霍锐
- 作品数：17 被引量：48H指数：4
- 供职机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技厅科研基金国家中医药管理局新药开发专项基金项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 结肠癌细胞总RNA负载成熟树突细胞体外诱导抗肿瘤作用被引量：1
- 2012年
- 目的应用结肠癌细胞株SW480总RNA负载成熟树突细胞(mature dendritic cell,mDC),观察其体外诱导抗肿瘤效应。方法 GM-CSF、IL-4、TNF-α体外培养获得mDC并鉴定,电穿孔法将SW480细胞总RNA转染入mDC。流式细胞术及免疫细胞染色法检测转染后癌胚抗原(CEA)蛋白在mDC内的表达。LDH法检测负载总RNA的mDC体外诱导的特异性抗肿瘤作用。结果显微镜下观察体外培养获得的树突细胞(DC)有特征性毛刺状突起,CD83表达阳性。转染后的mDC内CEA蛋白表达阳性。特异性细胞毒实验表明,转染SW480总RNA的DC能够产生CEA特异性和肿瘤特异性的细胞毒T淋巴细胞(CTL)反应;且与转染CEA mRNA的DC相比,其能诱导出针对更多未知肿瘤抗原的抗肿瘤效应。结论负载结肠癌细胞总RNA的mDC体外能产生特异性抗肿瘤作用,为结肠癌的免疫治疗提供了理论依据。
- 杨蕾赵建军霍锐姜洋
- 关键词：结肠癌肿瘤免疫治疗
- 量子点与人源抗谷胱甘肽单链抗体的连接与表征被引量：2
- 2009年
- 用已构建的表达载体pPELB-B3,在大肠杆菌Rosetta中可溶性表达人源抗谷胱甘肽(GSH)单链抗体B3(scFv-B3),经N i2+螯合亲和层析纯化后,用点印迹法验证了其与GSH结合的特异性.将水相合成的半导体纳米粒子(半导体量子点,QD s)在N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC)的作用下,与scFvs连接.光谱分析和膜印迹结果表明,scFvs成功地共价连接到QD s表面,所得的QD-scFvs复合物能够较好地识别GSH.荧光显微镜观察QD-scFvs与人乳腺癌细胞MCF-7的作用结果,初步判断QD-scFvs能够跨膜进入细胞.
- 徐俊杰王诗雯赵虹陈桂秋霍锐田莉段玉晶李敏杰杨柏魏景艳
- 关键词：量子点人源单链抗体共价结合
- Se-scFv-B3对过氧化氢诱导的大鼠乳鼠心肌细胞损伤的保护作用被引量：3
- 2010年
- 用H2O2损伤大鼠乳鼠的心肌细胞建立氧化应激损伤模型,考察谷胱甘肽过氧化物酶模拟物Se-scFv-B3对H2O2诱导的大鼠乳鼠心肌细胞氧化损伤的影响.结果表明,Se-scFv-B3能部分增加心肌细胞存活率,减少细胞凋亡,恢复线粒体膜电位,下调Caspase-3活力并降低细胞内活性氧的含量.表明Se-scFv-B3可以保护心肌细胞抵制H2O2诱导的氧化应激损伤.
- 苏家明魏景艳宋宇杨蕾霍锐
- 关键词：氧化应激凋亡心肌细胞过氧化氢
- 可溶性人源含硒单链抗体酶的制备方法
- 本发明的可溶性人源含硒单链抗体酶的制备方法属于生物技术领域。以谷胱甘肽衍生物为靶抗原，通过免疫亲和筛选法对重组噬菌体展示人单链抗体库进行筛选，得到单链抗体B3和D8。将单链抗体基因组装到分泌型原核或真核表达载体上，转化大...
- 魏景艳徐俊杰霍锐李杰帅刘慧娟罗际巡罗贵民阎岗林李唯
- 文献传递
- 薯蓣苷元诱导人黑素瘤细胞A375-S2凋亡依赖半胱天冬酶和MAPK途径被引量：12
- 2003年
- 目的 研究薯蓣苷元诱导人黑素瘤细胞A375 S2凋亡的机制。方法 MTT法测定细胞生长抑制率及半胱天冬酶和有丝分裂原活化的蛋白激酶(MAPK)抑制剂对薯蓣苷元诱导细胞凋亡的影响。电镜观察细胞形态变化。流式细胞仪检测细胞凋亡及周期分布。用半胱天冬酶活力检测试剂盒测定半胱天冬酶活力。结果 薯蓣苷元抑制A375 S2细胞的生长呈时间 剂量依赖性。经薯蓣苷元处理后的A375 S2细胞表现出典型的凋亡特征 :细胞表面微绒毛消失、胞质空泡化、染色质浓集、边聚。流式细胞仪检测表明薯蓣苷元导致DNA片段化和细胞周期阻滞在G0 /G1期。半胱天冬酶家族抑制剂 (z VAD fmk )和p38MAPK抑制剂 (SB2 0 35 80 )可部分抑制薯蓣苷元诱导的A375 S2细胞凋亡。结论薯蓣苷元可诱导A375 S2细胞凋亡。其诱导凋亡作用与半胱天冬酶及MAPK的活化相关。
- 霍锐周秋丽王本祥王敏伟田代真一小野寺敏池岛乔
- 关键词：凋亡半胱氨酸蛋白酶类蛋白激酶类
- 可溶性人源含硒单链抗体酶的制备方法
- 本发明的可溶性人源含硒单链抗体酶的制备方法属于生物技术领域。以谷胱甘肽衍生物为靶抗原，通过免疫亲和筛选法对重组噬菌体展示人单链抗体库进行筛选，得到单链抗体B3和D8。将单链抗体基因组装到分泌型原核或真核表达载体上，转化大...
