卢建雄
- 作品数：112 被引量：421H指数：10
- 供职机构：西北民族大学生命科学与工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金甘肃省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程文化科学更多>>
- 脂肪细胞凋亡研究进展被引量：1
- 2006年
- 脂肪细胞凋亡,即能量储存的死亡。通过凋亡来调整脂肪细胞的数目被认为是脂肪组织生长和分化过程中维持正常生理机能所必需的。脂肪细胞凋亡受神经组织因素如瘦素、神经肽Y等影响,受脂肪组织局部作用因子如过氧化物增殖因子激活的受体-γ及其配体、肿瘤坏死因子-α、激素等影响。脂肪细胞分化影响凋亡的易感性,细胞生存蛋白Bcl-2及神经凋亡抑制蛋白(NAIP)在脂肪合成过程中,其水平升高。在脂肪组织方面对凋亡的进一步研究应该阐明凋亡对脂肪组织分布的影响。
- 林亚秋卢建雄杨公社
- 关键词：脂肪细胞凋亡
- 甘肃黑猪H-FABP基因多态性筛查及蛋白功能预测被引量：4
- 2018年
- 为了明确甘肃黑猪H-FABP基因的遗传特征,采用DNA池结合直接测序技术快速筛查甘肃黑猪H-FABP基因遗传多态性,并利用生物信息学方法预测其编码氨基酸的理化性质及蛋白功能。结果显示,甘肃黑猪H-FABP基因在扩增区域共发现4个突变位点,分别为C^(734)T-Intron1、T^(152)C-Exon2、G^(30)A-Intron2、T^(121)G-Intron2,各等位基因频率在突变前后存在明显差异;该基因编码区全长402 bp,共编码133个氨基酸残基,其中,编码区序列有1个T^(152)C-Exon2的错义突变,氨基酸由原来非极性的异亮氨酸(Ile)转变为极性的苏氨酸(Thr); H-FABP编码蛋白是一种稳定的亲水性蛋白,二、三级结构均为混合型,β-折叠所占比例最高。蛋白质功能预测结果显示,甘肃黑猪H-FABP编码蛋白存在19个潜在磷酸化位点和1个N-糖基化位点,可能会影响H-FABP基因调控肌内脂肪含量的增加。同源性比较和系统发育树分析表明,甘肃黑猪与偶蹄目动物亲缘关系最近。研究结果可为甘肃黑猪肌内脂肪含量沉积的分子遗传标记提供理论基础,该基因的多态性筛选已成为家畜肉质性状改良的分子研究热点。
- 张丽刘丽霞农伟伦李慧洁张国华卢建雄
- 关键词：甘肃黑猪H-FABP基因单核苷酸多态性生物信息学
- 精氨酸对猪脂肪细胞脂肪分解的影响被引量：2
- 2021年
- 为探究精氨酸对猪脂肪细胞脂肪分解的影响,该研究从仔猪皮下脂肪组织分离、培养前体脂肪细胞,诱导分化为成熟脂肪细胞后,分别以终浓度为0(对照)、0.01 mmol/L、0.10 mmol/L和1.00 mmol/L精氨酸处理48 h,MTT法检测细胞活力,油红O染色提取法检测细胞内脂质含量,采用荧光定量PCR检测甘油三酯脂解酶(ATGL)和激素敏感性脂肪酶(HSL)基因的mRNA表达水平。结果表明,0.01~1.00 mmol/L精氨酸对猪脂肪细胞活力无显著影响(P>0.05),但以剂量依赖方式显著降低细胞内脂质含量(P<0.05);1.00 mmol/L精氨酸显著促进脂肪细胞ATGL和HSL mRNA表达(P<0.05)。提示0.01~1.00 mmol/L精氨酸可能通过上调ATGL和HSL表达促进猪脂肪细胞水解。
- 谢晶宇地里亚尔·阿布拉海提张国华卢建雄
- 关键词：脂肪细胞精氨酸脂解
- 猪PPARγΔ5组织表达及生物信息分析
- 2023年
