周必英
- 作品数：111 被引量：210H指数：10
- 供职机构：遵义医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科技厅社会发展攻关项目重庆市科委地方病重大专项基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学农业科学更多>>
- 卡氏肺孢子菌肺炎大鼠超氧化物歧化酶和过氧化脂质变化的研究被引量：1
- 2011年
- 24只SD大鼠分为卡氏肺孢子菌肺炎感染组(18只)和健康对照组(6只)。感染组以地塞米松磷酸钠3.5mg/(只.次),每周2次,连续8周腹股沟皮下注射SD大鼠,建立卡氏肺孢子菌肺炎动物模型。肺组织印片六亚甲基四胺银染色和肺组织病理切片伊红-苏木素(HE)染色观察实验大鼠肺组织的病理学变化。分光光度法检测肺组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)活力和过氧化脂质(LPO)含量。结果显示,感染组大鼠可见卡氏肺孢子菌包囊并发现典型病理改变;感染组SOD值[(31.49±7.18)U/mgprot]与健康对照组[(54.41±8.97)U/mgprot]相比,差异有统计学意义(P<0.01);感染组LPO值[(2.26±0.21)nmol/mgprott]与健康对照组[(1.63±0.01)nmol/mgprot]相比,差异有统计学意义(P<0.01)。
- 刘兴辉周必英戴晓煌
- 关键词：卡氏肺孢子菌肺炎超氧化物歧化酶过氧化脂质
- 猪带绦虫六钩蚴TSO18基因研究进展被引量：6
- 2009年
- 猪囊尾蚴病是一种严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病，疫苗是预防控制猪囊尾蚴病的重要手段。TSO18基因是猪带绦虫六钩蚴阶段重要的免疫原基因，被认为是最具有前途的疫苗候选基因。该文综述了猪带绦虫六钩蚴TSO18基因的分子生物学及其疫苗开发的研究进展。
- 周必英陈雅棠李文桂
- 关键词：猪带绦虫六钩蚴疫苗
- 乳房曼氏迭宫绦虫裂头蚴病分析被引量：1
- 2014年
- 曼氏裂头蚴病（ Spirometra mansoni ）是由曼氏迭宫绦虫幼虫--裂头蚴寄生于人体组织器官引起的一种寄生虫病。曼氏迭宫绦虫的终宿主主要是犬和猫，人并非其适宜的宿主。裂头蚴在人体内可保持幼虫状态，侵犯脑、眼、口腔、皮下、外阴、尿道、膀胱等组织器官，并在人体内移行，危害远较成虫大。感染乳房者临床报道较少。我科不久前收治1例寄生于乳房皮下及腺体的患者，结合文献报道如下。
- 胡康徐珂周必英孙素红杨伟明
- 关键词：寄生虫乳房
- 细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗免疫小鼠后脾细胞亚群的动态观察被引量：2
- 2010年
- 目的动态观察细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31疫苗免疫小鼠后脾细胞亚群的变化。方法将5×108克隆形成单位(CFU)和5×105CFU疫苗分别采用口服灌胃和鼻腔内接种免疫BALB/c鼠,在免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16、18和20周各剖杀4只小鼠,取脾,分离脾细胞,用流式细胞术(FCM)检测免疫小鼠脾CD4+和CD8+T细胞亚群的百分比,同时设双歧杆菌液体培养基(MRS)对照。结果口服灌胃组的脾CD4+T细胞亚群在免疫后4~10周升高,免疫后6周达最高水平,CD8+T细胞亚群无明显变化;鼻腔内接种组脾CD4+T细胞亚群在免疫后4~8周升高,免疫后6周达最高水平,CD8+T细胞亚群无明显变化。结论 CD4+T细胞亚群在细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗诱导的小鼠免疫应答中起关键作用。
- 周必英陈雅棠李文桂杨梅
- 关键词：细粒棘球绦虫重组BB-EG95-EGA31疫苗脾细胞亚群流式细胞术
- 猪带绦虫重组Bb—TS045W-4B—TSOL18疫苗诱导仔猪的保护性免疫应答被引量：4
- 2015年
