唐展云
- 作品数：22 被引量：74H指数：6
- 供职机构：上海第二医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 应用基因治疗技术修复组织创伤的实验研究
- 钱云良李发成崔磊张群陈诗书钱关祥唐展云孙欲晓程枫
- 该研究的目的在于利用重组复制缺陷型腺病毒载体介导，应用VEGF增加随意皮瓣、轴型皮瓣、静脉皮瓣远端新生血管形成，防止缺血造成的皮瓣坏死。该研究利用制备的载体AdCMV-VEGF为复制缺陷性腺病毒，能感染真核细胞并表达VE...
- 关键词：
- 关键词：基因治疗腺病毒血管内皮细胞生长因子
- 基因修饰人肝癌和胃癌“瘤苗”及实验性肿瘤联合基因治疗被引量：1
- 2004年
- 恶性肿瘤基因治疗的临床研究已有10余年,但疗效尚未确定.治疗策略也不下十余种,但何种策略为佳尚无定论.目前采用的策略多数为单一基因治疗,而肿瘤的发生可能涉及多种基因及多种因素,发病过程也是多步骤的.本研究建立一种细胞因子基因工程人肝癌和胃癌细胞"瘤苗",用于经手术切除的肝癌或胃癌患者,消灭微小残存癌细胞,并预防复发转移;或用于无手术指征的患者或手术后复发患者的辅助性治疗措施.探索多种基因及因素的配合进行实验性肿瘤的联合基因治疗研究.首先克隆一系列的治疗基因,构建不同载体及调控元件;然后进行不同基因的联合治疗作用,并与放射治疗相结合;最后还筛选新的肿瘤治疗候选基因,旨在为临床提供更有效的肿瘤基因治疗策略和方案.
- 陈诗书钱关祥夏爱娣张腾飞钱书兵魏道严徐荣婷胡亮王克敏程枫于丽莉杨红英许伟榕唐展云朱敏
- 关键词：瘤苗人肝癌实验性肿瘤联合基因基因修饰
- 荷瘤宿主T细胞信号传导缺陷与基因治疗被引量：1
- 1997年
- 大量研究表明荷瘤宿主T细胞信号传导缺陷导致T细胞功能异常，即T细胞处于无反应状态。而IL-2基因修饰的瘤苗进行基因治疗的动物实验表明在肿瘤部位分泌高浓度IL-2，可以有效地逆转T细胞信号传导缺陷，使T细胞功能恢复，增强机体的抗肿瘤免疫反应，达到抗肿瘤的目的。
- 唐展云
- 关键词：T细胞信号传导基因疗法宿主
- 实验性肿瘤的联合基因治疗研究
- 2004年
- 恶性肿瘤基因治疗的临床研究已有10余年,但疗效尚未确定.治疗策略也不下12种,但何种策略为佳尚无定论.目前采用的策略多数为单一基因治疗,鉴于肿瘤的发生可能涉及多种基因及多种因素,发病过程也是多步骤的,该研究探索多种基因及因素的配合进行实验性肿瘤的联合基因治疗研究.首先克隆一系列的治疗基因,构建不同载体及调控原件,然后进行不同基因的联合治疗作用,并与放射治疗相结合,最后还筛选新的肿瘤治疗候选基因,旨在为临床提供更有效的肿瘤基因治疗策略和方案.
