叶尚勉
- 作品数：6 被引量：12H指数：2
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- HLA-G分子在结直肠癌中的表达及意义
- 2019年
- 目的探讨结直肠癌患者组织中HLA-G的表达及在结直肠癌诊断和预后中的作用。方法用免疫组织化学法检测201例结直肠癌患者组织,比较HLA-G分子表达及其与临床病理指标和生存率的关系。结果 HLA-G分子在结直肠癌患者的表达率为65%(130/201),HLA-G表达在肿瘤部位、肠壁浸润深度、淋巴结转移、疾病分期以及宿主免疫反应方面的差异有统计学意义(P <0. 05)。HLA-G阴性患者的生存率明显高于HLA-G阳性患者,HLA-G的表达是影响结直肠癌患者预后的独立因素(P <0. 05)。结论结直肠癌组织中HLA-G分子有较高表达,HLA-G表达与结直肠癌的预后有关。
- 何煦叶尚勉董丹丹李科
- 关键词：人类白细胞抗原G结直肠癌免疫组织化学
- 雌激素受体核酸适配体在乳腺癌免疫组织化学检测中的应用被引量：5
- 2019年
- 目的筛选出能应用于乳腺癌免疫组织化学检测的雌激素受体(ER)核酸。方法制备ER蛋白,用指数富集的配体系统进化(SELEX)技术筛选出对ER具有高亲和力和特异性的核酸适配体。采用配体-受体相互反应实验来测定合成的ER适配体复合物的亲和力,用生物素化ER适配体和ER单克隆抗体分别作为一抗对105例乳腺癌组织进行免疫组化染色,以检测合成的ER适配体在癌组织中的特异性表达。用Kappa检验进行一致性检验。结果线性回归法计算获得生物素化适配体与ER复合物的解离常数Kd值为(0.34±0.05) nmol/L (n=3,r=0.989),最大结合力(B_(max))为769.23 fmol/(mg prot·nmol^(-1)·L^(-1))。实验结果表明,分别用生物素化ER适配体和ER单克隆抗体分别作为一抗进行免疫组化染色的结果具有高度一致性。其中ER阳性和阴性样本n=105,kappa值=0.943,95%可信区间=0.879～1.006,P<0.05;而ER弱阳性和中度/强表达样本n=75,kappa值=0.805,95%可信区间=0.642～0.967,P<0.05。进一步观察发现,ER适配体和ER抗体能使乳腺癌组织同一部位出现阳性表达,而阴性对照组均无表达。2例子宫内膜癌用生物素化ER适配体检测,癌细胞ER表达均为阳性。结论我们合成的ER适配体在体外能高度结合ER,ER适配体和ER抗体都能检测乳腺癌组织中ER的特异性表达。
- 何煦陈杰叶尚勉董丹丹李科周陶友赵连三
- 关键词：雌激素受体核酸适配体乳腺癌免疫组织化学
- 雌激素受体核酸适配体抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖被引量：2
- 2019年
- 目的 :筛选雌激素受体(estrogen receptor,ER)核酸适配体,并探讨其对乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用。方法 :采用亲和层析技术制备ER蛋白,并用指数富集的配体系统进化技术(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)筛选出ER核酸适配体。采用Scatchard作图法分析ER蛋白和ER核酸适配体的结合亲和力。MTT法检测不同浓度的ER核酸适配体、他莫昔芬和氟维司群处理24、48和72 h后对MCF-7细胞增殖的影响以及不同浓度的雌二醇单药或联合ER核酸适配体、他莫昔芬和氟维司群作用于MCF-7细胞72h后对其增殖的影响。MTT法检测不同浓度的ER核酸适配体对人正常乳腺上皮HMEC细胞增殖的影响。结果 :合成的ER核酸适配体在体外能高度结合ER。不同浓度的ER核酸适配体(10、100和1 000μmol/L)作用72h时,MCF-7细胞的存活率分别为72%、66%和19%,与阴性对照DNA相比,差异均有统计学意义(P值均<0.05);在相同剂量他莫昔芬作用下MCF-7细胞的存活率分别为86%、82%和40%(P值均<0.05),氟维司群作用下MCF-7细胞的存活率分别为53%、9%和4%(P值均<0.05);ER核酸适配体对MCF-7细胞的抑制作用强于他莫昔芬,但弱于氟维司群。ER核酸适配体能显著抑制雌二醇诱导的MCF-7细胞增殖(P <0.05)。ER核酸适配体对人正常乳腺上皮HMEC细胞的增殖无抑制作用(P> 0.05)。结论 :ER核酸适配体可作为ER拮抗剂,其对MCF-7细胞增殖的抑制作用为对ER的选择性拮抗作用,有望用于乳腺癌的治疗。
