陈保立
- 作品数：19 被引量：89H指数：7
- 供职机构：山东省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金山东省医药卫生科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 霍乱弧菌甘露醇-1-磷酸脱氢酶基因mtlD的克隆表达
- 2014年
- 目的克隆表达霍乱弧菌甘露醇特异性磷酸烯醇式丙酮酸依赖的磷酸转移酶系统操纵子中的甘露醇-1-磷酸脱氢酶基因mtlD。方法以测序株N16961染色体为模板,聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增mtlD基因,扩增产物经NdeⅠ和XhoⅠ酶切后克隆入表达载体pET-30a。0.1 mmol/L IPTG诱导表达,超声裂解上清经Ni柱亲和层析纯化,比色法测定酶活性。结果 mtlD基因成功克隆入表达载体pET-30a,在宿主菌BL21中诱导表达,利用Ni亲和层析柱获得较高纯度的羧基端带His标签的MtlD蛋白,并具有酶活性。结论表达纯化了有活性的霍乱弧菌甘露醇-1-磷酸脱氢酶,为进一步的功能研究打下了基础。
- 梁未丽陈保立赵萌周妍妍阚飙
- 关键词：霍乱弧菌
- 我国医院中社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌流行情况的Meta分析被引量：10
- 2016年
- 目的 通过Meta分析了解我国医院发现的社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（CA-MRSA）的分子生物学特征和流行病学现状。方法 系统检索2015年12月3日前收录于中国知网（CNKI）、万方数据库、PubMed和Web of Science核心合集的期刊或学位论文,遵照PRISMA规范进行Meta分析,利用Stata 13.0软件对医院发现的CA-MRSA检出率、杀白细胞素基因（PVL）基因携带率等数据进行合并,对医院和社区的CA-MRSA检出率进行比较。结果 医院患者中检出的CA-MRSA占金黄色葡萄球菌的12%（95% CI：8%～16%）;占MRSA的18%（95% CI：12%～24%）;CA-MRSA中PVL携带率约为42.1%（95% CI：20.4%～63.7%）,高于一般的MRSA（t=-2.99,P=0.011）。结论 我国医院中CA-MRSA检出率较低,但PVL基因携带率高。需采取有效监测和预防措施,以达到控制CA-MRSA在人群中传播的目的。
- 朱怡青陈保立毕振旺寇增强胡彬房明毕振强
- 关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌社区获得性感染医院感染杀白细胞毒素耐药性
- 山东省某地产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药情况及多位点序列分型被引量：8
- 2019年
- 目的分析山东省某生猪养殖县农村居民粪便中分离的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌耐药情况和多位点序列分型。方法采用琼脂稀释法对2016年7月收集的山东省某生猪养殖县农村居民新鲜粪便中分离的360株产ESBLs大肠埃希菌进行药物敏感性试验;对CTX-M、TEM、SHV等β-内酰胺酶基因进行PCR扩增,采用毛细管电泳筛选阳性菌株;采用多位点序列分型(MLST)方法进行分子分型,采用eBURST v3.0软件进行聚类分析。结果360株产ESBLs大肠埃希菌对头孢噻肟、四环素、复方新诺明及氟苯尼考的耐药率较高,分别为100.0%(360/360)、82.2%(296/360)、81.1%(292/360)、80.3%(289/360)。CTX-M基因检出率为99.2%(357/360),以CTX-M-9组、CTX-M-1组为主,分别占35.6%(128/360)和24.4%(88/360);TEM基因检出率为26.9%(97/360)。MLST共得到132个ST型别,相对优势ST型为ST10,占12.5%(45/360);聚类分析显示CC10为最主要的克隆群,包括39个ST型,占41.1%(148/360)。结论该农村地区产ESBLs大肠埃希菌对头孢噻肟、四环素、复方新诺明、氟苯尼考的耐药情况较严重,存在以CC10为主的小范围聚集性,可能存在动物与人类之间的传播。
- 滕艾颖徐留臣杨鹏孙成云陈保立王爽寇增强房明王苗苗毕振强
- 关键词：大肠埃希菌超广谱Β-内酰胺酶多位点序列分型
- 重组人骨形态发生蛋白-7工程菌的高密度培养
- ＜正＞目的:骨形态发生蛋白-7（bone morphorgenetic protein,BMP-7）具有重要的成骨作用并且已用于临床治疗长骨骨不连,但目前国内外重组人BMP-7的生产多见于哺乳动物细胞及昆虫细胞,虽活性较...
