周军媚
- 作品数：29 被引量：62H指数：3
- 供职机构：南华大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 人类心脏发育候选基因KLHL31 RNAi逆转录病毒载体系统的构建与鉴定
- 2011年
- 目的:利用siRNA表达载体构建抑制人类心脏发育候选基因KLHL31表达的pSUPER RNAi载体(pSUPER-KLHL31)。方法:化学合成一对编码短发夹RNA序列的、靶向心脏发育候选基因KLHL31的寡核苷酸链60个碱基,退火,克隆到经BglⅡ、Xho Ⅰ双酶切的pSUPER质粒上,构建重组RNAi质粒(pSUPER-KLHL31),通过酶切鉴定及测序分析验证构建效果,将正确构建的质粒转染大鼠心肌细胞H9c2,建立产生逆转录病毒的细胞克隆。通过Western blotting检测转染pSUPER-KLHL31后细胞中KLHL31蛋白的表达量。结果:pSUPER-KLHL31载体经酶切鉴定及测序分析,结果表明60个碱基成功插入到预计位点,且序列完全一致;重组载体转染包装细胞,可表达绿色荧光蛋白,表明包装成功;Western blotting检测结果显示转染pSUPER-KLHL31的细胞中KLHL31蛋白表达量明显降低。结论:靶向KLHL31的pSUPER RNAi载体构建成功,为进一步从分子水平探讨KLHL31在心脏发育中的功能奠定了基础。
- 周军媚叶湘漓王跃群
- 关键词：心脏发育PSUPERRNAI
- 斑马鱼HLRA基因调控心脏左右不对称的发育
- <正>在胚胎发育过程中左右不对称发育对于心脏的环化、瓣膜形成和房室分隔等都非常重要,左右不对称的缺陷会引起错位导致的各种器官功能上的异常。我们发现HLRA基因可能与左右不对称发育有关。以斑马鱼为模型,通过对HLRA的表达...
- 谢华平周军媚叶湘离刘明唐雄卓赵碧峰雷旻音黄婷吴秀山王跃群
- 文献传递
- SD大鼠SDF-1α基因克隆与序列分析被引量：2
- 2008年
- 目的克隆SD大鼠SDF-1α基因,并进行生物信息学分析。方法采用RT-PCR扩增SDF-1α基因,对扩增产物进行序列的测定,利用Internet和GenBank数据库对测序结果正确的SDF-1α基因进行生物信息学分析。结果克隆了SDF-1α基因,测序结果正确;生物信息学分析表明,SDF-1α基因开放读码为270bp,编码89个氨基酸;同源性分析表明,与人、猫、狗的SDF-1α基因同源性最大。多种组织的半定量RT-PCR研究表明,该基因在心脏、肝脏、肺、脑、肾脏、脾脏、胰脏均有表达,其中脾脏、胰脏表达较高。结论成功克隆SDF-1α基因,对其功能进行了初步预测,为进一步的功能研究打下基础。
- 姚峰周军媚王佐危当恒姜志胜刘录山童中艺
- 关键词：SDF-1Α克隆
- 一个新的睾丸特异表达小鼠基因电子克隆与序列分析被引量：1
- 2010年
- 目的电子克隆小鼠睾丸组织特异表达新的基因。方法运用"数据库消减杂交"筛选出一个在小鼠睾丸中特异表达的新基因(GI:223462116)。结果序列分析显示该cDNA长1 428 bp,有一个801 bp的开放阅读框,编码266个氨基酸,该蛋白质明显的含有4个亲水性区域,2个疏水性区域。结论所克隆的cDNA序列为小鼠的一个新基因。
- 姚峰周军媚陈春芳贺震刘鑫
- 关键词：电子克隆
- 人心脏发育候选基因hole在MAPK信号传导途径中的作用被引量：6
- 2005年
- MAPK信号传导途径是存在于真核细胞中的最广泛的一种调节机制,它与心血管的发育、心肌肥大等心脏疾病的发生有着密切的关系。利用荧光素酶的活性分析讨论人hole基因在MAPK信号途径中的作用。实验表明,COS-7细胞中过表达hole蛋白能够强烈抑制MAPK信号途径的2个下游转录因子AP-1和SRE的转录活性。hole的突变体报道基因分析表明,hole基因可能是通过其N′端的ERK结合区和C′端的多聚脯氨酸序列来行使其抑制作用的。研究表明,该基因可能通过参与MAPK信号途径而在心脏发育的过程中起作用。
