周仲楼
- 作品数：18 被引量：41H指数：4
- 供职机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金温州市科技局资助项目浙江省教育厅科研计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- IPS细胞分化诱导法制备视网膜色素上皮细胞移植片的研究
- 金子兵陈洁徐肃仲李英姿周仲楼邓如芝方芳熊薇薇颜婷婷
- 视网膜细胞移植是治疗眼科诸多难治性视网膜疾病的有效治疗之一。由于移植RPE细胞的途径十分有限，以往的细胞眼内移植均采用了视网膜下注射悬浮细胞方法，存在较大的细胞流失错位及生长等问题。该课题成功应用小分子化合物将多能干细胞...
- 关键词：
- 关键词：视网膜疾病
- 表皮生长因子对氧化损伤的人眼Müller细胞增生及迁移的保护作用
- 2012年
- 背景目前认为氧化损伤机制在年龄相关性黄斑变性（AMD）的发病中起着重要作用，主要与血一视网膜屏障的破坏有关，而Mailer细胞是稳定血一视网膜内屏障功能的主要细胞成分。研究表明，表皮生长因子（EGF）可促进实验动物视网膜Muller细胞的增生和迁移，但其对人Muller细胞的作用研究较少。目的探讨EGF对体外氧化损伤的人眼Muller细胞增生和迁移的影响及其作用机制。方法将人眼Maller细胞系MIO—M1细胞进行培养并用胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、第Ⅷ因子、a-平滑肌肌动蛋白（Ot—SMA）、人角蛋白及S-100免疫组织化学法进行鉴定。在无血清DMEM中加入不同质量浓度（0、1、10、30、100mg／L）EGF，用5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）标记法测定MIO—M1细胞的阳性率。根据干预方式的不同将培养细胞分为EGF组、H2O2损伤组、EGF＋H2O2组、葡萄糖氧化酶（GO）组、GO＋EGF组、EGF＋LY294002＋H2O2组，采用MTT比色法测定各组培养细胞的增生情况（A590）。对培养的人眼Muller细胞采用划痕实验观察H2O2损伤条件下0、1、10、30、100mg／LEGF作用24、48、72h后对Miiller细胞增生、迁移的影响；采用Westernblot技术检测EGF对体外不同培养条件下MUller细胞Akt信号传导通路的作用。结果正常培养条件下10、30、100mg／LEGF作用后Muller细胞的增生率分别为28．0％、32．9％、39．O％，明显高于0mg／L、1mg／LEGF组（24．5％、26．2％）。在H2O2和GO分别培养细胞的条件下，高质量浓度的EGF组Muller细胞的吸光度（A570）值明显大于低质量浓度组，各组总体差异有统计学意义（F=23．582，P=0．000）。与EGF＋H2O2组比较，EGF＋LY294002＋H2O2组Muller细胞的吸光度（A570）值明显下降。10mg／LEGF促进Muller细胞迁移的作用最强。0．08mmol／L H2O2作用Mfiller细胞后Akt信号通路激活，提前2h加入外源性EGF后，100mg／LEGF对抗氧化所�
- 陈春丽周仲楼闫东升郑景伟宋宗明
- 关键词：表皮生长因子MÜLLER细胞年龄相关性黄斑变性
- 表皮生长因子对人眼Müller细胞增生迁移的影响及作用机制
- 陈春丽申焕君张宗端周仲楼陈晓燕闫东升宋宗明
- 不同品牌曲安奈德的理化性质及眼用药代动力学和安全性评估
- 李玉莉瞿佳陈洁孙树茂周仲楼南开辉李国星程凌
- miR-182基因表达与肺癌的相关性的研究被引量：2
- 2013年