- 何煦陈杰叶尚勉董丹丹李科
- 关键词：乳腺肿瘤雌激素受体核酸适配体
- 原发性食管粼细胞癌中人类白细胞G的表达及其意义被引量：1
- 2018年
- 目的探讨原发性食管鳞状细胞癌（ESCC）患者肿瘤组织中人类白细胞抗原G（HLA-G）的表达及其在ESCC诊断及预后中的意义。方法采用免疫组织化学SP法检测2013年1月至2018年1月四川省人民医院收治的121例原发性ESCC患者HLA-G的表达，采用方差分析及X。检验分析HLA。G表达与临床病理参数和宿主免疫反应的关系，Kaplan-Meier法对患者进行生存分析，Cox回归模型行多因素分析。结果HLA-G在原发性ESCC患者中表达率为90．9％（110／121），HLA-G表达与组织分化程度（χ^2=41．695，P=0．001）、肿瘤浸润深度（χ^2=120．432，P=0．001）、淋巴结有无转移（χ^2=6．297，P=0．043）、临床TNM分期（χ^2=110．394，P=O．001）有关。不同HLA-G表达水平患者的宿主免疫反应差异有统计学意义（F=3．190，P=0．048）。HLA．G阴性患者的生存率[72．7％（8／11）J高于HLA-G阳性患者[33．9％（20／59）]，差异有统计学意义（χ^2=10．036，P=0．001）。HLA．G的表达和TNM分期是影响原发性ESCC患者预后的独立因素（HR=2．99，95％CI 1．52-5．88，P=0．002；HR=1．95，95％CI 1．47-3．13，P=0．049）。结论HLA-G在ESCC组织中高表达，HLA-G表达与ESCC患者的预后有关。
- 何煦叶尚勉董丹丹李科
- 关键词：食管肿瘤鳞状细胞HLA抗原
- HLA-G在乳腺癌中的表达及意义被引量：2
- 2018年
- 目的探讨乳腺癌患者组织中人类白细胞抗原G(Human leukocyte antigen,HLA-G)的表达及其在乳腺癌诊断和预后中的作用。方法分离纯化HLA-G蛋白,筛选出分泌抗HLA-G单克隆抗体的杂交瘤细胞株,得到抗HLA-G单克隆抗体。用免疫组织化学方法检测235例乳腺癌患者组织中HLA-G的表达,分析HLA-G的表达与各项临床病理指标、宿主免疫反应及生存率之间的关系。结果 HLA-G在乳腺癌患者的表达率为66%(155/235),HLA-G表达与肿瘤大小、临床TNM分期以及淋巴结转移有关。HLA-G阴性病人的生存率明显高于HLA-G阳性病人。结论乳腺癌组织中HLA-G有较高表达,HLA-G的表达与宿主免疫反应及乳腺癌的预后有关,HLA-G的表达可能是影响乳腺癌病人预后的独立因素。
- 何煦何煦叶尚勉叶尚勉
- 关键词：乳腺癌免疫组织化学
- 妊娠早期人脐带血管周围细胞的分离培养及定向分化胰岛样细胞的研究被引量：2
- 2014年
- 目的研究妊娠早期人脐带血管周围细胞（humanumbilical cord perivascular cells，HUCPVC）分离培养条件及定向分化胰岛样细胞能力。方法取患者自愿捐赠的妊娠一期（8～12周）脐带组织，体外分离培养妊娠早期HUCPVC，记录传代代数并观察细胞分化情况；采用免疫组织化学染色法检测细胞表面标志物阶段特异性胚胎抗原1（stage．specificembryonicantigen1，SSEA-1）、SSEA-3、SSEA-4、OCT-4、TRA-1．60和TRA-1-81表达。利用分段培养法（5个阶段）对细胞进行拟胚体诱导和胰岛样细胞定向分化，采用免疫组织化学染色方法检测拟胚体特异标志物甲胎蛋白（α-fetoprotein，AFP）、巢蛋白（Nestin）、平滑肌肌动蛋白（smoothmuscleactin，SMA）表达，采用葡萄糖刺激胰岛素分泌实验检测胰岛素分泌能力。结果成功分离纯化出妊娠早期HUCPVC并可稳定连续传代10代以上，细胞均显著表达干细胞标志物SSEA-3、SSEA-4、OCT-4、TRA-1．60和TRA-1-81，具有分化潜能。经拟胚体体外诱导可形成表面有膜包被的一中空、分层并具有规则球状形态的拟胚体，标志物AFP、Nestin和SMA均呈阳性。可定向分化为独立的胰岛样细胞结构，胰岛素表达阳性；葡萄糖刺激胰岛素分泌实验结果显示，分化的细胞在高糖培养基中的胰岛素含量为（23．2±5．3）mU／L，明显高于低糖培养基中的含量（7．0±0．5）mU／L（t=-7．444，P=0．002）。结论通过分离、传代和诱导，妊娠早期HUCPVC可定向分化为胰岛样细胞结构并分泌胰岛素。
- 曹玫张剑波叶尚勉李浩赵建
- 关键词：妊娠早期拟胚体胰岛样细胞
