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猪尿酸酶动力学特性研究被引量：6: 2009年; 目的研究作用温度、pH值、底物浓度对猪尿酸酶催化反应速度的影响，和猪尿酸酶的热稳定性、酸碱稳定性、保存的稳定性及Km值。方法通过测定不同温度、pH值、不同底物浓度等反应条件下尿酸酶的活性来确定其最适反应条件和酸碱稳定性。测定酶制剂在37℃和70℃保温不同时间后的残余活力，确定尿酸酶的热稳定性。测定酶制剂在4℃和加入不同比例的甘油后并在-20℃保存一定时间后的残留活力，确定尿酸酶保存的稳定性。用Lineweaver Burk法作图确定酶的Km值。结果在一定的条件下，该猪尿酸酶的最适作用温度是37℃，最适pH为8．4，而且pH在7．0以上活性保持稳定。热稳定性较好，在37℃处理48h时活性保持62．7％，在70℃处理1h时活性仍保持17％。在最适温度及pH条件下，底物浓度在0～30μmol／L酶活力上升明显，30～120μmol／L酶活力上升较缓慢，120～200μmol／L酶活力无明显上升，故该猪尿酸酶达到最大反应速度的底物浓度应在120μmol／L。尿酸酶在4℃中保存2个月活性保持82．4％，加入20％甘油后在-20℃保存的稳定性最好，2个月后活性仍保持92．8％。通过底物浓度与酶活力计算得到该酶催化尿酸的米氏常数（Km）为8．03μmol／L。结论该猪尿酸酶的理化性质较优越，最适作用温度及反应最佳pH接近人体生理条件，热稳定性和酸碱稳定性都较好，与底物的亲和力好，且易于保存，为该酶的临床应用提供了实验依据。; 寇文娥荣俊于勤; 关键词：尿酸氧化酶动力学

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于勤

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