- 陈保立葛鲁娜王世立韩金祥
- 关键词：骨形态发生蛋白-7ELISA
- 文献传递
- 山东省某地健康人群MCR-1阳性大肠埃希菌和阴性大肠埃希菌耐药性比较研究
- 2021年
- 目的对携带多粘菌素耐药基因(mcr-1)大肠埃希菌和未携带mcr-1大肠埃希菌耐药情况进行比较,为进一步探索携带mcr-1对耐药性的影响提供线索。方法对2017年山东省某地健康居民中收集的粪便样本分离到的156株mcr-1阳性大肠埃希菌和184株mcr-1阴性大肠埃希菌,通过PCR检测mcr-1,采用琼脂稀释法对菌株进行12种抗菌药物敏感性实验。结果 mcr-1阳性大肠埃希菌对多粘菌素均耐药,耐药率为100.00%,mcr-1阴性大肠埃希菌对多粘菌素均敏感;mcr-1阳性大肠埃希菌耐药率均高于阴性菌,其中对多西环素、复方新诺明、氨苄西林的耐药率为88.46%、78.85%、68.59%,明显高于mcr-1阴性菌的52.17%、34.24%、47.28%;mcr-1阳性大肠埃希菌中多重耐药菌所占比例为87.18%,高于阴性菌的48.37%,(P<0.05);mcr-1阳性大肠埃希菌对每种抗菌药物MIC值的几何均数均高于阴性菌(P<0.05);所有阳性菌和阴性菌对美罗培南均敏感。结论 mcr-1阳性菌的耐药情况比阴性菌严重;携带mcr-1与多粘菌素耐药密切相关,且mcr-1可能合并其他耐药基因,增强细菌的耐药性。
- 李倩楠李岩王爽陈保立毕振旺胡军胡军
- 关键词：细菌耐药
- 2016年山东省一起活羊交易市场导致的人间布鲁氏菌病暴发疫情调查被引量：5
- 2017年
- 目的了解2016年山东省菏泽市牡丹区人间布鲁氏菌病(布病)发病数异常升高的原因、感染来源、危险因素,及时采取针对性控制措施。方法通过对医院、重点村庄进行主动搜索,检索医疗机构上报的传染病报告信息管理系统等方式获得该区的人间布病病例,采取重点村庄现场查看,当面访谈或电话调查的方式开展病例个案调查,同时完成病例标本实验室检测。结果 2016年共搜索到170例人间布病病例,58.24%(99/170)的病例集中发生在10 12月。76.47%(130/170)的病例居住在回民聚居地A镇Ⅰ村和B镇Ⅱ村。Ⅰ村和Ⅱ村之间有一个日交易量约1 000只的活羊交易市场,80.00%的羊购自布病高发省份。9月宰牲节期间,两村村民购买的羊数量为平时2倍,其间参与家庭内羊肉处理过程者罹患率和未参与者的罹患率分别是34.82%(122/3 504)和0.02%(1/3 608),差异有统计学意义(χ~2=124.782,P=0.001)。14岁以上村民中,从事与羊接触工作(贩卖、屠宰、皮毛加工、养殖)的村民布病患病率为17.28%(108/625),未从事接触羊工作的14岁以上村民患病率为0.30%(15/5 065)(RR=58.349,95%CI:34.220~99.492)。从事活羊贩卖、屠宰活动、皮毛加工和羊养殖的布病发病风险RR值(95%CI)分别为84.417(45.925~155.172)、80.604(45.209~143.713)、43.414(23.450~80.374)和40.098(20.757~77.459)。在接触羊时,5.13%(8/156)的病例戴口罩,21.15%(33/156)戴毛线手套。结论本次事件可能为一起因活羊交易市场输入染疫羊而接触者缺乏有效防护而引起的人间布病疫情。建议多省份和多部门联防联控,保证羊的输出、输入和交易均在动物卫生检疫指导下进行。此外,需要加强布病防治知识的宣传教育。
- 李旦寇增强陈秋兰崔步云张丽杰冯自河彭孝旺赖圣杰李俊梅朱银田杨传欣刘兆山黄伟陈保立刘维量郑建东殷文武冯录召毕振旺
- 关键词：布鲁氏菌病
- 重组大肠杆菌高密度培养的研究进展被引量：3
- 2009年
- 重组大肠杆菌实现高细胞密度培养(HCDC),可相应地缩小生物反应器的体积和降低生物量的分离费用,从而降低生产成本,达到提高生产效率的目的。本文就影响重组大肠杆菌高密度培养的因素及解决方法、几种应用较广泛的高密度培养技术以及基因工程技术在重组大肠杆菌高密度培养中的应用作一综述。
- 陈保立王世立韩金祥
- 关键词：大肠杆菌基因工程技术
- 山东省2013年致猩红热及无症状携带者A群链球菌分子分型研究被引量：9
- 2014年
- 目的 描述2013年山东省致猩红热及无症状携带者A群链球菌（GAS）分子分型特征,探讨各分型方法与emm型别的关联.方法 自猩红热、无症状携带者咽拭分离获得GAS72株,利用emm、多位点序列分型（MLST）、超抗原（SAg）基因（speA、speC、speG、speH、speI、speJ、smeZ、ssa、speK、speM、speL）检测和脉冲场凝胶电泳（PFGE）对其进行分型检测.结果 72株GAS中,以emm1型（41.67％）和emm12型（56.94％）为主;共检出两种ST型别,其中ST28型31株（43.06％）,ST36型41株（56.94％）;ST28型与emm1相关（P＜0.05）,而ST36型与emm12相关（P＜0.05）;speA、speC、speG、speH、speI、speJ、smeZ、ssa的检出率分别为38.89％、95.83％、97.22％、38.89％、54.17％、41.67％、100.00％、100.00％,speK、speM、speL未检出;emm1型菌株倾向于含有speA、speJ,不含有speH、speI（P＜0.05）;emm12恰好相反,倾向于含有speH、speI,不含有speA、speJ（P＜0.05）;PFGE共检出20种型别.结论 2013年山东省致猩红热和无症状携带者中GAS型别分布较为单一,emm型别以emm1和emm12为主;ST型别主要为ST28和ST36,超抗原基因携带以speC、speG、smeZ、ssa为主.各分型方法间存在一定关联.