- 试验旨在比较分析PPARγ和PPARγΔ5在猪组织器官的表达及生物信息学特征,探讨PPARγΔ5的生物学结构与功能。试验采用实时荧光PCR检测PPARγ和PPARγΔ5 mRNA表达,分析PPARγΔ5及PPARγ蛋白生物信息特征。结果显示,PPARγΔ5 mRNA在猪组织器官的表达水平依次为皮下脂肪组织>背最长肌>肝脏>心脏,各组织PPARγΔ5的表达均极显著低于PPARγ (P<0.01),PPARγΔ5和PPARγ二者呈显著正相关(P<0.05)。PPARγΔ5蛋白由210个氨基酸组成,理论等电点(PI) 5.68,不稳定系数54.26,肽链大部分位于亲水区域,属于不稳定亲水酸性蛋白质。二级结构以无规则卷曲和延伸链为主,无跨膜螺旋结构和信号肽,为非分泌型蛋白,有25个潜在的磷酸化位点。PPARγΔ5蛋白的82.6%亚细胞定位于细胞核,8.7%在细胞质,有完整的N端调节域和DNA结合域(DBD),但C端配体结合域(LBD)缺失。研究表明,猪组织器官可通过选择性剪接产生PPARγΔ5;PPARγΔ5为亲水性非分泌蛋白,稳定性差,含有丰富的磷酸化位点,具有核转录因子的特征,可能具有与PPARγ不同的生物学功能。
- 宋苏堤魏芳李帅兵符璐卢建雄张国华
- 关键词：生物信息
- Txnip基因siRNA慢病毒表达质粒构建及促进猪前体脂肪细胞分化被引量：4
- 2019年
- 硫氧还蛋白互作蛋白(thioredoxin interacting protein, Txnip)是一种氧化还原调节蛋白质,与硫氧还蛋白结合并抑制其活性,调节细胞氧化还原状态,影响细胞多种生理过程,然而其在猪脂肪细胞分化中的作用尚不明确。本文设计合成3对靶向猪Txnip基因的shRNA寡核苷酸,分别连接于重组慢病毒载体pGLV_3/H_1/GFP+Puro构建siRNA表达质粒。测序验证后,与包装质粒共转染293T细胞,获得滴度1×10~8 pfu/mL的慢病毒干扰质粒。以MOI值100转染原代培养猪前体脂肪细胞,转染率均达80%以上,其中Txnip-shRNA-2转染细胞Txnip基因沉默率达75%。转染Txnip-shRNA-2的猪前体脂肪细胞用成脂分化培养液诱导后,每隔1 d检测细胞成脂分化及相关基因表达。结果发现,其分化比阴性对照质粒转染或未转染细胞显著增强(P<0.05),PPARγ和FAS mRNA表达水平显著提高(P<0.05)。本文构建siRNA慢病毒表达质粒能有效干扰猪Txnip基因表达,Txnip表达沉默可通过上调PPARγ表达促进猪前体脂肪细胞分化。本研究提示,Txnip可能是猪脂肪细胞分化的抑制因子。
- 岳小婧于淇张晶窦晓宁谢晶宇郭鹏辉卢建雄张国华
- 关键词：前体脂肪细胞分化
- 氧化应激对猪前体脂肪细胞分化及PPARγ选择性剪接的影响
- 2022年
- 营养代谢、氧化剂等各种内外环境因素都可能破坏机体氧化还原平衡,引发氧化应激,影响脂肪细胞功能及代谢;PPARγΔ5是PPARγmRNA前体选择性剪接产物,可能调控脂肪细胞分化。本研究通过分离培养猪前体脂肪细胞,用H_(2)O_(2)处理构建氧化应激细胞模型,采用油红O染色提取法检测细胞分化,实时荧光PCR检测成脂分化相关基因和PPARγΔ5 mRNA表达,研究氧化应激对猪脂肪细胞分化及PPARγ选择性剪接的影响。结果表明,H_(2)O_(2)诱导的氧化应激显著抑制猪前体脂肪细胞分化(P<0.05),极显著下调C/EBPα和PPARγ及其下游生脂基因FABP4和SCD的表达(P<0.01),极显著上调Txnip和LPL表达(P<0.01)。此外,H_(2)O_(2)处理极显著降低剪接因子SRSF 1及PPARγΔ5表达(P<0.01)。综上所述,氧化应激可通过抑制转录因子C/EBPα和PPARγ表达及促进Txnip表达减弱猪前体脂肪细胞分化,并抑制PPARγ基因选择性剪接。研究结果可为进一步探讨猪脂肪形成的调控机制提供新的线索。
- 魏芳李帅兵宋苏堤苗健张国华卢建雄
- 关键词：脂肪细胞氧化应激分化选择性剪接
