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农杆菌介导的转化芦荟的研究(英文)被引量：2: 2007年; 芦荟(Aloe)是美容和医疗保健工业的重要植物资源,然而基因工程途径改良芦荟鲜有报道。本实验研究了次氯酸钠、升汞不同浓度和时间对芦荟外植体的灭菌效果,比较了芦荟不同部位(叶片、叶鞘和茎段)的再生能力,利用GUS基因瞬间表达技术(X-Gluc染色)探讨了不同农杆菌对不同芦荟外植体的侵染效果,确定了G418筛选剂在芦荟转化后的最适筛选浓度,摸索了适宜于农杆菌—芦荟共培养用培养基组成和共培养条件,通过转化、筛选和移栽共获得了67棵抗性再生植株,进一步对抗性再生植株进行了PCR、Southern blotting和ELISA检测。结果表明,芦荟外植体灭菌方法为20.0%次氯酸钠溶液浸泡25min,效果优于利用0.1%升汞灭菌处理,茎部切段的再生能力高于叶片切段和叶鞘切段,适宜的共培养条件为芦荟外植体浸泡在含有农杆菌的液体共培养基中半小时后,在无菌滤纸上、24℃、10h光照共培养3天;EHA105农杆菌菌系对芦荟茎部细胞的侵染能力明显强于C58C1,EHA105侵染后GUS基因瞬时表达率达到了80.0%左右,而C58C1侵染后GUS基因瞬时表达率只有30.0%左右。G418用于筛选抗性再生芽和抗性植株的适宜浓度为10.0～25.0mg/L。PCR和Southern blotting检测证实外源基因已成功整合到芦荟基因组中,转化效率为0.9%,单拷贝整合占80.0%,2～3拷贝整合占20.0%,ELISA检测证明外源基因已在转基因芦荟中稳定表达。综上所述,初步建立了农杆菌介导转化芦荟的技术体系,为利用基因工程途径改良芦荟奠定了基础。; 何聪芬张佳星陈杰叶兴国杜丽璞董银卯赵华; 关键词：芦荟农杆菌分子检测 ELISA检测

一种培育转基因芦荟的方法: 本发明公开了一种培育转基因芦荟的方法。该方法包括以下步骤：1)以经消毒灭菌的茎段为外植体，将其切成小块后，在23－27℃下，用经芦荟农杆菌共培养用液体培养基悬浮制成的携带有目的基因的农杆菌的菌液浸泡20－40min进行侵...; 何聪芬叶兴国董银卯张佳星陈杰王艳丽徐惠君杜丽璞赵华兰社益; 文献传递

基因枪介导转化芦荟获得转基因植株的研究被引量：3: 2005年; 由于芦荟具有医疗、美容、保健、食用等多种功能,近年来成为研究热点.海藻糖对生物体及生物分子具有良好的非特异性保护作用,并已在食品、化妆品、分子生物学领域得到了广泛应用.将海藻糖合成酶基因转入芦荟,对于改良芦荟的商业价值有重要意义.目前为止,关于芦荟转化还没有报道.本实验将含有海藻糖合成酶otsA基因的pBI-otsA质粒与含有bar基因的pAHC25质粒混合包埋金粉子弹,利用基因枪介导的共转化法轰击预培养4～5 d的芦荟茎部外植体,经在含1.0～2.0 mg/ L glufosinate筛选剂的改良MS培养基上多次筛选和分化,获得了一定数量的抗性再生芽,对移栽成活的抗性再生植株进行了PCR检测.结果表明,otsA基因、nptII基因、bar基因已经整合到芦荟基因组中,首次获得了芦荟转基因植株.; 陈杰叶兴国何聪芬杜丽璞董银卯; 关键词：芦荟基因枪海藻糖合成酶基因 PCR检测

农杆菌介导法将海藻糖合成酶基因转入芦荟的研究被引量：6: 2007年; 采用农杆菌介导法将海藻糖合成酶基因otsA导入芦荟,共培养后的芦荟外植体在含10-15 mg·L^-1G418筛选剂的MS培养基上经多次筛选和分化,获得了一定数量的抗性再生芽,对移栽成活的抗性再生植株进行PCR检测,表明otsA基因已经导入芦荟基因组中,转化率约为0.77%。Southern检测表明,目的基因在60%的阳性植株基因组中表现为单拷贝整合,进一步证明otsA基因已经整合到芦荟基因组中。气相色谱法测定转基因植株的海藻糖含量表明,转基因植株中的海藻糖含量为未转化植株的2.934倍,证明otsA基因在转基因芦荟植株中已得到表达。; 陈杰张佳星叶兴国何聪芬董银卯赵华秦允荣; 关键词：芦荟农杆菌海藻糖合成酶基因

基因枪介导转化芦荟获得转基因植株的研究: 由于芦荟具有医疗、美容、保健、食用等多种功能,近年来成为研究热点.海藻糖对生物体及生物分子具有良好的非特异性保护作用,并已在食品、化妆品、分子生物学领域得到了广泛应用.将海藻糖合成酶基因转入芦荟,对于改良芦荟的商业价值有...; 陈杰叶兴国何聪芬杜丽璞董银卯; 关键词：芦荟基因枪海藻糖合成酶基因 PCR检测转基因植株; 文献传递

基因枪介导转化芦荟获得转基因植株的研究: 由于芦荟具有医疗、美容、保健、食用等多种功能,近年来成为研究热点。海藻糖对生物体及生物分子具有良好的非特异性保护作用。并已在食品、化妆品、分子生物学领域得到了广泛应用。将海藻糖合成酶基因转入芦荟,对于改良芦荟的商业价值有...; 陈杰叶兴国何聪芬杜丽璞董银卯; 关键词：芦荟基因枪海藻糖合成酶基因; 文献传递

海藻糖及其在生物工程方面的应用被引量：9: 2005年; 自海藻糖发现以来对其化学性质、生理功能、作用机理、代谢途径等已进行了较为深入的研究,其分子生物学的研究也渐渐兴起。研究表明海藻糖能提高生物体对干旱、低温、高温、pH、盐渍等逆境条件下的抗性。离体试验表明海藻糖能保护生物膜、蛋白质的结构并能保持逆境下的酶活性,同时,外源海藻糖同样对生物体有保护作用。由于海藻糖具有这些独特的生物学功能,它已在许多方面得以应用,可作为食品工业的一种添加剂和甜味剂,使干燥食品在得水后保持原有的色、香、味;也可作为医药工业的非特异性生物制品和生化药品保护剂,使其在常温下保存,从而降低运输与储存费用;另外,在农业研究中可利用现代分子生物技术培育表达海藻糖的转基因作物,提高农作物的抗旱、抗冻等抗逆性能。; 陈杰何聪芬叶兴国董银卯; 关键词：海藻糖抗逆生物学功能转基因

一种培育转基因芦荟的方法: 本发明公开了一种培育转基因芦荟的方法。该方法包括以下步骤：1)以经消毒灭菌的茎段为外植体，将其切成小块后，在23-27℃下，用经芦荟农杆菌共培养用液体培养基悬浮制成的携带有目的基因的农杆菌的菌液浸泡20-40min进行侵...; 何聪芬叶兴国董银卯张佳星陈杰王艳丽徐惠君杜丽璞赵华兰社益; 文献传递

生物技术在化妆品研究开发中的应用: 本文综述了生物技术在化妆品研究开发中的应用,其中包括组织培养技术和一些新原料在化妆品中的应用。; 陈杰; 关键词：生物技术化妆品; 文献传递

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