）。实验组根据血糖再灌注水平分为1〈血糖≤3mmol／L组（C组）、3〈血糖≤6mmo]／L组（D组）、6〈血糖49mmol／L组（E组）、血糖〉9mmol／L组（F组），每组5只。采用TUNEL染色观察大鼠海马神经元凋亡，Fluoro—JadeB（FJB）染色观察神经元轴突和胞体的退变。染色组问计量资料采用单因素方差分析。结果（1）TUNEL染色：与A组及B组相比（海马CAl区：3．2±1．9、2．8±0．8；海马DG区：4．1±2．4、3．4±1．2），C组、D组、E组、F组海马凋亡细胞数（海马CAl区：40．2±3．1、38．7±2．4、36．8±2．6和76．4±6．3；海马DG区：62．4±4．2、59．8±3．7、68．1±2．8和125．4±5．8）凋亡细胞数增多，差异有统计学意义（海马CAl区：F=13．52，P〈0．05；海马DG区：F=14．29，P〈0．05）；F组（海马CAl区：76．4±6．3；海马DG区：125．4±5．8）大鼠海马凋亡神经元数目比C组、D组、E组（分别为海马CAl区：40．2±3．1、38．7±2．4、36．8±2．6；海马DG区：62．4±4．2、59．8±3．7、68．1±2．8）显著增多，差异有统计学意义（海马CAl区：F：5．08，P〈0．05；海马DG区：F=6．52，P〈0．05）；（2）FJB染色：与A组及B组相比，C组、D组、E组、F组海马退变神经元数目显著增多，差异有统计学意义（海马CAl区：F=18．49，P〈0．05；海马DG区：F=11．37，P〈0．05）；F组大鼠海马轴突退变神经元数目比C组、D组、E组显著增多，差异有统计学意义（海马CAl区：F=7．83，P〈0．05；海马DG区：F=14．29，P〈0．05）。结论在同一低血糖水平且持续时间相同的情况下，大鼠脑损害程度与低血
褚秀丽赵玉武沈洁王喜云刘建芝米亚静金卫林
关键词：低血糖脑损伤海马
针对Nogo-66受体分子不同抗体的反应性比较被引量：2
2005年
　目的: 比较几种不同的针对Nogo -66受体的抗体的反应性。方法: 利用Westernblot技术, 用不同的NgR的抗体检测转染Flag -NgR或Flag- NgRH1 /H2的COS细胞, 以验证NgR抗体的反应性和特异性; 利用间接免疫荧光染色技术,检测不同的NgR的抗体对转染细胞以及颗粒神经元表达的NgR蛋白的反应性。结果: Westernblot结果显示, AB5615sc- 25659和NgRpAb都可特异识别NgR, 并且不和同源家族分子NgRH1 /H2产生交叉反应; 转染Flag -NgR细胞的免疫荧光双标结果显示 5种NgR的抗体均能与NgR产生特异反应, 其中仅Ngr11- A使核周NgR染色, 其余抗体可使胞膜和胞质均着色; CGN细胞荧光染色结果显示, 除Ngr11- A未观察到细胞染色外, 其余抗体均可使细胞的胞膜和突起特异着色, sc -16708和NgRpAb亦可使胞质着色。结论: 针对Nogo-66受体的这几种抗体都可以与NgR产生特异性反应; 不同NgR的抗体在Westernblot和免疫荧光染色上的表现模式存在一定的差异。
孙芳金卫林赵湘辉龙梅张萍鞠躬
关键词：抗体反应性
TAT-NEP1-40融合蛋白的表达、纯化及蛋白转导功能的鉴定被引量：3
2006年
为大量获得高纯度具有蛋白转导功能并可以穿过血脑屏障的融合蛋白TAT-NEP1-40,将构建好的表达载体pTAT-NEP1-40转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达后。将融合蛋白进行纯化和复性,鉴定蛋白转导功能。带有重组质粒pTAT-NEP40的大肠杆菌经IPTG诱导后,主要以包涵体形式表达,融合蛋白的分子量大小为14kD,其表达量占菌体总蛋白量的31.59%,纯化后目的蛋白纯度达95.6%,通过免疫组化染色显示融合蛋白可以穿过血脑屏障进入脑组织。上述结果表明利用pTAT-NEP1-40重组质粒,可以成功地表达TAT-NEP1-40;纯化后该蛋白具有穿过血脑屏障的功能,为NEP1-40功能的进一步研究提供了基础。
苟兴春金卫林李容鞠躬
关键词：NEP1-40蛋白转导包涵体
srGAP3在正常成年大鼠脑内的表达
2004年
目的　 探讨slit roboGTP激活蛋白 3(slit roboGTPactivatedprotein 3,srGAP3)在正常成年大鼠中枢神经系统中的分布。 方法　 应用免疫组织化学ABC法研究了srGAP3蛋白在正常成年大鼠脑内的分布和定位。 结果　srGAP3蛋白在正常成年大鼠脑中分布非常广泛 ,在脑内各主要结构如大脑皮质、海马、杏仁核、丘脑和下丘脑的部分核团、中脑、脑桥、小脑及延髓等均有表达。srGAP3免疫反应阳性物质位于神经元的细胞核周围。 结论　srGAP3蛋白在正常成年大鼠脑中有很广泛的表达 ,提示srGAP3蛋白在成年大鼠中枢神经系统的功能活动中可能也起重要作用。
姚琴王颖金卫林鞠躬
关键词：免疫组织化学抗体
Nogo-66受体分子在体外培养的星形胶质细胞中的表达
＜正＞目的:检测Nogo-66受体（NgR）在体外培养的大鼠星形胶质细胞中的表达。方法:利用RT-PCR、Western Blot和间接免疫荧光染色技术,检测原代培养并纯化的星形胶质细胞中NgR mRNA和蛋白分子的表达...
孙芳金卫林
关键词：星形胶质细胞体外
文献传递
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