冯缨
- 作品数：8 被引量：22H指数：3
- 供职机构：上海第二医科大学附属仁济医院更多>>
- 发文基金：德国大众基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 细小病毒H-1感染对胃癌细胞核修复相关基因表达的影响
- 2005年
- 目的探讨细小病毒H-1诱导胃癌细胞死亡的可能机制。方法选取对细小病毒H-1敏感和不敏感的胃癌细胞株HGC27和BGC823,H-1病毒感染48 h后提取细胞总RNA。应用不同标记的dCTP逆转录制备荧光探针,与含有8 000点人类体细胞基因序列的表达谱cDNA芯片杂交,计算机荧光扫描分析HGC27细胞核修复相关基因表达谱的改变。实时定量PCR检测HGC27和BGC823细胞部分核修复相关基因的表达。结果基因芯片分析显示,HGC27细胞的64对核修复相关基因中,12对基因表达水平下调至0.5以下,6对基因表达水平上调至2倍以上。PCR定量检测证实,HGC27细胞BTG2表达明显下调,MBD2表达显著上调,XRCC4和H2A.Z的表达无明显改变;BGC823细胞BTG2表达明显下调,XRCC4、H2A.Z和MBD2表达无明显改变。结论细小病毒H-1可能通过影响胃癌细胞核修复通路相关基因的表达,使细胞基因转录或细胞周期停止,从而诱导胃癌细胞死亡。
- 冯缨冉志华刘炯萧树东
- 关键词：胃癌细小病毒H-1核修复基因表达
- 基因芯片技术在细小病毒H-1诱导胃癌细胞基因表达研究中的应用价值被引量：5
- 2004年
- 目的 探讨基因芯片技术在细小病毒H 1诱导胃癌细胞HGC2 7相关基因表达改变研究中的应用价值。方法 分别收集H 1病毒感染前与感染 4 8h后胃癌细胞HGC2 7,分离并纯化细胞mRNA ,运用基因芯片技术 ,通过荧光染料标记、芯片杂交、洗涤、扫描及数据分析等步骤 ,得到H 1病毒感染前后胃癌细胞HGC2 7中表达改变的相关基因谱。对基因芯片结果中部分表达有改变的基因进行RT PCR、Northernblot的分析鉴定。结果 胃癌细胞HGC2 7感染H 1病毒 4 8h后的基因芯片结果显示 :在被检测的 80 0 0条目的基因中 ,92 0条基因的表达明显改变 ,β raf、creb、p38 γ、rad2 1、sarp1等部分表达有改变基因的RT PCR和Northernblot鉴定结果显示 ,与表达谱芯片的结果基本一致。结论 基因表达谱芯片技术是大规模平行监测多基因表达的一种有效方法 ,可有效地用于细小病毒H
- 刘炯冉志华冯缨邹健萧树东
- 关键词：基因芯片技术细小病毒H-1胃癌细胞基因表达肿瘤
- 胃癌分化相关基因研究进展被引量：3
- 2003年
- 胃癌的发生、发展涉及多种基因,包括癌基因、抑癌基因、细胞周期调节因子和转移相关基因等的改变.按组织病理学分型,胃癌可分为肠型和弥漫型(Lauren分型)、膨胀型和浸润型(Ming分型)或分化型和未分化型(日本分型).