- 陈诗书夏爱娣钱关祥魏道严王克敏唐展云钱书兵糜军赖冠华杨劲松
- 关键词：实验性肿瘤基因治疗克隆细胞因子MHC分子
- 人TNF-α双顺反子逆转录病毒载体的构建及其在成纤维细胞中的表达被引量：4
- 1998年
- 利用脑炎心肌炎病毒的内核糖体进入位点连接人ＴＮＦ－αｃＤＮＡ和选择基因ＮｅｏＲ基因，使ＴＮＦ－α及ＮｅｏＲ基因均受控于病毒ＬＴＲ启动子，将两基因同时转录至同一ｍＲＮＡ，从而构建成人ＴＮＦ－α双顺反子逆转录病毒载体ｐＧＣＥＮ／ＴＮＦ－α．在ＬｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ介导下将其导入包装细胞ＰＡ３１７，Ｇ４１８筛选得单克隆，病毒滴度为１０６ＣＦＵ／ｍｌ重组病毒分泌的细胞株．经ＰＣＲ证明外源基因已整合至细胞基因组，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹显示出单一ＬＲＴ转录本．持续Ｇ４１８筛选能明显促进目的基因ＴＮＦ－α的表达．用重组病毒上清感染小鼠成纤维细胞ＮＩＨ３Ｔ３，Ｇ４１８筛选获得的混合抗性克隆持续高表达ＴＮＦ－α，４０Ｇｙγ线照射后能维持高效表达至７ｄ．实验结果表明，含ＩＲＥＳ的双顺反子逆转录病毒载体将是一个很好的基因转移载体．
- 赖冠华唐展云陈诗书
- 关键词：肿瘤坏死因子逆转录病毒成纤维细胞
- 白细胞介素12基因与HSV TK基因联合治疗小鼠肝癌的研究被引量：8
- 1999年
- 目的 观察白介素１２（ＩＬ１２） 基因与单纯疱疹病毒胸苷激酶（ＨＳＶＴＫ） 基因联合治疗小鼠肝癌的疗效。方法 将ＩＬ１２ 基因和ＨＳＶＴＫ 基因分别转导入小鼠肝癌ＭＭ４５Ｔ－Ｌｉ 细胞，获稳定表达的ＭＭ４５Ｔ－ＬｉＩＬ１２ 和ＭＭ４５Ｔ－ＬｉＴＫ。于Ｂａｌｂｃ 小鼠皮下接种ＭＭ４５Ｔ－Ｌｉ 细胞２ ×１０５ ，待肿瘤长至０－５～１－０ ｃｍ 时，将ＭＭ４５Ｔ．ＬｉＴＫ细胞与经６０ Ｃｏ 照射的ＭＭ４５Ｔ．ＬｉＩＬ１２ 细胞混合，行瘤内注射治疗，于治疗次日，腹腔注射Ｇａｎｃｉｃｌｏｖｉｒ（ＧＣＶ４０ ｍｇ·ｋｇ－ １·ｄ－ １） ，连续注射１０ 天。按同样方法观察对远侧接种的肿瘤的治疗作用，并通过细胞毒Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ） 活性检测及免疫组化染色，探讨其抗肿瘤机制。结果 ＭＭ４５Ｔ．ＬｉＩＬ１２ 与ＨＳＶＴＫＧＣＶ 联合治疗，肿瘤体积显著缩小，生长受到抑制，疗效显著优于单独治疗组（ Ｐ＜ ０．０１） 。有６０％ 小鼠的肿瘤完全消退，且观察２ 个月无肿瘤生长。两者联合治疗，对远侧肿瘤也具有明显的抗肿瘤作用（ Ｐ＜０．０５） 。ＭＭ４５Ｔ．ＬｉＩＬ１２
- 唐展云孙文长陈诗书
- 关键词：肝肿瘤白细胞介素-12基因治疗
- 细菌内同源重组法制备mIL-12腺病毒载体及其体外高效表达被引量：9
- 2000年
- 利用细菌内同源重组法构建含 m IL- 1 2双顺反子重组腺病毒载体 ,其中由 polio IRES连接的 m IL- 1 2 p40和 p35双亚基目的基因片段用 Not +Xho 酶自真核表达载体 pc DNA3/m IL- 1 2中切出 ,亚克隆至经同样酶切的腺病毒穿梭质粒中 ,形成转移质粒 p Adtrack- CMV/m IL- 1 2 ,对之线性化后与腺病毒基因组质粒 p Adeasy- 1共转化 BJ51 83菌 ,抽提经鉴定含目的基因的重组体质粒DNA,转染 2 93细胞 ,包装成重组体腺病毒 Ad- m IL - 1 2 . Southern杂交证实 ,p40和 p35基因已被克隆至 Ad- m IL - 1 2基因组中 ;RT- PCR结果显示 ,Ad- m IL- 1 2感染的 MM45T· Li肿瘤细胞中有p40和 p35基因的表达 ,ELISA检测感染 48h细胞的上清中 m IL- 1 2的含量达 88ng每 1 0 6细胞 ,其体外能刺激小鼠脾脏淋巴细胞的增殖 ,提高 NK细胞活性及诱导 干扰素的产生 .结果表明 ,利用细菌内同源重组法制备的 Ad- m IL- 1 2重组腺病毒载体是一种方便、高效、成功率高的方法 ,所制备的重组体腺毒在体外能有效表达具有生物活性的 m IL- 1 2 ,为今后的体内应用奠定了基础 .
