黎伶俐
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
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- 相关领域：生物学更多>>
- 嵌合YAC克隆的成因、检测及减少嵌合的对策
- 1997年
- YAC(yeast artifical chromosome,酵母人工染色体)克隆技术因其克隆容量大而成为基因组研究的重要工具,但因为存在高嵌合率,不利于YAC文库应用。嵌合产生的原因有共连接、共转化及同源重组,据此发展了相应的检测方法,并可分别采用双酶切法,提高原生质体浓度法,及使用重组缺陷菌株等措施来降低由于上述原因造成的嵌合,使YAC文库使用更方便。
- 黎伶俐杨智勇
- 关键词：基因克隆酵母人工染色体
- 中国人基因组YAC文库的构建及首批克隆鉴定被引量：1
- 1996年
- 本文采用PJS97/PJS98及TPH 274载体主宿系统构建中国汉族男性基因组YAC文库,在初探基础上不断改进方法,通过控制脉冲条件的原位筛选去除小片段DNA分子,用多胺溶液防止68℃对大片段DNA分子的破坏作用,并采用Agarase消解低熔点胶。转化获克隆10000余个,采用甘油一步到位法保存8000余个。对其中一批克隆进行鉴定。转化子阳性率为95％,其中75％的片段介于100～200kb间,10％为200～600kb,10％为600～1600kb,该批转化子平均片段230kb。克隆片段平均大小略高于回收到的目的片段的下限而低于它的平均大小。
- 黎伶俐夏家辉潘乾廖晓东龙志高李麓芸邓汉湘杨智勇匡达人
- 关键词：中国人克隆鉴定
- 人类染色体8q24.1带36个单拷贝的克隆与筛选被引量：1
- 1994年
- 显微切割人类染色体8q24.1带DNA的初级PCR产物与pUC19质粒载体进行体外连接,转化大肠杆菌DH5a,获得了329个白色克隆。已分析的53个克隆中,有36个单拷贝,这些单拷贝片段长度介于105bp～960bp间,平均350bp,它们与正常人基因组DNA杂交显示各自特异性,可作为8q24.1带的特异性遗传标记。
- 黎伶俐夏家辉李麓芸邓汉湘何小轩黄蕾阮庆国付俊江
- 关键词：显微切割微克隆
- 基因组YAC文库构建方法的几点改进
- 1996年
- 以ｐＪＳ９７、ｐＪＳ９８为载体，对中国人基因组ＹＡＣ文库的构建进行了尝试建立了一种对小片段ＤＮＡ“原位电泳筛除”的方案，采用多胺溶液处理以减少大片段ＤＮＡ的降解，使整个建库工作更加简便、有效．此外，改进了转化子的挑取和保存的方法，既简化了操作，又减少了杂菌污染和交叉污染．这些改进的方案。
- 杨智勇匡达人黎伶俐陆劭宋明浩戴和平龙志高潘乾李麓芸夏家辉
- 关键词：基因组酵母人工染色体