- 冯缨冉志华
- 关键词：原癌基因C-ERBB-2基因抑癌基因P73基因细胞周期调节因子
- 胃癌细胞对细小病毒H-1敏感性差异的实验研究被引量：5
- 2004年
- 目的 探讨不同胃癌细胞株对细小病毒细胞毒作用的敏感性差异及可能的机制。方法 共选用HGC2 7(未分化 )、BGC82 3(未分化 )、MKN4 5 (低分化 )、AGS(低分化 )、SGC790 1(中分化 )和MKN2 8(高分化 )等 6株不同分化状态的胃癌细胞株 ,用流式细胞仪分析其各自的细胞周期 ,H 1病毒感染后采用MTT方法检测不同胃癌细胞株对其细胞毒作用的敏感性差异 ,用RT PCR来检测H 1病毒中的非结构蛋白基因 (NS 1)在 6株不同胃癌细胞中的表达。结果 HGC2 7、BGC82 3、MKN4 5、AGS、SGC790 1和MKN2 8等不同分化状态细胞株中 ,S期细胞的比率分别为 2 4 .72 % ,30 .15 % ,2 7.10 % ,2 9 .0 3% ,31.82 %和 33.73%。其中HGC2 7细胞对H 1病毒的细胞毒作用敏感 ;SGC790 1细胞其次 ;MKN4 5、AGS细胞对H 1病毒的细胞毒作用中等敏感 ;MKN2 8细胞对H 1病毒的细胞毒作用不敏感 ;而BGC82 3则对H 1病毒的细胞毒作用抵抗。病毒NS 1的mRNA在HGC2 7、BGC82 3、MKN4 5和SGC790 1等细胞中的表达水平较高 ,而在AGS和MKN2 8中的表达水平却较低。结论 H 1病毒的细胞毒作用在不同的胃癌细胞株中的差异显著。总体上 ,与高分化细胞株MKN2 8细胞相比 ,分化差的细胞对细小病毒H 1的细胞毒作用敏感性增加。其机制至少部分与分化差细胞中病毒NS
- 冉志华刘炯冯缨邹健萧树东
- 关键词：胃癌细小病毒H-1敏感性细胞毒生物治疗细胞分化
- 细小病毒H-1诱导胃癌细胞死亡分子机制的基因表达谱研究被引量：1
- 2003年
- 自主性细小病毒H-1在活体组织中具有肿瘤抑制活性,并且在细胞培养中能特异地干扰转化细胞或肿瘤细胞的生存,但其诱导转化细胞死亡的分子机制尚不十分清楚。目的:研究细小病毒H-1诱导人胃癌细胞株HGC-27死亡时HGC-27细胞基因表达的变化,进而为阐明细小病毒H-1的抗肿瘤机制奠定基础。方法:采用四唑蓝(MTT)比色法分析HGC-27细胞在感染细小病毒H-1后不同时间点的存活率;分别收集纯化细小病毒H-1感染前和感染48h后HGC-27细胞的mRNA,应用基因表达谱芯片技术研究HGC-27细胞感染细小病毒H-1后的基因表达变化。结果:HGC-27细胞从感染细小病毒H-1后的第3天开始,细胞存活率呈明显下降趋势;感染细小病毒H-1 48h后,基因表达谱发生了明显的变化,表达改变基因约占被检测基因的11.5％(920/8000),363对基因的表达明显下调,557对基因的表达明显上调。其中与细胞信号传导、细胞周期、细胞凋亡相关的部分基因表达改变与细小病毒H-1诱导的细胞死亡通路相关;而与DNA合成和修复、代谢以及蛋白质合成相关的部分基因表达改变可能与细胞对外界刺激的防御反应相关。结论:细小病毒H-1诱导人胃癌HGC-27细胞死亡的过程是以一种细胞依赖的方式进行的,并涉及细胞中多个促进死亡的信号传导通路。细小病毒H-1诱导胃癌细胞死亡以及胃癌细胞?
