刘楠梅
- 作品数：87 被引量：208H指数：7
- 供职机构：解放军第四五五医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 低蛋白饮食在延缓慢性肾功能衰竭进展中的作用被引量：6
- 2003年
- 刘楠梅
- 关键词：低蛋白饮食慢性肾功能衰竭
- 金雀异黄素对终末糖基化产物刺激大鼠系膜细胞终末糖基化产物受体表达的影响被引量：6
- 2004年
- 目的 研究金雀异黄素(Gen)对终末糖基化产物(AGEs)刺激下其系膜细胞受体(RAGE)表达的影响。方法 以AGEs刺激高糖培养的SD大鼠系膜细胞,采用细胞免疫组化法检测系膜细胞RAGE表达,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测细胞内.RAGEmRNA水平;比色法检测细胞内丙二醛(MDA)水平。结果 AGEs刺激高糖培养的系膜细胞后RAGE表达及RAGEmRNA水平明显增加(P<0.05);MDA水平显著增加(P<0.01)。Gen能有效抑制RAGE及其:mRNA的表达,减少MDA水平,且呈时间和浓度依赖效应,以200μmol／L作用48 h效果最显著(P<0.01)。结论 体外模拟糖尿病环境下,AGEs刺激使。肾系膜细胞内RAGE高表达。Gen可以下调AGEs刺激后系膜细胞RAGE的异常表达,其可能的机制是阻断了氧化应激介导的AGEs-RAGE之间的正反馈途径,表现为细胞内MDA含量减低。
- 贾凤玉袁伟杰刘楠梅刘先锋张晓瑛
- 关键词：系膜细胞金雀异黄素终末糖基化产物受体表达高糖
- 促红细胞生成素对急性肾损伤微环境下骨髓间充质干细胞分化及分泌功能的影响被引量：5
- 2012年
- 目的观察经促红细胞生成素（EPO）干预后，体外模拟急性肾损伤（AKI）微环境下培养骨髓间充质干细胞（BM-MSC）的分化及分泌功能变化。方法Percoll密度梯度离心联合贴壁培养法分离C57BL／6小鼠BM-MSC（mBM-MSC）。构建缺血再灌注（I／R）诱导AKI小鼠模型，制作健康小鼠及I／R小鼠肾脏匀浆上清。取扩增3代的mBM-MSC分组培养：A组：含10％胎牛血清的低糖DMEM培养液培养；B组：健康小鼠肾脏匀浆上清干预；C组：I／R小鼠肾脏匀浆上清干预，体外模拟AKI微环境；D组：I／R小鼠肾脏匀浆上清＋不同浓度EPO（1、5、10、50U／m1）干预；培养1、3、5、7d。倒置显微镜观察细胞形态，透射电镜观察细胞超微结构，流式细胞仪检测细胞角蛋白18（CKl8），酶联免疫吸附试验（ELISA）检测培养上清液中骨形态发生蛋白7（BMP-7）、肝细胞生长因子（HGF）、血管内皮生长因子（VEGF）水平。结果分离获得的P3一mBM-MSC高表达CD29和CIM4，低表达CD34和CIM5。与A、B组长梭形细胞相比，C组部分细胞出现椭圆形、短梭形、圆形外观，EPO干预可使细胞呈现鹅卵石样外观，且C、D组细胞的胞质内细胞器丰富，并可见微绒毛及桥粒。A、B组mBM-MSC内仅有极微量CKl8表达，C、D组CKl8阳性表达率显著高于A、B组（均P〈0．01），50U／mlEPO干预5、7d后CKl8表达量显著高于同时间点C组（5d：35．22±4．04比8．72±0．38，7d：42．00±5．39比13．20±1．14，均P〈0．01）。A、B组上清液中均见有BMP-7、HGF、VEGF表达，两组间差异无统计学意义，C组表达量均显著低于A、B组（P〈0．05或P〈0．01）。结论EPO干预可增强mBM-MSC的分化功能，并逆转其低分泌效应。