- 目的分析肺癌局部miR-182的表达水平，考察其与肺癌临床特征的相关性。方法选取2012年3月～2013年5月在我科住院并行手术治疗的非小细胞肺癌患者62例，分离肿瘤组织并提取miR-182，RTPCR方法检测miR-182的表达水平，分析其肺癌临床病例特征之间的相关性。结果miR-182在不同年龄和性别的患者中表达没有差异（P〉0．05）；miR-182在肺癌组织中的表达与浸润程度、淋巴结转移、远处转移和肿瘤分期具有明显的相关性（P〈0．01）。腺癌组织表达miR-182高于鳞癌组织，但其增加趋势相同。结论肿瘤组织miR-182的表达水平与肺癌临床特征具有-定的关联性，并可用于肺癌的临床诊断，具有较好的临床应用前景。
- 周伟鹤金子兵陈惠章岳峰刘勇周仲楼黄宪平
- 关键词：肺癌
- 促红细胞生成素抑制氧化损伤诱导的人眼Müller细胞凋亡被引量：2
- 2015年
- 目的探讨促红细胞生成素(EPO)抑制氧化损伤导致的Müller凋亡的可能性及其分子机制。方法对培养的人眼Müller细胞系MIO-M1细胞采用Brd U标记法和MTT比色法观察正常及过氧化氢(H2O2)或葡萄糖氧化酶(GO)氧化损伤条件下0、0.01、0.1、1、10、30、100 U/m L EPO作用24、48、72 h后对Müller细胞增殖、迁移的影响;采用MTT比色法观察加PI3K/PDK1/PKB(Akt)信号传导通路阻断剂LY294002后Müller细胞增殖的变化;采用ELISA实验观察Müller细胞对EPO的表达和分泌;通过Western-blotting技术检测体外不同条件培养下EPO对ERK1/2及Akt信号传导通路的作用。结果正常培养条件下,EPO有轻度促进Müller细胞增殖迁移的作用,但差异无统计学意义;正常培养条件下,Müller细胞自身不分泌EPO,0.4 mmol/L H2O2致Müller细胞损伤80%时,其培养液内EPO的表达量为正常培养液下的1.42倍;氧化损伤状态下,0.08 mmol/L H2O2或8 U/L GO作用Müller细胞24 h后导致其半数死亡且Akt信号通路激活;提前2 h加入外源性EPO后,发现30 U/m L EPO对抗氧化所致Müller细胞的损伤作用最明显;同时提前2 h加入Akt信号通路阻断剂LY294002后,Akt信号传导通路的保护作用被阻断减弱。结论 EPO对体外正常培养的Müller细胞不具有促进增殖迁移作用;正常培养条件下Müller细胞自身不表达并且不分泌EPO,氧化损伤条件下Müller细胞自身可低分泌EPO;加入外源性EPO后,EPO可能通过Akt信号传导通路对H2O2损伤的Müller细胞发挥保护作用。
- 陈春丽宋宗明贾新国周仲楼汪朝阳
- 关键词：促红细胞生成素MÜLLER细胞增殖年龄相关性黄斑变性
- 姜黄素对过氧化氢诱导的血管内皮细胞损伤的双重作用被引量：16
- 2005年
- 目的:研究姜黄素(Cur)对过氧化氢(H2O2)诱导的血管内皮细胞ECV304的作用及可能机制;方法:胎盘兰计数法分组观察在不同的时间点加入姜黄素后对H2O2诱导的ECV304细胞氧化损伤的作用.流式细胞仪分析细胞周期及细胞凋亡率的变化,试剂盒检测一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量及超歧化物氧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GR)活性的变化.结果:姜黄素0～100 μmol·L-1与H2O2 500 μmol·L-1同时作用5 h,随姜黄素浓度升高细胞存活率升高;25～100 μmol·L-1姜黄素预先作用1 h,再换为H2O2 500 μmol·L-1作用4 h,细胞存活率明显下降;H2O2500 μmol·L-1作用4 h,再加入25～100 μmol·L-1姜黄素作用1 h,细胞存活率也升高.姜黄素对H2O2诱导的细胞凋亡没有明显的影响,但同时作用组、H2O2先作用组S期细胞所占比例升高,姜黄素先作用组S期细胞所占比例下降.同时作用组、H2O2先作用组的SOD、NO、GR水平相对升高,MDA水平下降,姜黄素先作用组的SOD、NO、GR水平相对下降,MDA水平升高.结论:姜黄素对H2O2诱导的血管内皮细胞ECV304有双重效应,即有保护效应也有细胞毒效应,与其作用时间点有关.