- 目的探讨猪带绦虫重组Bb．TS045W-4B．TSOL18疫苗免疫仔猪后，对猪带绦虫卵攻击感染后的保护性免疫应答。方法将20头40日龄健康仔猪按体质量（约15kg）采用随机数字表法分为5组，每组4头。分别为重组b-TS045W．4B—TSOL18疫苗灌胃组、重组Bb—TS045W-4B疫苗灌胃组、重组Bb-TSOLl8疫苗灌胃组、空载体对照组和双歧杆菌液体培养基（MRS）对照组。各疫苗的免疫剂量为1×10“菌落形成单位（CFU），间隔2周免疫1次，共免疫2次。于末次免疫仔猪4周后，各组仔猪用猪带绦虫卵攻击感染，攻击感染后3个月剖杀仔猪，分离猪囊尾蚴，计算减蚴率；前腔静脉取血，分离血清和制备外周血淋巴细胞（PBMC）。酶联免疫吸附试验（ELISA法）检测血清免疫球蛋白（Ig）G、IgGl、lgG2a水平和PBMC培养上清液中白细胞介素（IL）．2、干扰素（IFN）．1、IL4及IL-10水平；四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）检测PBMC增殖情况。结果猪带绦虫重组Bb．TS045W．4B．TSOLl8、重组Bb—TS045W．4B、重组Bb—TSOLl8疫苗灌胃组减蚴率分别为83．09％、71.36％和74．85％。仔猪血清IgG、IgGl和IgG2a水平组间比较差异均有统计学意义（F=132．348、106．336、596．091，P〈0．05）。其中重组Bb-TS045W-4B-TSOL18、重组Bb-TS045W-4B、重组Bb．TSOL18疫苗灌胃组IgG、IgG2a水平[（366．81±3．84）、（334．94±11．65）、（333．52±11．09），（87．74±0．95）、（84．48±0．80）、（84．30±1．09）mg／L]均高于MRS对照组[（245．94±8．81）、（62．61±0．84）mg／L，P均〈0．05]，IgGl水平[（26．55±1．06）、（33．24±1．92）、（32．60±1．94）mg／L]低于MRS对照组[（42．78±0．87）mg／L，P均〈0．05]。仔猪PBMC培养上清原液中IL-2、IFN-1、IL．4和IL．10水平组间比较差异均有统计学意义（F=139．522、1053．102、769．097、962．298，P均〈0．05）。其中重组Bb．TS045W．4B．T
- 贾启刘美辰周泠杨凤娇江楠王灵军周必英
- 关键词：猪带绦虫保护性免疫应答仔猪
- 猪带绦虫重组双歧杆菌疫苗不同保存条件下的稳定性研究被引量：4
- 2015年
- 目的研究猪带绦虫TSO45W-4B基因、TSOL18基因和TSO45W-4B-TSOL18融合基因的重组双歧杆菌(Bb)疫苗在不同保存条件下的稳定性。方法分别将猪带绦虫重组质粒pGEX-TSO45W-4B、pGEX-TSOL18和pGEX-TSO45W-4BTSOL18电转入长双歧杆菌(B.longum),获得阳性菌株pGEX-TSO45W-4B/B.longum、pGEX-TSOL18/B.longum和pGEXTSO45W-4B-TSOL18/B.longum,分别置于不同条件下保存,取出菌液,抽提质粒,电泳检测,进行稳定性分析。结果阳性菌株pGEX-TSO45W-4B/B.longum、pGEX-TSOL18/B.longum和pGEX-TSO45W-4B-TSOL18/B.longum分别在常温下、4℃、-20℃、-80℃、-196℃(液氮中)分别保存48h、1周、1月、2月,抽提质粒,电泳发现阳性菌株pGEX-TSO45W-4B/B.longum、pGEX-TSOL18/B.longum和pGEX-TSO45W-4B-TSOL18/B.longum在液氮中、-80℃、-20℃中比较稳定,而在普通的室温环境下,很快发生质粒丢失现象。结论猪带绦虫TSO45W-4B基因、TSOL18基因和TSO45W-4B-TSOL18融合基因的重组Bb疫苗低温保存最稳定,常温最差,这为猪带绦虫重组Bb疫苗的进一步研究奠定了基础。
- 周必英刘美辰杨凤娇
- 关键词：猪带绦虫稳定性
- 基因工程重组乳酸菌研究进展被引量：4
- 2017年
