金应霞
- 作品数：17 被引量：24H指数：3
- 供职机构：海南医学院附属医院更多>>
- 发文基金：海南省卫生厅科学研究课题国际科技合作与交流专项项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 三种不同饲养层上人胚胎干细胞生长状态的比较(英文)
- 2008年
- 背景：人胚胎干细胞传代培养的关键是抑制其自发分化、保证细胞的全能性。以小鼠胚胎成纤维细胞或人包皮成纤维细胞作为饲养层尽管能够维持胚胎干细胞的未分化状态，但存在细胞克隆不饱满、平铺情况明显等问题。目的：制备小鼠胚胎成纤维细胞与人包皮成纤维细胞的混合饲养层，观察人胚胎干细胞在其上面的生长状态。设计：多样本观察比较。单位：海南医学院附属医院生殖医学中心。材料：实验于2006—04／2007—07在海南医学院附属医院生殖医学中心完成。包皮来自于行包皮环切的儿童，由海南医学院附属医院泌尿外科提供，儿童家属对治疗及实验均签署知情同意书，实验经医院医学伦理委员会批准。人胚胎干细胞系HN—1由本实验室从人类囊胚中分离培养并鉴定。清洁级孕12．6-14．5d的胎鼠11只，实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。方法：胎鼠麻醉后去除头、四肢和内脏，按常规胰蛋白酶反复消化法获得细胞悬液进行接种培养，待生长汇合后冻存部分原代细胞，用丝裂霉素c处理2．0—3．0h后，按1 × 10^8 L^-1密度接种于明胶包被的中心皿内，UPd,鼠胚胎成纤维细胞饲养层。人包皮成纤维细胞的分离培养与饲养层制备同上。上述两种成纤维细胞分别计数后，按1：0，3：1，1：1，1：3，0：1比例混合，然后以1 × 10^8 L^-1密度接种于明胶包被的中心皿内，即混合饲养层。观察体外传代培养的人胚胎干细胞在3种不同饲养层上的生长状态，并对生长在混合饲养层上的人胚胎干细胞进行碱性磷酸酶检测、OCT-4表达免疫组化检测、OCT-4及端粒酶mRNA表达RT-PCR检测。撤除饲养层，观察人胚胎干细胞体外分化情况。主要观察指标：①不同饲养层上人胚胎干细胞的生长状态比较。②人胚胎干细胞在不同比例混合饲养层上的生长状态比较�
- 李斌彭秋平卢伟英徐雯金应霞黄元华
- 关键词：人胚胎干细胞成纤维细胞饲养层
- 小鼠胚胎及人包皮成纤维细胞按比例制成混合饲养层上的人胚胎干细胞生长状态被引量：4
- 2008年
- 目的:人胚胎干细胞传代培养的关键是抑制其自发分化、保证细胞的全能性。欲解决以小鼠胚胎成纤维细胞或人包皮成纤维细胞为常规饲养层培养人胚胎干细胞时存在的问题,观察两者按一定比例制成的混合饲养层上人胚胎干细胞的生长状态。方法:实验于2006-04/2007-07在海南医学院附属医院生殖医学中心完成。①对象:包皮来自于行包皮环切的儿童,由海南医学院附属医院泌尿外科提供,儿童家属对治疗及实验均签署知情同意书,实验经医院医学伦理委员会批准。人胚胎干细胞系HN-1由本实验室从人类囊胚中分离培养并鉴定。清洁级孕12.5～14.5d的胎鼠11只,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。②实验方法:将去除头、四肢和内脏的胎鼠按常规胰蛋白酶反复消化法获得细胞悬液进行接种培养,待生长汇合后冻存部分原代细胞,用丝裂霉素C处理2.0～3.0h后,按1×108L-1密度接种于明胶包被的中心皿内,即小鼠胚胎成纤维细胞饲养层。人包皮成纤维细胞的分离培养与饲养层制备同上。上述两种成纤维细胞分别计数后,按1:0,3:1,1:1,1:3,0:1比例混合,然后以1×108L-1密度接种于明胶包被的中心皿内,即混合饲养层。③实验评估:观察体外传代培养的人胚胎干细胞在3种不同饲养层上的生长状态。并对生长在混合饲养层上的人胚胎干细胞进行碱性磷酸酶检测、OCT-4表达免疫组化检测、OCT-4及端粒酶mRNA表达RT-PCR检测。撤除饲养层,观察人胚胎干细胞体外分化情况。结果:①不同饲养层上人胚胎干细胞的生长状态比较:生长在小鼠胚胎成纤维细胞和人包皮成纤维细胞上的人胚胎干细胞克隆扁平、不饱满,而生长在混合饲养层上的人胚胎干细胞克隆饱满、厚实,其克隆形态显著好于其他两种饲养层。②人胚胎干细胞在不同比例混合饲养层上的生长状态比较:小鼠胚胎成纤维细胞
- 李斌彭秋平卢伟英徐雯金应霞黄元华
- 关键词：人胚胎干细胞成纤维细胞饲养层
- 30例严重少精症、无精子症患者的遗传学分析被引量：2
- 2006年
- 目的探讨严重少精症和无精子症与遗传因素的关系。方法260例染色体G带分析;116例Y染色体AZF区18个微缺失位点进行多重PCR基因扩增检测分析。结果30例严重少精症和无精子症患者发现遗传异常,其中26例染色体异常,4例AZF基因有微缺失。结论严重少精症和无精子症与遗传密切相关,但严重少精症和无精子症的染色体分析与Y染色体AZF微缺失位点检测无相关性。
