刘小宁
- 作品数：87 被引量：224H指数：8
- 供职机构：新疆大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金新疆维吾尔自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 杨枝把诱集棉铃虫技术与作用机理被引量：2
- 2008年
- 杨树枝把是棉铃虫预测预报和防治的重要手段之一,其使用效果在棉铃虫的3、4代发生期更优于性诱剂。概述了诱集棉铃虫的杨树枝把制作、使用技术及作用效果,分析了杨枝把诱集棉铃虫的性别、代次差异,诱集时间的特异性,以及杨树枝叶挥发性物质的分离提取,室内分析与田间诱集测试,阐述了棉铃虫诱集杨树枝把的作用机理,并分析了杨树枝把在害虫防治中的应用前景。
- 刘宁刘小宁李娜边洋
- 关键词：杨枝把棉铃虫诱集
- 一种适用大田棉花种植敏感棉蚜检测鉴别的方法及试剂盒
- 本发明公开一种适用大田棉花种植敏感棉蚜检测鉴别的方法及试剂盒。通过获得敏感品系棉蚜用0.05%的TritonX-100将杀虫剂稀释并获得药剂诊断浓度50mg·L<Sup>-1</Sup>和60mg·L<Sup>-1</S...
- 刘小宁刘宁张学涛高希武张东海李芬马纪
- 文献传递
- 荒漠昆虫小胸鳖甲几丁质酶抗血清的制备及抗体效价检测被引量：1
- 2014年
- 目的几丁质酶是昆虫重要的防御物质,本研究采用DNA-蛋白质联合免疫策略制备荒漠昆虫小胸鳖甲几丁质酶(MpCHI786)的抗血清,用于检测小胸鳖甲在外界不良条件下几丁质酶的变化。方法从小胸鳖甲成虫中提取总RNA,反转录后RT-PCR扩增Mpchi786 cDNA,构建原核表达载体pET30a-Mpchi786,在大肠杆菌BL21中用IPTG诱导表达获得融合蛋白His-MpCHI786。对融合蛋白切胶纯化后与弗氏佐剂混合作为抗原。另外,构建真核表达质粒pcDNA3.0-Mpchi786,对小鼠尾静脉高压注射,8 h后RT-PCR检测其在肝脏的瞬时表达。以pcDNA3.0-Mpchi786肌肉注射免疫小鼠3次后,再用His-MpCHI786融合蛋白加强免疫2次,DNA免疫和免疫结束后收集免疫小鼠的血清,ELISA和Western blot法检测抗血清效价和特异性。结果 RT-PCR结果显示尾静脉高压注射8 h后,pcDNA3.0-Mpchi786质粒在小鼠肝脏有特异性表达。Western blot检测表明,用His-MpCHI786融合蛋白作为抗原,pcDNA3.0-Mpchi786DNA质粒免疫3次的抗血清和His-MpCHI786融合蛋白加强免疫2次后的抗血清都显示了特异性反应条带。ELISA检测结果显示抗血清效价高达1∶204 800以上。结论利用DNA-蛋白质联合免疫法能够获得效价高、特异性的小胸鳖甲几丁质酶MpCHI786的抗血清。
- 陆雪莹李洁琼庄淑珍刘小宁马纪
- 关键词：几丁质酶抗血清抗体效价
- 有机棉的种植与加工被引量：3
- 2002年
- 刘宁于明刘小宁张鹏忠
- 关键词：有机棉
- 2-十三烷酮胁迫下棉铃虫FoxAl调控CYP6B6的表达被引量：1
- 2022年