- 刘贞艳房明胡彬毕振旺寇增强任艳艳陈保立毕振强
- 关键词：猩红热分子分型
- 霍乱弧菌中环腺苷酸受体蛋白对高丝氨酸脱氢酶基因的调控作用
- 2014年
- 目的:研究霍乱弧菌中环腺苷酸受体蛋白(CRP)对高丝氨酸脱氢酶(HDH)是否具有调控作用。方法:通过搭桥PCR将HDH基因启动子中CRP潜在结合位点替换为CRP保守结合位点,分别将替换前后的启动子序列导入报告质粒,转化霍乱弧菌野生株C7258及CRP缺失株WL7258,比较荧光值的差异。结果:改造前报告质粒在野生株中的荧光值高于CRP缺失株,改造后报告质粒的荧光值在2株菌中均有升高,但在野生株中升高更明显。结论:CRP调控HDH的转录,但不是惟一调控因素。
- 蔡红艳陈保立梁未丽王多春李杰段国贤阚飙
- 关键词：天冬氨酸霍乱弧菌
- 山东省动物粪便中非O157产志贺毒素大肠埃希菌菌株特征及耐药性分析被引量：10
- 2018年
- 目的分析山东省动物粪便中非0157产志贺毒素大肠埃希菌（STEC）的菌株特征及耐药状况。方法于2015--2016年，采用方便抽样方法在山东省微山县、莱州市共采集1022份新鲜动物粪便标本，共分离到24株非0157STEC。通过血清凝集实验进行血清分型，采用微量肉汤稀释法进行药物敏感性试验，后采用双纸片协同试验进行超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）检测。采用PCR方法检测耐药基因。采用PFGE进行分子分型并采用多位点序列分型（MLST）确定等位基因谱及菌株序列型。使用CLC Sequence Viewer及Conting Express生物信息软件分析不同sT序列群及菌株问的进化关系。结果24株非0157型STEC菌株中23株来自猪粪，1株来自牛粪；毒力基因均为stx2型；对磺胺异噁唑耐药的菌株较多，为22株，对复方磺胺异噁唑和萘啶酸耐药的菌株均为18株，对氯霉素耐药菌株为13株，对四环素耐药菌株为19株。存在多重耐药现象，耐药谱为：磺胺异嗯唑．四环素一复方磺胺异嗯唑．萘啶酸一氯霉素，对头孢吡肟和亚胺培南均为敏感。ESBLs确证实验表明，有4株非0157型STEC产ESBLs。PCR检测7种耐药基因，4种四环素类耐药基因（tetA、tetB、tetC、tetD）均有检出，ESBLs类耐药基因（blaSHV-1、blaCTX-M、bla TEM）均为阴性。24株菌分成15个PFGE型别，其聚类结果比较分散，无优势PFGE型别。MLST型别有11种，其中ST540、ST5133型别的菌株最多，各为4株菌，聚类为1个MLST基因组。结论山东省部分地区在动物粪便中检出的非0157STEC血清型比较分散，对常见的抗生素耐药率比较高，具有明显的分子多态性，应重点加强对这类菌株的监测和管理。
- 胡彬寇增强邵纯纯尹海英刘宗东徐雪华房明陈保立魏昌印李贵锋毕振旺
- 关键词：产志贺毒素大肠杆菌脉冲场耐药监测
