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基于冰核蛋白的狂犬病毒糖蛋白细菌表面展示被引量：3: 2010年; 为验证冰核蛋白表面展示系统的可行性与优越性,将编码狂犬病毒(Rabies virus,RV)主要免疫保护性抗原糖蛋白G基因片段融合到丁香假单胞菌冰核蛋白截断的N端,构建表面展示载体pET28a-INP-RVG。转化大肠埃希菌BL21(DE3)后16℃低温诱导表达,SDS-PAGE检测表明在约78 ku和56 ku处有明细的蛋白带出现,大小与理论值相符。完整细胞ELISA实验结果表明,重组蛋白在大肠埃希菌表面成功展示。为进一步研制基于沙门菌的多抗原表位展示性重组疫苗、新型狂犬病疫苗奠定基础。; 郭恒刘娟李慧萍王学林孙树民张茂林高丽芳徐德启刘明远; 关键词：狂犬病毒大肠埃希菌

牛肉中阿苯达唑及其代谢产物残留的检测被引量：2: 2011年; 阿苯达唑是一种广谱抗蠕虫药,但是由于用药不当等原因,其在动物可食性组织中的残留可能刺激神经系统及消化系统、触发过敏反应甚至出现肝功能异常。本试验基于5μg/kg的检验限建立牛肉中的阿苯达唑及其代谢产物的检测方法——高效液相色谱法。样品中残留的阿苯达唑及其主要代谢产物阿苯达唑砜和阿苯达唑亚砜,经乙醚提取,乙腈和己烷萃取,由高效液相色谱(配紫外检测器)测定得到阿苯达唑及其亚砜与砜的平均回收率分别为71.8%～88.6%、78.1%～85.6%和83.1%～91.9%,变异系数分别为2.8%～9.2%、0.9%～4.9%和1.4%～4.8%。; 李慧萍毕文岩郭恒刘娟王学林孙树民刘明远; 关键词：阿苯达唑 HPLC 药物残留

狂犬病口服疫苗研究进展被引量：2: 2010年; 狂犬病（Rabies）是由狂犬病病毒（Rabies irus，RV）感染引起的一种人兽共患急性传染病。狂犬病在世界范围内广泛流行。调查表明，我国农村地区犬只免疫率仅为10％～20％，猫则几乎没有进行过免疫，形成不了免疫屏障。; 刘娟王学林郭恒孙树民; 关键词：狂犬病病毒口服疫苗急性传染病免疫率人兽共患调查表

旋毛虫A200711蛋白的原核表达、纯化及其对H7402细胞增殖的影响被引量：3: 2012年; 目的原核表达旋毛虫抗肿瘤基因A200711,并纯化该蛋白,CCK-8检测其对H7402人肝癌细胞的生长抑制作用。方法 PCR获得A200711基因片段,构建重组表达载体pET-28a(+)-A200711,转入大肠杆菌Rosetta(DE3)。SDS-PAGE及Western blot检测IPTG诱导后重组菌,采用Ni-NTA亲合层析柱纯化并柱上复性目的蛋白。细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测A200711蛋白对H7402细胞的生长抑制作用。结果成功构建了原核表达载体pET-28a(+)-A200711,目的蛋白以包涵体形式在大肠杆菌中高效表达;SDS-PAGE及Western blot分析显示,相对分子量约22KD处出现目的蛋白条带,与理论值相符;经Ni-NTA亲合层析柱获得了高纯度可溶性的A200711蛋白;H7402细胞增殖抑制率与A200711蛋白浓度存在量效关系,同时随作用时间的延长增殖抑制率也明显增加。结论成功克隆、表达并纯化了旋毛虫A200711蛋白。A200711蛋白可抑制H7402细胞的增殖,且呈现时效和量效关系,本研究表明旋毛虫A200711蛋白作为潜在的抗肝癌生物制剂有进一步研究的价值。; 李慧萍刘学张馨月郭恒赵丽晶刘攀孙树民褚丽新刘娟刘明远王学林; 关键词：旋毛虫抗肿瘤原核表达

RV-G/LTB双基因融合真核表达质粒的构建及其在Vero细胞中的表达被引量：2: 2011年; 目的构建RV-G/LTB双基因融合真核表达质粒,并在Vero细胞中表达。方法应用重叠延伸PCR方法,采用一定的linker序列(Gly4Ser)2将已克隆的狂犬病病毒糖蛋白(Rabies virus glycoprotein,RV-G)基因片段和大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(E.coli heat-labile enterotoxin subunit B,LTB)基因片段进行融合,扩增融合基因G-linker-LTB,并插入真核表达质粒pVAX1中,构建重组真核表达质粒pVAX1-G-linker-LTB,转染Vero细胞,间接免疫荧光试验和Western blot法检测融合蛋白的表达。结果重组真核表达质粒pVAX1-G-linker-LTB经双酶切及测序鉴定证明构建正确,转染Vero细胞后,可检测到融合蛋白的表达。结论已成功构建了RV-G/LTB双基因融合真核表达质粒,并在Vero细胞中表达了融合蛋白。; 刘娟刘明远于录郭恒李扬赵丽晶孙树民李慧萍刘学王学林; 关键词：狂犬病病毒糖蛋白类 VERO细胞

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刘娟