- 旨在研究2-十三烷酮胁迫对棉铃虫Helicoverpa armigera叉头框A类似蛋白(forkhead box A-like protein,FoxAl)基因表达水平的影响,及FoxAl蛋白是如何调控解毒酶基因CYP6B6表达,为进一步明确FoxAl参与棉铃虫解毒代谢和生长发育过程提供依据。通过酵母自激活检测FoxAl蛋白的转录激活能力;通过凝胶阻滞检测FoxAl蛋白与CYP6B6启动子的结合能力;通过RNAi沉默棉铃虫5龄幼虫中肠内FoxAl基因,检测不同时间(24,48,72和 96 h)后FoxAl和CYP6B6的表达变化情况;最后通过qPCR检测不同浓度(5,10和20 mg/g)2-十三烷酮处理不同时间(6,12,20,30和48 h)后棉铃虫6龄幼虫中肠内FoxAl和CYP6B6的表达谱,并分析FoxAl和CYP6B6表达谱的相关性。FoxAl蛋白具有激活酵母MEL1报告基因转录的能力,且该蛋白能与CYP6B6启动子中响应植物次生物质应答的核心片段结合。利用dsFoxAl沉默棉铃虫5龄幼虫中肠内FoxAl的表达量后,CYP6B6的表达量也显著降低。2-十三烷酮处理棉铃虫6龄幼虫后,中肠内FoxAl和CYP6B6的表达量变化情况相似,基本都呈抛物线趋势,在短时间12 h内两者的表达量迅速上升后,随胁迫时间的延长两者的表达量逐渐降低;此外,FoxAl和CYP6B6的表达量变化基本呈正相关,甚至在20 mg/g的胁迫浓度以及12 h和48 h的胁迫时间下两者都是高度正相关(r=0.819,P=0.045;r=0.987,P=0.007;r=0.978,P=0.011)。棉铃虫FoxAl蛋白可能是CYP6B6的转录激活因子,在植物次生物质2-十三烷酮短期胁迫下,FoxAl的表达量增加,进一步上调CYP6B6的表达,从而参与棉铃虫对2-十三烷酮的解毒作用。
- 魏倩刘小宁赵洁
- 关键词：棉铃虫细胞色素P450酶转录因子
- 酵母单杂交筛选棉铃虫CYP6B6基因相应2-十三烷酮过量表达的调控因子
- 昆虫细胞色素P450 在有毒物质的解毒过程中起重要的作用.因为CYP6B6 的表达使棉铃虫可以耐受2-十三烷酮,这个表达过程受DNA 序列和转录调控因子的控制,因此CYP6B6 的2-十三烷酮相应元件和转录调控因子对于棉...
- 赵洁刘小宁
- 关键词：棉铃虫酵母单杂交
- 棉铃虫β-actin基因的克隆、表达及多克隆抗体制备被引量：3
- 2015年
- 克隆获得了棉铃虫β-actin基因,生物信息学分析表明,基因序列长1 131 bp,编码376个氨基酸,理论分子量为41.77 k D,理论等电点5.16。氨基酸序列与其他物种肌动蛋白比较有98%-99%的一致性,与鳞翅目的家蚕具有99%的一致性。分析棉铃虫β-actin和小家鼠β-actin的抗原决定簇位点,发现两者抗原表位有70.63%的一致性。同时原核表达、纯化了棉铃虫β-actin蛋白,Western-blot结果表明表达正确。将纯化后的蛋白免疫ICR小鼠4次后,小鼠抗血清效价最高可达388 800,并且能与天然棉铃虫蛋白特异性结合。
- 黄丽娜程婷婷王新绘魏原杰赵洁李金耀刘小宁
- 关键词：棉铃虫Β-ACTIN克隆原核表达多克隆抗体
- 新疆一枝蒿与黄花蒿粗提物抗棉铃虫与棉蚜的特性研究被引量：5
- 2011年