- 乳酸菌是人和动物肠道内常见的益生菌,具有提供营养、改善胃肠道功能、提高免疫力、抗菌等作用,随着基因工程技术的发展,选择乳酸菌作为载体传递系统,在细菌、病毒、肿瘤、寄生虫等领域构建了一系列重组乳酸菌。本文就基因工程重组乳酸菌的制备及防治效果作一综述。
- 孙俊超周必英
- 关键词：乳酸菌基因工程
- 肺孢子虫六胺银染色方法的改进被引量：8
- 2005年
- 目的改进肺孢子虫染色效果,提高肺孢子虫肺炎的诊断水平。方法给SD大鼠皮下注射地塞米松磷酸钠建立肺孢子虫动物模型,制作肺组织印片,采用改良六亚甲基四胺银进行染色,油镜观察。结果染色效果良好,肺孢子虫包囊结构清晰可辨。结论本方法改进了肺孢子虫染色方法,操作简便易行,效果良好,值得推广应用。
- 周必英戴晓煌万启惠
- 关键词：肺孢子虫六胺银染色
- 猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B疫苗诱导仔猪保护力及其免疫机制研究被引量：7
- 2015年
- 目的构建猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B疫苗,研究该疫苗诱导仔猪产生的保护力及其免疫机制。方法以猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B疫苗1×1011 CFU灌胃免疫40日龄健康仔猪,同时设空载体对照组和双歧杆菌液体培养基(MRS)对照组,每组4头。每两周免疫1次,共免疫2次。于末次免疫后4周,用猪带绦虫卵进行攻击感染,攻击感染后3个月解剖猪体,摘取囊尾蚴,计算减蚴率;前腔静脉取血,分离血清和制备外周血淋巴细胞(PBMC)。酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测血清IgG、IgG1、IgG2a水平和PBMC培养上清液中IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10水平;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测PBMC增殖情况。结果猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B疫苗免疫仔猪获得71.36%的保护力;与空载体对照组和MRS对照组比较,血清IgG和IgG2a水平显著升高(F=95.055、650.293,P<0.05),IgG1水平显著降低(F=78.422,P<0.05);加抗原刺激时,PBMC增殖水平显著升高(F=107.019,P<0.05);PBMC培养上清液中IL-2和IFN-γ水平显著升高(F=229.668、2251.690,P<0.05),IL-4和IL-10水平显著降低(F=274.832、1168.768,P<0.05)。结论猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B疫苗能够诱导仔猪产生一定的保护力,其中Th1型免疫应答在其诱导的保护性免疫机制中起重要作用。
- 江楠刘美辰周泠杨凤娇贾启王灵军周必英
- 关键词：猪带绦虫保护力免疫机制仔猪
- 细粒棘球绦虫重组Bb—Eg95疫苗的构建及鉴定被引量：4
- 2009年
- 目的构建和鉴定细粒棘球绦虫（珞）重组双歧杆菌（rBb）-Eg95疫苗。方法自行设计引物，从细粒棘球蚴包囊中分离原头节，超声粉碎后提取总RNA为模板，通过RT—PCR扩增获得Eg95抗原编码基因．采用BamH I和Eco RI双酶切，定向克隆到大肠埃希菌-双歧杆菌（E．coli—Bb）穿梭表达载体pGEX—IλT中．转化E．coli BL21（DE3）感受态细胞，构建重组质粒pGEX—Eg95。抽提质粒进行双酶切鉴定后，电穿孔转化到B6中，构建细粒棘球绦虫rBb—Eg95疫苗，抽提质粒进行PCR扩增鉴定。结果RT—PCR扩增出471bp的Eg95抗原编码基因；重组质粒用双酶切鉴定可切出4947bp的载体片段和471bp的目的基因片段；以具有氨苄青霉素抗性的rBb中抽提的质粒为模板进行PCR扩增可得到471bp的Eg95基因片段。结论成功构建了细粒棘球绦虫rBb—Eg95疫苗，为该疫苗的开发利用奠定了理论基础。
- 周必英陈雅棠李文桂杨梅
- 关键词：细粒棘球绦虫疫苗DNA