- 刘楠梅田军王巍巍韩国锋程劲黄健张金元
- 关键词：红细胞生成素间质干细胞细胞分化细胞因子类急性肾损伤
- HO-1基因修饰对急性肾损伤微环境下骨髓间充质干细胞增生分化的影响被引量：3
- 2015年
- 目的观察经血红素加氧酶-1(HO-1)基因修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)在急性肾损伤(AKI)微环境下的增生分化,并探讨其机制。方法 Gateway技术构建含HO-1目的基因的质粒,同时构建仅含示踪基因e GFP的对照载体;脂质体法转染293FT细胞获得慢病毒原液lenti-HO-1-e GFP和lenti-e GFP;稀释后分别感染BMSCs获得HO-1-BMSCs和e GFP-BMSCs(空载体对照),检测转染细胞的活力、分化潜能。制作缺血再灌注诱导AKI大鼠的肾脏匀浆上清(AKI-KHS),以正常大鼠肾脏匀浆上清(N-KHS)作为对照,分别干预BMSCs、e GFP-BMSCs和HO-1-BMSCs,构成空白组(BMSCs组)、对照组(BMSCs/N-KHS组)、BMSCs/AKI-KHS组、e GFP-BMSCs/AKI-KHS组和HO-1-BMSCs/AKI-KHS组,于37℃、5%CO2培养箱中培养3 d。MTT法检测培养BMSCs的生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡,透射电镜观察细胞超微结构变化,免疫组化法检测细胞内角蛋白18(CK18)表达,Western印迹对各组细胞内HO-1、磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p AKT)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p ERK)水平进行检测。用SPSS19.0统计软件进行统计学分析。结果基因修饰并未改变BMSCs活力及多向分化潜能。与对照组比,BMSCs/AKI-KHS组的细胞生长抑制率和凋亡阳性细胞比例显著增加(t=12.581,t=16.283;P<0.05);经HO-1基因修饰后,HO-1-BMSCs/AKI-KHS组的细胞生长抑制率和凋亡阳性细胞比例均有显著下降(t=5.958,t=7.957;P<0.05)。AKI-KHS可诱导BMSCs出现肾小管上皮细胞样分化的超微结构改变,胞浆中可观察到CK18表达,以HO-1-BMSCs/AKI-KHS组的CK18+细胞比例最高(t=4.057,P<0.05)。与BMSCs/AKI-KHS组相比,HO-1-BMSCs/AKI-KHS组的细胞内HO-1蛋白水平显著增高(t=4.163,P<0.05),并伴随着细胞内p AKT、p ERK蛋白水平显著增高(tp AKT=14.305,tp ERK=7.148;P<0.05)。结论 HO-1基因修饰可改善AKI微环境下培养BMSCs的增殖,细胞凋亡减轻,向肾小管上皮样细胞转分化能力增加,HO-1的过表达及其下游的AKT、ERK�
- 刘楠梅王会玲韩国锋于秀峙田军胡伟锋张金元
- 关键词：血红素加氧酶-1急性肾损伤
- 促红细胞生成素对急性肾损伤微环境下骨髓间充质干细胞分化及分泌功能的影响
- 目的：观察经促红细胞生成素干预后，体外模拟急性肾损伤微环境下培养骨髓间充质干细胞的分化及分泌功能变化。方法：抽取C57BL／6小鼠的骨髓，经Percoll密度梯度离心联合贴壁培养法分离纯化出小鼠MSCs(miceBM-M...
