周春明 作品数:5 被引量:31 H指数:4 供职机构: 广西大学动物科学技术学院 更多>> 发文基金: 广西大学科研基金 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
奶牛附红细胞体感染PCR诊断方法的建立 被引量:15 2005年 为建立特异、敏感、快速的奶牛附红细胞体感染诊断方法,该研究根据本实验室已测得的奶牛附红细胞体16 S r RNA基因序列,设计1对种特异性引物,建立了奶牛附红细胞体的PCR诊断方法。特异性试验和敏感性试验结果表明,该诊断方法与猪肺炎支原体、鸡毒支原体、大肠杆菌、肠道沙门氏菌、葡萄球菌、鸡艾美耳球虫、牛双芽巴贝斯虫无交叉反应,能检测的奶牛附红细胞体最低DNA量为0 .15 4 fg,同时能检测出在4℃存放长达3个月的血样。通过临床血样检测,证明该方法可用于本病的早期诊断。 陈明 黄维义 张为宇 周学光 周春明 韦家周 阳玉梅 张宇关键词:奶牛 附红细胞体 PCR 附红细胞体体外交叉感染初步研究 被引量:4 2006年 陈明 黄维义 张为宇 郑小龙 卢秀红 周春明 韦柳青关键词:附红细胞体 体外 细胞表面 立克次体 细菌鉴定 寄生 附红细胞体感染的诊断研究进展 被引量:7 2006年 陈明 黄维义 莫宗成 周春明关键词:附红细胞体感染 附红细胞体病 畜牧兽医工作者 人畜共患病 经济损失 畜牧业 奶牛附红细胞体16SrRNA基因的克隆测序及系统发育进化树的建立 被引量:1 2006年 为了从分子水平上证实奶牛附红细胞体的存在及研究其分类学地位,利用原核生物16S rRNA基因通用引物对分离纯化的疑似奶牛附红细胞体进行16S rRNA基因的PCR扩增及克隆测序。结果扩增出长约1.5 kb的目的片段,测序结果表明:目的片段长度为1 439 bp,其核苷酸序列与国外已发表的牛温氏附红细胞体(E.wenyoni)的16SrRNA基因片段同源性高达97.1%,暂称为中国广西株(E.wenyoniCGX)。系统发育进化树显示:E.wenyoni和其他血营养菌在系统进化关系上组成了一个大的进化分支,与支原体科、支原体属的病原最接近(75%),而与立克次体科的病原较远(55%)。分析结果支持了Nei mark等和Messick等提出的将这类血营养菌划归支原体科、支原体属的建议。 陈明 黄维义 张为宇 李莉萍 韦家周 周春明关键词:RRNA 克隆 系统发育进化树 奶牛附红细胞体的分类鉴定及诊断方法的建立 被引量:7 2006年 为了从分子水平上确定奶牛附红细胞体(E.wenyoni)的分类学地位及建立奶牛附红细胞体感染诊断方法。本研究通过利用原核生物16S rRNA基因通用引物,对分离得到的奶牛附红细胞体(广西株,E.wenyoni-GX)进行16S rRNA基因的克隆及测序,并建立系统发育进化树;同时根据测序结果设计诊断引物,建立奶牛附红细胞体感染的PCR诊断方法。结果扩增出长约1.5kbp的奶牛附红细胞体的16S rRNA基因片段;特异性试验和敏感性试验表明,所建立的PCR方法与常见支原体、细菌及原虫无交叉反应,能检测奶牛附红细胞体最低DNA量为0.145fg。通过试验结果分析,建议将奶牛附红细胞体这类血营养菌划归入支原体科、支原体属;同时,所建立的PCR诊断方法是特异、敏感、快速的,可应用于临床检测。 陈明 黄维义 张为宇 韦家周 石云良 周春明 张诗新 张宇关键词:附红细胞体 RRNA基因 PCR 克隆 系统发育进化树