- 刘炯冉志华冯缨邹健萧树东
- 关键词：细小病毒H-1胃癌细胞死亡分子机制基因表达
- 细小病毒H-1感染对胃癌细胞凋亡相关基因表达的影响
- 2005年
- 背景:细小病毒H鄄1对肿瘤细胞和转化细胞具有选择性杀伤和抑制生长的作用,是很好的基因治疗用载体。但肿瘤细胞对细小病毒H鄄1杀伤作用敏感或耐受的分子机制目前尚不十分清楚。目的:从mRNA水平观察细小病毒H鄄1感染对胃癌细胞凋亡相关基因表达的影响,探讨细小病毒H鄄1对胃癌细胞细胞毒作用的相关机制。方法:选取对细小病毒H鄄1敏感的人胃癌细胞株HGC鄄27和不敏感的人胃癌细胞株BGC鄄823,于细小病毒H鄄1感染48h后提取细胞总RNA。应用不同荧光染料标记的dUTP逆转录制备荧光探针,与含有8000点人类体细胞基因序列的基因表达谱芯片杂交,再经计算机荧光扫描以分析敏感细胞株HGC鄄27凋亡相关基因表达谱的改变。采用逆转录聚合酶链反应(RT鄄PCR)对敏感细胞株HGC鄄27部分凋亡相关基因,如SARP1、BCL鄄10、CL鄄20、NCDRP和RAIDD等的表达作进一步检证,并比较其与不敏感细胞株BGC鄄823相应凋亡相关基因的表达差异。结果:基因表达谱芯片检测结果显示,HGC鄄27细胞感染细小病毒H鄄148h后,所检测的64对凋亡相关基因中有15对基因表达水平下调至原水平的50%以下,仅有1对基因表达水平上调至2倍以上。RT鄄PCR扩增结果显示,感染细小病毒H鄄148h后,敏感细胞株HGC鄄27的SARP1、BCL鄄10、CL鄄20和NCDRP基因表达明显下调。
- 冯缨冉志华刘炯萧树东
- 关键词：胃肿瘤细小病毒H-1细胞凋亡基因表达逆转录聚合酶链反应
- 表没食子儿茶素没食子酸酯抗消化道肿瘤作用的实验研究被引量：9
- 2003年
- 背景:表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)具有抗肿瘤作用,但是其有效浓度和可能作用机制尚不十分清楚。目的:研究。EGCG对不同消化道肿瘤细胞株的杀伤作用及其抗肿瘤作用的靶位点,为其应用于临床肿瘤治疗奠定理论基础。方法:采用四唑蓝(MTT)比色法检测8株消化道肿瘤细胞株对EGCG敏感性的差异;采用流式细胞仪检测EGCG对敏感肿瘤细胞株细胞周期分布的影响;采用聚合酶链反应(PCR)-酶联免疫吸附测定(ELISA)检测EGCG对敏感肿瘤细胞株端粒酶活性的影响。结果:EGCG对8株消化道肿瘤细胞株均具有剂量依赖性杀伤作用。SW1116和MKN45细胞对EGCG最敏感,半数抑制浓度(IC50)分别为51.7μmol/L和55:9 μmol/L;BGC823和SGC7901细胞次之,IC50分别为68.5μmol/L和79.1 μmol/L;AGS细胞对低浓度:EGCG不敏感,对高浓度EGCG敏感,IC50为83.8 μmol/L;MKN28细胞对:EGCG中等敏感,IC50为119.8 μmol/L;HGC27和LoVo细胞对EGCG不敏感,IC50分别为183.2μmol/L和194.6 μmol/L。3种不同浓度的EGCG作用48 h后,敏感肿瘤细胞株MKN45的细胞周期分布与对照组相比均无明显改变。EGCG可抑制MKN45细胞的端粒酶活性,其作用呈剂量和时间依赖性。结论:EGCG对不同消化道肿瘤细胞株具有不同程度、呈剂量依赖性的杀伤作用;
- 冉志华邹健冯缨萧树东
- 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯消化道肿瘤细胞周期端粒酶
- 细小病毒H-1感染对有丝分裂原激活蛋白激酶信号传导相关基因表达的影响被引量：1
- 2002年
- 目的 探讨具有选择性杀伤和抑制肿瘤细胞生长特性的细小病毒H 1所诱导的胃癌细胞死亡的信号传导通路及可能机制。方法 采用RT PCR的方法 ,检测H 1病毒感染后胃癌细胞HGC2 7的有丝分裂原激活蛋白激酶 (MAPK)信号传导途径相关基因在mRNA水平的表达改变。结果 MAPK信号传导相关基因的扩增结果显示 :在H 1病毒感染HGC2 7细胞 48h后 ,细胞CREB基因的表达明显增高 ,ERK1、STAT2、p38 γ、MEK2、β RAF、MTK1基因的表达明显降低 ,而JNK2、ETS、ERK2基因在mRNA水平的表达无明显改变。结论 细小病毒H 1的细胞毒作用可能与其影响胃癌细胞MAPK信号传导途径中相关基因的表达有关。即H 1病毒通过干预癌细胞信号传导的特定通路而诱导细胞死亡。由此我们认为 ,可修饰改造的细小病毒H 1。
- 冉志华刘炯冯缨李晓波邹健萧树东
- 关键词：细小病毒H-1基因表达有丝分裂原激活蛋白激酶信号传导RT-PCR