- 刘楠梅田军王巍巍韩国锋程劲黄健张金元
- 关键词：肾损伤促红细胞生成素充质干细胞分泌功能
- 过表达CXCR4的骨髓间充质干细胞对共培养低氧/复氧肾小管上皮细胞的修复作用及可能机制
- 刘楠梅王会玲田军韩国锋胡伟锋程劲张金元
- 小檗碱在高糖及糖基化终末产物诱导足细胞损伤中的保护作用被引量：7
- 2016年
- 目的探讨小檗碱对糖基化终末产物(AGE)和高糖诱导下足细胞损伤及其骨架蛋白的影响及机制。方法以条件永生性人足细胞作为研究对象,于含10%胎牛血清及100 U/Lγ-干扰素的RPMI 1640培养液中进行体外培养,细胞增殖并诱导分化后进行分组处理。分别用高糖(30 mmo/L)、AGE(100μg/ml)、小檗碱(10μmo/L)处理48 h后,激光共聚焦检测技术观察纤维状肌动蛋白(F-actin),球状肌动蛋白(G-actin)变化;原位细胞免疫组化检测cspase-3,nephrin表达。采用SPSS13.0统计软件包进行统计学分析。结果共聚焦显微镜下观察显示,高糖及AGE作用下,足细胞F-actin出现重排,G-actin易位,小檗碱干预后有所恢复。免疫组化结果显示,对照组及高糖组几乎未见capase-3阳性表达,但高糖+AGE组,capase-3呈阳性表达(F=99.339,P<0.001);高糖+AGE组nephrin表达显著降低(F=165.84,P<0.001),与对照组及高糖组比较,差异均有统计学意义。小檗碱作用后,高糖+AGE组capase-3的水平下降(F=6.927,P=0.048),nephrin表达水平升高(F=165.84,P=0.025),差异均有统计学意义。结论在持续的高糖和AGE作用下,可引起足细胞骨架蛋白F-actin、G-actin重构及分布异常,并诱导足细胞凋亡,小檗碱能改善高糖和AGE引起的足细胞骨架蛋白损伤,并抑制足细胞的凋亡,其机制可能与nephrin的参与有关。
- 李芮王会玲刘楠梅胡伟锋徐凯
- 关键词：足细胞糖基化终末产物小檗碱
- 高糖及糖基化终末产物对肾小管上皮细胞转分化的影响及小檗碱的干预
- 目的 在DKD 发生发展过程中,肾小管间质病变是导致肾间质纤维化、肾功能降低、并最终进入慢性肾功能衰竭的主要因素,其中肾小管间质转分化(epithelial-messenchymal-transition,EMT)是引起...
- 王会玲李芮田军刘楠梅李燕
- 低钙透析液对腹膜透析患者颈动脉粥样硬化的影响被引量：7
- 2008年
- 目的:观察低钙透析液配合口服碳酸钙及活性维生素D3对持续性不卧床腹膜透析(CAPD)患者颈动脉粥样硬化的影响。方法:30例伴有颈动脉粥样硬化行CAPD的患者,改用低钙透析液(钙1.25mmol/L),同时调整碳酸钙及1,25-(OH)2维生素D3(罗盖全胶丸)的剂量。在改用低钙透析液3、6、9、12月时,采用多普勒超声观察颈动脉内-中膜厚度(IMT)、颈动脉血流阻力指数(RI)、颈动脉粥样斑块数量和超声分型的变化;同时检测血清钙、磷、血清甲状旁腺素(iPTH,放免法),计算钙磷乘积。结果:随访过程中,1例患者死亡,2例患者自行退出。低钙透析液CAPD后,患者颈动脉IMT逐渐变薄,12个月时降至最低[(1.58±0.36)mm,P<0.01]。伴随着颈动脉RI降低,8例患者颈动脉内的扁平斑及软斑数量减少(P<0.05),颈动脉粥样硬化斑块总数量也由47块降至34块。与此同时,血钙、磷及钙磷乘积明显下降(P<0.01),血iPTH明显增加(P<0.01)。至12月时钙、磷、钙磷乘积、iPTH达标比例分别为83.33%、70%、96.67%、70%。碳酸钙的剂量也由(2.27±0.41)g/d增至(3.35±0.22)g/d(P<0.05),罗盖全剂量由(0.21±0.09)μg/d增至(0.33±0.14)μg/d(P<0.05)。患者均未发生低钙抽搐、低血压等。结论:低钙透析有助于尿毒症腹膜透析患者颈动脉粥样硬化的疾病转归,其机制可能与显著改善患者的钙磷代谢紊乱,减轻其对血管的损伤作用有关。
- 刘楠梅田军张金元沈水春黄元兰
- 关键词：腹膜透析低钙透析颈动脉粥样硬化血钙血磷
- 微炎症状态对维持性血液透析患者营养状态的影响及生物电阻抗分析
- 胡伟锋王会玲李红仙刘楠梅韩国锋张金元