- 半定量RT-PCR法检测原代培养脂肪细胞生脂基因mRNA转录表达被引量：12
- 2005年
- 在原代培养脂肪细胞生脂机制研究中,为了检测生脂基因ACC l和FAS mRNA表达水平变化,细胞总RNA经反转录合成cDNA,以β-actin为内参照,分别与ACC l和FAS等基因同管扩增。通过探讨和优化PCR体系中引物设计、退火温度、MgC l2浓度和循环次数等参数,以及引物对间的扩增竞争,建立了检测脂肪细胞生脂相关基因mRNA表达的半定量多重RT-PCR体系。结果显示,RT-PCR产物经电泳后,β-actin及生脂基因电泳带清晰,与预期产物大小一致,引物对间无扩增竞争,其扩增效率和特异性与单重RT-PCR体系相同,实验重复性好。因此,该方法和体系可用于快速、灵敏、可靠地检测特异基因mRNA的表达。
- 卢建雄臧荣鑫潘和平杨具田陈粉粉杨公社
- 血清剥夺对原代培养大鼠脂肪细胞脂代谢相关基因转录表达的影响被引量：2
- 2007年
- 利用血清剥夺/血清培养实验模型,采用油红O染色提取法、甘油试剂盒和RT-PCR,诱导和测定了大鼠附睾脂肪垫分离和培养的脂肪细胞生脂和脂解及其相关酶和转录因子mRNA水平的变化,探讨脂肪细胞脂代谢通路中关键酶和转录因子基因转录表达的规律。结果显示,依血清剥夺时间延长,脂肪细胞激素敏感脂酶(HSL)mRNA表达水平显著提高(P<0.05),恢复血清培养后,表达水平显著降低(P<0.05),与脂解活性的变化一致;脂肪生成及生脂相关基因脂肪酸合酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC1)和碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)mRNA表达水平依血清剥夺持续时间明显下降(P<0.05),恢复血清培养,随培养时间延长显著提高(P<0.05);血清剥夺显著降低固醇调控元件结合蛋白(SREBP)-1c mRNA水平,但血清剥夺72 h与36 h无明显差异(P>0.05);血清剥夺72 h后恢复血清培养36 h和72 h,SREBP-1c mRNA的表达水平没有显著性变化(P>0.05)。结果表明,生脂及FAS和ACC1表达与ChREBP mRNA水平一致,但与SREBP-1c不一致,提示ChREBP与成熟脂肪细胞生脂基因转录激活可能有更密切的关系,但尚待在蛋白水平进一步证实。
- 卢建雄杨公社陈粉粉
- 关键词：脂肪细胞脂解转录
- 彩色蔬菜豆腐的加工被引量：2
- 2001年
- 臧荣鑫杨具田刘翊中卢建雄
- 日粮添加黄芪和锌对肉鸡生产性能、肠道微生物及抗氧化能力的影响被引量：4
- 2017年
- 本试验旨在研究饲粮添加黄芪和锌对肉鸡生长性能、抗氧化能力和肠道微生物的影响。试验选用健康状况良好、体质量相近的40日龄青脚麻鸡96只,随机分为4组,每组12个重复,每个重复2只。对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中分别添加1%黄芪、30 mg/kg锌及1%黄芪粉+15 mg/kg锌。预试期7 d,正试期40 d。结果表明,日粮单独添加黄芪和锌可促进肉鸡大肠中乳酸杆菌、抑制大肠杆菌增殖(P<0.05),添加黄芪可提高肉鸡ADG及降低F∶G(P<0.05),提高肉鸡血液抗氧化指标T-AOC、GSH-Px及肝脏T-AOC水平(P<0.05),添加锌仅有提高生产性能的趋势,对抗氧化能力没有影响;黄芪和锌联合添加对肉鸡日增重和料重比、抗氧化能力及肠道微生物的影响显著高于单独添加黄芪或锌(P<0.05),并有降低采食量的趋势,提示日粮同时添加黄芪和锌对肉鸡生产性能和健康可能有一定的协同作用。
- 金美林岳小婧莫才红鲁继峰宋天明卢建雄陈妍张国华
- 关键词：锌肠道微生物肉鸡