- 【目的】为利用新疆一枝蒿研制新型无公害植物杀虫药剂奠定基础。【方法】采用97%乙醇对新疆一枝蒿(Artemisia rupestris)和黄花蒿(Artemisia annua)进行了总提,将所得粗提物对棉花重要害虫—棉铃虫(Helicoverpa armigera)与棉蚜(Aphis gossypii)进行了生物活性测定,同时还使用新疆一枝蒿粗提物对棉铃虫开展了室内、室外的驱避实验。【结果】(1)新疆一枝蒿与黄花蒿粗提物对棉铃虫半致死浓度LC50分别为3.515 7与4.781 1 mL/100g;(2)新疆一枝蒿与黄花蒿粗提物对棉蚜半致死浓度LC50分别为0.956与2.047 4 g/100 mL;(3)新疆一枝蒿粗提物对棉铃虫室内室外趋避率分别为28.39%与80.68%。【结论】新疆一枝蒿粗提物对棉铃虫与棉蚜的毒杀作用较好并高于黄花蒿粗提物,且新疆一枝蒿粗提物对棉铃虫有驱避和生长抑制等作用。
- 何海黄丽张学涛张雷李芬刘小宁
- 关键词：新疆一枝蒿黄花蒿棉铃虫棉蚜粗提物
- 北疆地区棉蚜对不同杀虫剂敏感度水平测定被引量：24
- 2012年
- 为了解北疆不同地区棉蚜种群对不同类型杀虫剂的敏感度水平,科学指导北疆地区棉蚜的化学防治,利用FAO推荐的叶片浸渍法(1980)测定北疆地区4个棉蚜田间种群对4类杀虫剂的敏感性。结果表明,新农大种群对杀虫剂的敏感水平最高,不同类型杀虫剂的毒力大小顺序为:新烟碱类>有机磷类>抗生素类>拟除虫菊酯类。安宁渠种群较石河子种群更为敏感。石河子垦区内的两个不同种群对菊酯类处于相对敏感状态;对有机磷类产生了明显抗药性,147团种群对辛硫磷的相对抗性倍数为951.8倍,新湖农场种群更达到了1236.9倍;147团种群和新湖种群对啶虫脒亦产生了明显的抗药性,相对抗性倍数分别为134.4倍和270.0倍,但对吡虫啉的敏感度较高。石河子垦区应限制使用新烟碱类的啶虫脒和有机磷类杀虫剂,以减缓棉蚜抗性的发展。
- 张学涛柳建伟李芬刘宁孙磊张东海刘小宁
- 关键词：棉蚜杀虫剂抗药性
- 棉铃虫乙醇脱氢酶5的原核表达和活性分析及其抗血清的制备
- 2021年
- 本课题组前期基于酵母单杂交技术筛选出响应2-十三烷酮诱导CYP6B6过表达的6个调控因子,乙醇脱氢酶5(HaADH5)是其中之一,乙醇脱氢酶是一种代谢乙醇的重要酶类,在哺乳动物中的研究很多,但在昆虫中的研究很少.为了进一步探究HaADH5是否参与P450 CYP6B6的过表达,进而参与棉铃虫对包括杀虫剂在内的外界有毒物质的代谢.本实验将pET32a-HaADH5转化至大肠杆菌Transetta中进行诱导表达,Western blot进一步验证融合蛋白HisHaADH5的表达,通过镍柱纯化获得融合蛋白His-HaADH5,且测定了酶活.用蛋白免疫法制备了鼠抗His-HaADH5的血清,Western blot分析了该抗血清的免疫特异性,继而用此抗体检测了HaADH5在不同组织中的表达.活性分析表明,在NAD+的存在下,融合蛋白可以对不同醇类和甲醛进行脱氢,尤其对异戊醇的脱氢活性最高,活性为1333 U/mg.制备的抗血清效价为1∶409600.Western blot结果表明,该抗血清既能与融合蛋白His-HaADH5结合,也能与棉铃虫体内的HaADH5结合,还发现HaADH5在脂肪体中的表达量最高.原核表达的融合蛋白能代谢异戊醇,制备的抗血清具有较好的免疫特性,这些结果为HaADH5蛋白水平的鉴定以及功能研究提供了重要的检测工具,也有助于我们更好地探索棉铃虫乙醇脱氢酶5的功能.
- 古新蓉罗生慧魏林昱姜岩刘小宁
- 关键词：棉铃虫原核表达活性分析抗血清制备