- 周军媚吴秀山
- 关键词：心脏病MAPK信号途径
- 心肌特异性Hole转基因小鼠模型的构建与鉴定
- 2013年
- 目的:建立在小鼠心肌细胞中特异性过表达Hole转基因小鼠。方法:构建心肌特异性过表达Hole的转基因载体,显微注射导入小鼠受精卵,通过胚胎移植,获得转基因首建者小鼠。利用PCR检测Hole基因整合情况,并通过实时定量PCR检测Hole基因过表达效率。结果:PCR检测发现有6只小鼠在其基因组上整合有Hole载体基因。实时定量PCR结果显示,在心脏组织中Hole基因的转录本表达明显升高。结论:成功建立了在小鼠心肌细胞中特异性过表达Hole转基因小鼠,为研究Hole基因在心脏发育与相关疾病中的功能及机制提供了动物模型。
- 徐伟周军媚江志刚刘明范雄伟王跃群吴秀山
- 关键词：HOLEGENE心肌细胞心脏小鼠转基因
- 跨膜蛋白hole在心肌肥大发生中的作用
- 人源hole基因(hhole)是我室前期克隆的一个人类心脏发育候选基因, Northern Blot结果显示该基因在心脏组织中高表达,提示其有可能参与心脏的发育及心脏功能的维持。细胞信号途径分析提示其可能通过MAPK信号...
- 李永青周军媚徐伟吴秀山
- 人hole基因的克隆和序列分析
- 2009年
- 目的克隆人的hole基因,并进行生物信息学分析。方法以胚胎心脏cDNA文库为模板,进行PCR扩增得到hole基因的ORF。并进行亚克隆入PMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5α,用Xho1进行酶切和测序鉴定阳性克隆。利用Internet和GeneBank数据库对测序结果正确的hole基因进行生物信息学分析。结果克隆了hole基因,测序结果正确;生物信息学分析表明,hole基因开放读码为960 bp,编码319个氨基酸;同源性分析表明,人的hole与鼠、鸡hole蛋白具有高度同源性。多种组织的半定量RT-PCR研究表明,该基因在心脏、肝脏、肺、脑、肾脏、脾脏、胰脏均有表达,其心脏表达最高。结论成功克隆hole基因,对其功能进行了初步预测,为进一步的功能研究打下基础。
- 姚峰周军媚王佐陈春芳吴端生刘鑫余坚
- 关键词：PCR克隆
- 心脏动脉极的形成
- 2002年
- 目前已发现与生心区形成心管这一过程有密切关系的关键基因和信号分子.对称的生心区后部促使心肌前体细胞形成心脏的流入区域或静脉极.最近在鸡和鼠胚胎中已经鉴定:心肌前体细胞群在咽中胚层中位于早期心管的前部.这种前部导致心脏的流出区域或动脉极处的心肌的产生.因此,脊椎动物的心脏起源于两种心肌前体细胞.这些细胞通过不同的基因程序有规律地出现.心区前部的发现对于解释突变鼠的心脏缺陷和研究人类先天性心脏病有非常重要的意义.
- 周军媚李永青吴秀山
- 关键词：神经嵴
- 青藤碱对吗啡依赖与戒断小鼠脑组织nNOS活性的影响被引量：3
- 2007年
- 目的:观察青藤碱对吗啡依赖与戒断小鼠中枢神经系统中大脑皮层、小脑、脑干的nNOS活性变化的影响。方法:剂量递增法建立小鼠吗啡依赖模型,青藤碱治疗前后用纳洛酮催瘾,观察戒断症状;化学比色法测各脑组织匀浆的nNOS活性。结果:青藤碱可扭转成瘾小鼠的体重下降趋势,减轻戒断症状;使由吗啡依赖与戒断引起异常变化的nNOS活性水平恢复到最终接近对照组水平。结论:青藤碱能显著减轻吗啡依赖小鼠的戒断征状,其机制可能与青藤碱影响各脑组织nNOS活性相关。
- 刘珍郑济芳胡弼刘运莲周军媚
- 关键词：青藤碱吗啡戒断一氧化氮合酶