- 陈雪银李崎马燕琳金应霞麦扬青黎明红
- 关键词：严重少精症无精子症无精子因子Y染色体微缺失
- 2条染色体平衡易位2例报告
- 2004年
- 麦扬青黎明红金应霞
- 关键词：染色体平衡易位引产术胚胎停育头颅腭弓顺产
- 应用荧光标记引物进行DMD家系连锁分析
- 2015年
- 目的应用荧光引物建立进行性肌营养不良产前诊断连锁分析方法。方法应用不同荧光染料标记7对dystrophy基因内部的短串联重复序列5'-5n4、DXS206、5'-7n4、DXS1238、DXS1237、DXS1236和DXS1235,经PCR扩增后,采用ABI3500测序仪进行毛细管电泳,对5个Duchenne型肌营养不良症(DMD)家系进行连锁分析,进行胎儿产前诊断。结果 2个胎儿被检测出携带与先证者相同的X染色体遗传片段,其中1个SRY基因检测阳性,建议引产;1个SRY基因检测阴性,建议继续妊娠;另外3个胎儿未检测出与先证者携带相同的X染色体遗传片段,建议继续妊娠。结论该方法方法操作简便、敏感、准确,用于产前诊断和携带者检出,可在临床推广运用。
- 李崎周繇马宁陈雪银金应霞陈宏健马燕琳
- 关键词：进行性肌营养不良短串联重复序列荧光
- 孕妇血浆中胎儿DNA的SRY基因检测
- 应用 DNA-PCR 扩增技术,检测妊娠5～40周的正常孕妇游离在血浆内的无细胞胎儿 DNA 的 SRY 基因．90例孕妇血浆中游离 DNA 检则 SRY 基因阳性结果41例,其中早孕11例,中孕12例,晚孕18例．经绒...
- 陈雪银金应霞金松黄元华
- 文献传递
- 艾迪注射液联合化疗对中晚期NSCLC患者外周血肿瘤细胞CK19-mRNA表达的影响被引量：7
- 2009年
- 目的探讨艾迪注射液联合化疗对中晚期非小细胞肺癌(NSDLD)患者外周血肿瘤细胞细胞角蛋白(CK19)-mRNA表达的影响。方法将40例中晚期NSCLC患者随机分为两组,观察组22例用紫杉醇、顺铂化疗+艾迪注射液治疗,对照组18例用紫杉醇、顺铂化疗。用逆转录聚合酶链式反应技术检测两组化疗2周期后外周血肿瘤细胞CK19-mRNA相对表达量,并观察其疗效及生存期。结果两组治疗前后比较、观察组与对照组比较,CK19-mRNA相对表达量均有统计学差异(P均<0.05);观察组化疗有效率及生存率均优于对照组(P<0.05)。结论艾迪注射液可能通过下调NSDLD患者外周血肿瘤细胞CK19-mRNA表达量而起到化疗增效的作用。
- 曾江正苏群豪洪涛金应霞
- 关键词：艾迪注射液
- 637例遗传咨询患者的染色体核型分析被引量：1
- 2005年
- 目的分析海南省637例遗传咨询患者的染色体核型。方法对637例遗传咨询患者进行外周血淋巴细胞培养常规制备染色体进行核型分析,根据就诊原因进行分类,并分析染色体结构和数目异常。结果遗传咨询常见病因为习惯性流产、少精子、弱精子和无精子症、畸胎及死胎史、先天畸形、先天愚型、不孕症、原发或继发闭经史、性征异常等,前三者最为常见。637例中检测出41(6.44%)例染色体异常患者,先天愚型的染色体异常检出率高达75.00%。21-或18-三体综合征是染色体异常的主要方式(39.02%),染色体相互易位和9号染色体臂间倒位是染色体结构异常主要原因。结论在637例遗传咨询患者中,以先天愚型与原发及继发闭经患者中染色体异常的检出率为高。
- 金应霞黎明红麦扬青
- 关键词：染色体异常核型分析
- 胎儿遗传病实验诊断标本采集方法的对比分析被引量：1
- 2006年
- 目的探讨提高胎儿遗传病产前诊断准确性的不同标本采集方法。方法28例妊娠17～27周孕妇,在超声引导下单人徒手经母腹穿刺,同时取羊水、胎儿脐血行染色体、基因检查。结果羊水、胎儿脐血DNA进行短串联重复序列(STR)单体连锁分析5个位点排除母体细胞污染。羊水和脐血染色体、基因产前诊断结果一致性达100%。结论经母腹穿刺同时取羊水、胎儿脐血行胎儿遗传病产前诊断是减少误诊、漏诊、假阴性、假阳性的有效、可行的重要方法。
- 陈雪银金应霞李然花李崎黎明红黄元华
- 关键词：羊膜腔穿刺术脐带穿刺术产前诊断短串联重复序列
- 严重少精子症、无精子症15例的大Y遗传学分析被引量：4
- 2006年
- 目的:探讨大Y与严重少精子症和无精子症的遗传学关系。方法:回顾性分析有实施单精子卵胞浆内注射意向的严重少精子症和无精子症患者为研究对象。进行染色体G带与Y染色体AZF区18个微缺失位点分析。结果:严重少精子症和无精子症患者病例共260例,其中大Y 15例(5.8%),但大Y中未发现AZF微缺失。结论:严重少精子症和无精子症中有部分患者为大Y,但没有发现大Y与Y染色体AZF微缺失相关。
- 陈雪银金应霞李崎麦扬青黎明红
- 关键词：少精液症Y染色体染色体缺失
