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一种高温耐碱甘露聚糖酶Man5XZ7及其基因和应用: 本发明涉及基因工程领域，具体地，本发明涉及一种高温耐碱甘露聚糖酶Man5XZ7及其基因和应用。其氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。本发明首先所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种性...; 姚斌石鹏君卢海强罗会颖杨培龙黄火清孟昆王亚茹

一种高温耐碱甘露聚糖酶Man5XZ7及其基因和应用: 本发明涉及基因工程领域，具体地，本发明涉及一种高温耐碱甘露聚糖酶Man5XZ7及其基因和应用。其氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。本发明首先所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种性...; 姚斌石鹏君卢海强罗会颖杨培龙黄火清孟昆王亚茹; 文献传递

Achaetomium sp.Xz8来源的甘露聚糖酶Man5Xz8热稳定性的研究: 2015年; 嗜热真菌Achaetomium sp.Xz8来源的甘露聚糖酶Man5Xz8和Humicola sp.Y1来源的嗜热甘露聚糖酶Man5A氨基酸序列一致性高达90.0%,然而两者的酶学性质尤其是最适温度和热稳定性却存在着很大的不同。Man5Xz8的最适温度为50℃,仅在30℃下保持稳定,而Man5A最适温度为70℃,且在50℃下具有良好的热稳定性。为研究不同区域关键氨基酸位点对甘露聚糖酶热稳定性的影响,以Man5Xz8为研究材料,通过生物信息学方法分析,分别构建了单点突变体V124I及△SG。实验结果表明,突变体V124I及△SG和原酶Man5Xz8具有相似的最适p H和最适温度,但在热稳定性方面较原酶有很大提高:在50℃下处理10 min后,突变体V124I的相对剩余酶活力较原酶Man5Xz8提高了26.9%,突变体△SG在50℃下处理1 h保持稳定。通过对甘露聚糖酶不同区域氨基酸位点的研究,发现了与酶热稳定性相关的关键结构区域及位点,为以后更好的研究第5家族的甘露聚糖酶提供了一定的理论指导。; 刘赟卢海强石鹏君谢响明; 关键词：甘露聚糖酶嗜热微生物热稳定性生物信息学

嗜热微生物来源的甘露聚糖酶的克隆表达、热稳定性及催化机理的研究: 随着现代生物技术的发展，甘露聚糖酶做为最主要的半纤维素酶类现已被广泛的应用在饲料，造纸，洗涤剂，食品及石油开采等领域。因嗜热甘露聚糖酶具有较高的反应温度（高于60℃）及良好的热稳定性，使得其在工业生产和科学研究中越来越受...; 卢海强; 关键词：嗜热真菌糖苷水解酶热稳定性; 文献传递

Achaetomium sp.Xz8甘露聚糖酶在毕赤酵母中的表达及其酶学性质分析被引量：7: 2015年; 甘露聚糖酶作为最主要的半纤维素酶类现已被广泛地应用在饲料、造纸、洗涤剂、食品及石油开采等领域。本研究从高温真菌Achaetomium sp.Xz8菌株中利用兼并引物和Thermal asymmetric interlaced PCR（Tail-PCR）的方法克隆获得一个新的糖苷水解酶5家族的甘露聚糖酶基因（man5Xz8）。基因全长1 239bp,序列分析发现其编码412个氨基酸和1个终止密码子,预测的信号肽序列为N端的20个氨基酸。将成熟蛋白序列克隆到毕赤酵母分泌型表达载体p PIC9中,利用甲醇诱导重组酵母菌表达目的蛋白,经SDS-PAGE电泳分析,表达蛋白分子量约55.0 k Da。对其酶学性质进行测定,Man5Xz8的最适p H值为5.0,在p H值9.0可以保持40%以上的酶活性,在p H值5.0~9.0具有良好的p H稳定性。最适作用温度为50℃,并对SDS具有较高的耐受性。以角豆胶为底物,Man5Xz8的比活、Km及Vmax值分别为101.6 U·mg-1、4.4 mg·m L-1、128.2μmol·min-1·mg-1。因此,Man5Xz8为后期研究甘露聚糖酶的工业应用和酸碱催化机制提供了良好的材料。; 李文革石鹏君卢海强姚斌张祺玲戴良英; 关键词：甘露聚糖酶克隆毕赤酵母酶学性质

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卢海强