陆阳清
- 作品数：173 被引量：241H指数：9
- 供职机构：广西大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 乙二胺四乙酸钠、能量基质、氨基酸对猪卵母细胞体外成熟和早期孤雌发育的影响被引量：2
- 2007年
- 猪的卵巢卵母细胞在含不同剂量葡萄糖+丙酮酸钠的成熟培养基中体外成熟培养44-48 h,检查核成熟率(试验一),进行化学法孤雌激活后,在含不同浓度的乙二胺四乙酸钠(EDTA-Na)和不同剂量的葡萄糖+谷氨酰胺+牛磺酸+亚牛磺酸的培养基中进行体外培养,检查孤雌激活胚第48小时的卵裂率和第168小时的囊胚发育率(试验二),研究成熟培养基中葡萄糖+丙酮酸钠剂量对卵母细胞体外成熟核成熟率的影响及培养基中不同浓度EDTA-Na和葡萄糖+谷氨酰胺+牛磺酸+亚牛磺酸的剂量对孤雌激活胚胎体外发育的影响.结果表明:(1)葡萄糖+丙酮酸钠在1倍剂量时,猪卵母细胞体外成熟的核成熟率为(59.3±5.0)%;当剂量加倍时,核成熟率极显著下降(P<0.01),为(51.0±4.4)%.(2)当EDTA-Na浓度增高,囊胚发育率上升,当浓度达50μmol.L-1时囊胚发育率最高,为(7.2±4.1)%,此后随浓度升高囊胚发育率下降;添加适当浓度(25-100μmol.L-1)EDTA-Na对猪孤雌激活胚的囊胚发育有利(P<0.05),当浓度达200μmol.L-1时其有利作用消失.(3)培养基中葡萄糖+谷氨酰胺+牛磺酸+亚牛磺酸的剂量过高对卵裂率无显著影响(P>0.05),但对囊胚发育不利(P<0.05).可见:(1)适当浓度(25-100μmol.L-1)EDTA-Na对猪早期胚胎体外发育具有促进作用;(2)成熟培养基中能量基质剂量过高会抑制猪卵母细胞体外成熟;(3)胚胎培养基中葡萄糖+谷氨酰胺+牛磺酸+亚牛磺酸的剂量过高会抑制猪早期胚胎的体外发育.
- 卢晟盛魏凤房慧伶陆阳清卢克焕
- 关键词：氨基酸卵母细胞孤雌激活
- 水牛GDNF基因真核载体的构建及其在真核细胞中的表达
- 引言/目的胶质细胞源性神经营养因子(glialcellline-derived neurotrophic factor,GDNF)是1993年Lin等从小鼠脑组织中克隆的一种神经营养因子,具有多种生理功能,其对神经系统、...
- 谢龙耿双双李婷婷罗奥林李孟琪杨欢杨小淦许惠艳陆阳清卢晟盛卢克焕
- 胆固醇通过Sonic Hedgehog信号通路促进鸡原始生殖细胞增殖
- 引言/目的原始生殖细胞(Primordial Germ Cells)作为精子和卵子的祖细胞,是遗传信息从上一代传递到下一代的重要载体。家禽原始生殖细胞在从早期胚胎分离的过程中,数量少,难以在体外增殖,其中涉及的细胞信号调...
- 陈东阳谢龙杨蒙蒙陆振萍许惠艳杨小淦张明卢盛晟卢克焕陆阳清
- 转基因诱导永生化鸡细胞系的建立
- 2019年
- 传统上从鸡胚中分离病毒用于疫苗的生产常常不能满足需求,研究从体外培养的细胞中分离病毒的途径成为当前疫苗生产领域的迫切需要。本研究利用体细胞诱导重编程技术建立永生化细胞系,为应用于疫苗制备等研究和生产奠定基础。通过慢病毒载体转染转录调控因子(NANOG, LIN28和C-MYC)重编程鸡成纤维细胞,并稳定培养至100代,获得永生化的细胞,而后逐步去除细胞因子、血清等添加物,优化细胞系培养体系,并对细胞驯化实现悬浮生长,以获得单位体积最大密度的细胞。研究结果表明:通过转基因将NANOG,LIN28和C-MYC 3个因子整合入细胞中表达,细胞系对碱性磷酸酶染色呈阳性反应,端粒逆转录酶(cTERT)基因在细胞系中显著上调,并稳定培养至100代,使得这些细胞具有自我更新特性和永生化的潜能。确定了培养基中的血清替代物KSR浓度为20%,并撤除了培养基中bFGF等生长因子,为细胞大规模培养应用提供了可能。永生细胞实现悬浮生长,细胞生长倍增时间为21.71 h,最大密度为1.3×106 cells/m L。因此,我们通过重编程技术建立了一株稳定的永生化细胞系,并且使它能在低浓度KSR中悬浮培养,这为疫苗制备等研究和生产提供科学依据。
- 朱姿英卢克焕SteveLStice陆阳清
- 关键词：无血清培养慢病毒转染
- 水牛输卵管上皮细胞无血清培养的研究
- 2008年
- 以广西沼泽型水牛(Bubalus bubalis)输卵管为材料,比较研究不同取材方法、有无血清及生长因子对水牛输卵管上皮细胞培养的影响。试验采用了三种不同的取材方法。原代用含血清的培养液来培养,传代用添加生长因子的无血清复杂培养液和不添加生长因子的无血清基础培养液结合梯度减量无血清培养法和直接无血清培养法来培养并进行观察。结果表明,水牛输卵管上皮细胞可以在添加生长因子的无血清复杂培养液中生长、并且最长可维持56 d优于基础无血清培养的15 d;刮取法获得的细胞活率为95%优于消化法的70%和剪碎法的83%;细胞冷冻复苏率为83.6%;第5代的染色体数目为48条,这说明细胞依然保持正常的生物学特性和二倍体核型。
- 庄新杰戢开丽孙雷段亚苹陆阳清张明卢克焕
- 关键词：水牛输卵管上皮细胞无血清培养核型
- 水牛GDNF基因真核载体的构建及其在真核细胞中的表达
- ＜正＞引言/目的胶质细胞源性神经营养因子（glialcellline-derived neurotrophic factor,GDNF）是1993年Lin等从小鼠脑组织中克隆的一种神经营养因子,具有多种生理功能,其对神经...