- 肖健李校堃郭建红周仲楼
- 关键词：姜黄素ECV304过氧化氢细胞毒作用
- 转铁蛋白对青蒿琥酯体外抗肿瘤活性的增效作用研究被引量：5
- 2008年
- 目的研究转铁蛋白对青蒿琥酯体外抗肿瘤活性的增效作用,观察药物作用后细胞凋亡情况。方法采用MTT法检测青蒿琥酯单用或与转铁蛋白合用对鼻咽癌CNE2细胞的增殖抑制作用,DAPI染色观察CNE2细胞凋亡,流式细胞术分析细胞凋亡率变化。结果青蒿琥酯对CNE2细胞的IC50值为116μg/mL,青蒿琥酯合用转铁蛋白后IC50值降为17.4μg/mL,DAPI染色显示青蒿琥酯合用转铁蛋白作用CNE2细胞24h后,细胞出现明显凋亡现象,流式细胞分析结果显示,与对照组相比,青蒿琥酯合用转铁蛋白组作用24h后,细胞出现明显凋亡现象,而平行进行的青蒿琥酯100μg/mL组相同作用时间没有出现凋亡。结论转铁蛋白对青蒿琥酯体外抗肿瘤活性有较强增效作用,转铁蛋白与青蒿琥酯合用加速了青蒿酯诱导的细胞凋亡,是转铁蛋白增强青蒿琥酯作用的重要机制之一。
- 郑青郭建红周仲楼曾庆平赵文
- 关键词：转铁蛋白青蒿琥酯鼻咽癌CNE2细胞细胞凋亡
- 苦参碱对人宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用研究被引量：5
- 2007年
- 目的探讨苦参碱对人宫颈癌细胞株Hela细胞体外增殖的抑制作用。方法选用人宫颈癌Hela细胞进行体外培养,以0.25～4.0mg/ml的苦参碱分别处理Hela细胞24～72h后,用MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,倒置显微镜和透射电镜进行形态学观察。结果苦参碱对Hela细胞有抑制作用,并呈剂量和时间依赖性;流式细胞仪检测到细胞在苦参碱作用后,细胞凋亡率增加;透射电镜观察发现部分细胞发生凋亡早期改变。结论苦参碱对人宫颈癌Hela细胞具有明显抑制作用,诱导细胞凋亡可能是其机制之一。
- 滕小玲金畅周仲楼王教付小莹
- 关键词：苦参碱宫颈癌凋亡
- MicroRNA-34a抑制葡萄膜黑色素瘤细胞增殖的研究被引量：4
- 2011年
- 该文采用阳离子脂质体Lipofectamine介导的方法将microRNA-34a转染入体外培养的人葡萄膜黑色素瘤细胞M23和SP6.5。应用BrdU法、细胞平板克隆形成实验检测转染microRNA-34a后对细胞增殖的影响,发现M23和SP6.5细胞增殖明显被抑制(P<0.01);并利用流式细胞技术检测转染microRNA-34a后细胞周期的变化,发现细胞停滞于G_1期;同时检测转染microRNA-34a后细胞caspase-3/7酶的活性,发现无明显改变。另外,Real-time PCR检测表明阿霉素处理后M23、SP6.5细胞中microRNA-34a的表达量上调(P<0.01)。用阿霉素处理转染microRNA-34a的M23、SP6.5细胞,检测caspase-3/7酶活性的改变,发现caspase-3/7酶活性显著增加(P<0.01)。本研究表明microRNA-34a通过抑制细胞周期来抑制体外培养的人葡萄膜黑色素瘤细胞的增殖,能够增加细胞对阿霉素的敏感性,但不直接诱导细胞凋亡。
- 王教陈林华周仲楼陈晓燕
- 关键词：葡萄膜黑色素瘤增殖细胞周期阿霉素