- 魏景艳徐俊杰霍锐李杰帅刘慧娟罗际巡罗贵民阎岗林李唯
- 文献传递
- CEA mRNA转染的成熟树突状细胞体外诱导特异性抗肿瘤作用
- 2011年
- 目的:将体外转录的癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)mRNA转染入成熟树突状细胞(dendritic cell,DCs),观察其体外诱导的特异性抗肿瘤作用。方法:GM-CSF、IL-4、TNF-α体外诱导成熟DCs并用流式鉴定。构建pcDNA3.1-CEA载体,体外转录为CEA mRNA,电穿孔法将CEA mRNA转染入DCs。流式细胞术检测转染后DCs中CEA蛋白的表达;MTT法检测DCs刺激T细胞增殖能力;LDH法检测DCs体外诱导的CTL的特异性抗肿瘤作用;ELISA法检测诱导的CTL上清中IFN-γ的水平。结果:CEA mRNA转染后DCs细胞内CEA蛋白显著高于对照组(83.32%vs3.34%,P<0.01)。CEA mRNA转染组DCs在效靶比为1∶10时,刺激T细胞增殖作用最强,明显高于未转染组[(19.11±1.89)%vs(15.59±0.70)%,P<0.05]。CEAmRNA转染组DCs能产生CEA特异性的CTL效应,在效靶比为5∶1、10∶1、20∶1和40∶1时杀伤率分别为[(5.42±0.87)%、(14.09±1.13)%、(27.16±0.72)%、(32.49±0.84)%,P<0.01],而未转染组和对照靶细胞均无杀伤作用。转染组DCs诱导的CTL上清中IFN-γ分泌量显著高于未转染组[(141.73±28.61)vs(9.45±4.63)pg/ml,P<0.01]。结论:CEAmRNA转染的成熟DCs体外能产生特异性抗肿瘤作用,为研制CEA RNA-DCs疫苗提供了实验依据。
- 杨蕾霍锐赵建军杜珍武张桂珍
- 关键词：树突状细胞癌胚抗原免疫治疗
- 蛋白聚糖NG2中硫酸软骨素糖胺聚糖链调节稳定转染NG2的U251细胞迁移能力被引量：7
- 2004年
- 应用PCR反应使编码蛋白聚糖NG2的核苷酸在3064 3065位置的AG突变成为GC,构建突变型NG2/S999A.用表达野生型NG2和突变型NG2/S999A及空白表达载体分别稳定转染人成胶质细胞瘤U251.应用WesternBlot方法鉴定转染后的U251细胞表达野生型及突变型NG2的状态,证实突变型NG2A999稳定转染的U251细胞株表达的NG2缺失硫酸软骨素葡糖胺聚糖链(CS GAG).比较了3种U251细胞株的迁移,表明蛋白聚糖NG2中CS GAG链影响细胞的迁移能力.
- 刘钧松霍锐威廉.B.斯道卡普池元斌房学迅
- 关键词：蛋白聚糖U251细胞
- 结肠癌细胞总RNA电穿孔法体外转染成熟树突状细胞被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨结肠癌细胞总RNA电穿孔法转染成熟树突状细胞(mDCs)的转染效率及对树突状细胞(DCs)特征和功能的影响,为DCs核酸肿瘤疫苗的制备及其在临床应用奠定基础。方法:用重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、重组人白细胞介素4(rhIL-4)将人外周血单核细胞(PBMC)诱导成未成熟树突状细胞(imDCs),肿瘤细胞坏死因子-α(TNF-α)作用24h刺激其成熟。实验设为imDCs组和mDCs组。Trizol法提取特异表达癌胚抗原(CEA)的结肠癌细胞SW480总RNA,电穿孔法将总RNA转染mDCs,设为RNA转染DCs组。流式细胞术检测各组细胞表面分子标志变化和转染DCs组的CEA蛋白表达情况。ELISA法检测各组细胞IL-12分泌水平。结果:rhGM-CSF、rhIL-4、TNF-α能将PBMC诱导成具有典型毛刺样突起形态学特征的DCs。imDCs组DCs表面CD1a表达呈阳性,CD80弱阳性,CD83阴性。mDCs组DCs表面CD1a、CD83、CD80表达均呈阳性。RNA转染DCs组DCs表面CD1a、CD83、CD80表达均呈阳性。总RNA转染mDCs后4h检测到CEA蛋白表达。mDCs组、RNA转染DCs组IL-12分泌量与imDCs组比较均显著升高(P<0.01),而mDCs组与RNA转染DCs组比较差异无显著性(P>0.05)。结论:结肠癌细胞总RNA可通过电穿孔法转染mDCs并表达CEA蛋白,电穿孔不改变mDCs的表面分子特征及功能。
- 杨蕾霍锐卜丽梅杜珍武邸军张桂珍
- 关键词：树突细胞电穿孔
- 人源含硒单链抗体酶在细胞水平的抗氧化作用
- 目的:检测人源含硒单链抗体酶(Se-scFv-B3)在细胞水平的抗氧化作用。方法:取新鲜大鼠乳鼠心肌细胞进行原代培养,用 HO制备氧化应激损伤模型,筛选 Se-scFv-B3使用的安全剂量,实验分组给药。用 MTT 法测...
- 霍锐石毅魏景艳徐俊杰吕绍武闫飞苏家明段玉晶丛登立王诗雯李唯闫岗林罗贵民
- 关键词：人源单链抗体含硒酶细胞水平抗氧化
- 文献传递