- 谢龙耿双双李婷婷罗奥林李孟琪杨欢杨小淦许惠艳陆阳清卢晟盛卢克焕
- Scriptaid在猪体细胞核移植应用的研究进展被引量：2
- 2016年
- 体细胞核移植(somatic cell nuclear transfer,SCNT)效率低下严重制约了克隆猪的产出,而在SCNT胚胎中表现出的表观遗传重编程(epigenetic reprogramming)不完全是导致该结果的重要原因。大量的研究表明组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor,HDACi),如Scriptaid(SCR),能够修复克隆胚胎的表观遗传重编程状态,包括提高供体核组蛋白的乙酰化水平、促进重要转录因子的转录活性以及增强染色质重塑等,从而促进SCNT胚胎的发育。本综述在参阅国内外研究成果的基础上对SCR在猪克隆中的应用进行分析和论述,以期为进一步在克隆猪的生产实践中加以应用奠定基础。
- 聂骏宇朱向星谢炳坤马青艳农素群许惠艳杨小淦陆阳清卢克焕廖玉英卢晟盛
- 关键词：SCNT重编程组蛋白乙酰化
- 猪胎儿肾脏成纤维细胞体外培养体系的建立被引量：13
- 2007年
- 本研究旨在建立猪胎儿肾脏成纤维细胞体外培养体系,并探讨其作为猪体细胞克隆供体的可能性。使用组织块培养法从体长为10cm以上的猪胎儿分离得到猪胎儿肾脏成纤维细胞,绘制了生长曲线,鉴定了细胞类型并且进行了细胞周期同期化效果的研究。结果表明:该培养体系可以支持猪胎儿肾脏成纤维细胞的体外生长,单个细胞均为梭形细胞,抗波形蛋白免疫荧光染色显示为阳性,而抗角形蛋白免疫荧光染色为阴性,分离到的细胞为胎儿肾脏成纤维细胞。使用血清饥饿法和接触抑制法诱导细胞进入G0/G1期,并且分别比较两者同期化效率,结果显示:血清饥饿2d和4d的同期化效率差异不显著,但都比8d组的高(88.97%和87.69%比82.45%,P<0.05);接触抑制4d、6d组间同期化效率差异不显著,但都比0d组的高(85.56%和85.89%比81.82%,P<0.05)。本研究在国内首次分离得到猪胎儿肾脏成纤维细胞,已经在体外传代培养到32代,其同期化效果好,可以作为体细胞克隆供体。
- 卢晟盛刘红波吕培茹陆阳清杨小淦皮道元卢克焕
- 关键词：组织块培养间接免疫荧光流式细胞仪
- 胆固醇通过Sonic Hedgehog信号通路促进鸡原始生殖细胞增殖
- ＜正＞引言/目的原始生殖细胞（Primordial Germ Cells）作为精子和卵子的祖细胞,是遗传信息从上一代传递到下一代的重要载体。家禽原始生殖细胞在从早期胚胎分离的过程中,数量少,难以在体外增殖,其中涉及的细胞...
- 陈东阳谢龙杨蒙蒙陆振萍许惠艳杨小淦张明卢盛晟卢克焕陆阳清
- 水牛胚胎性别鉴定的PCR方法被引量：4
- 2008年
- 根据荷斯坦牛SRY基因设计1对引物扩增得到水牛SRY基因的全长序列2005 bp,对该片段测序后,设计2对特异于水牛SRY基因核心区的引物用于早期胚胎性别鉴定,同时根据水牛G3PDH基因设计2对引物作为内对照共同扩增,建立了多重巢式PCR体系并进行优化,使用优化后的PCR体系对取样后的27枚IVF胚胎和24枚Y精子受精胚胎进行检测,并使用斑点杂交检测扩增准确率。结果表明,27枚IVF胚胎均能有效扩增,雄性、雌性比例分别为51.9%(14/27)、48.1%(13/27),斑点杂交表明扩增准确率为100%;24枚Y精子受精胚胎的雄性比例为83.3%(20/24)。该巢式多重PCR方法具有很高灵敏度和稳定性,能够在实际生产中应用。
- 付强张明郑海英秦文松陆阳清卢晟盛卢克焕
- 关键词：SRY基因胚胎PCR性别鉴定