- 魏道严唐展云陈诗书
- 关键词：腺病毒白介素12同源重组
- HSV-TK/GCV系统对小鼠肝癌细胞旁杀伤效应的观察被引量：3
- 1999年
- 目的 研究单纯疱疹病毒-胸苷激酶/9-(1,3-二羟-2-丙氧甲基)鸟嘌呤(HSV-TK/GCV)系统对小鼠肝癌细胞旁杀伤效应。方法 应用逆转录病毒载体介导HSV-TK基因修饰MM45T.Li细胞,命名为M45/TK,将M45/TK细胞或M45/TK细胞与未经基因修饰的M45细胞等比例混合接种Balb/c小鼠皮下,联合应用GCV,观察其致瘤性及其体内的旁杀伤效应。免疫组化分析肿瘤组织中免疫细胞的浸润情况。结果 M45/TK细胞在小鼠体内致瘤性显著下降(P<0.01),说明在体内GCV对M45/TK也很敏感,并且M45/TK细胞在小鼠体内具有明显旁杀伤效应,即肿瘤生长明显受到抑制(P<0.05)。M45/TK细胞联合GCV治疗组的肿瘤组织中有较多的CD4^+,CD8^+淋巴细胞浸润。结论 HSV-TK/GCV系统对小鼠肝癌细胞具有良好的旁杀伤细胞效应,并提示机体的免疫反应,可能参与增强自杀基因系统的旁杀伤效应。
- 唐展云周晓明陈诗书
- 关键词：肝癌自杀基因治疗
- 白细胞介素12对小鼠肝癌基因治疗的实验研究被引量：5
- 1999年
- 目的：研究白细胞介素１２对小鼠肝癌细胞基因治疗效果。方法：利用脑心肌炎病毒（ＥＭＣＶ）及脊髓灰质炎（Ｐｏ－ｌｉｏ）病毒内核糖体进入位点（ＩＲＥＳ），连接ｍＩＬ－１２ Ｐ４０及ｐ３５ ｃＤＮＡｓ和筛选基因新霉术磷酸转移酶（ＮｅｏＲ），克隆至逆转录病毒载体ｐＧＣＥＮ中，使三个基因同时受逆转录病毒载体５’端ＬＴＲ启动子控制，转录至同一ｍＲＮＡ转录本上，从而构建成多顺反子逆转录病毒载体，即ｐＧＣＥＮ／ｍＩＬ－１２。在ＬｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ介导下将ｐＧＣＥＮ／ｍＩＬ－１２转染包装细胞ＰＡ３１７，Ｇ４１８筛选，直至出现阳性克隆（命名为：Ｍ４５／ｍＩＬ－１２），挑取抗性克隆，扩大培养，收集上清，用小鼠成纤维细胞ＮＩＨ３Ｔ３测定病毒滴度。然后用重组逆转录病毒感染小鼠肝癌细胞ＭＭ４５Ｔ．Ｌｉ，Ｇ４１８筛选，直至出现阳性克隆，扩大培养，对阳性克隆进行鉴定。将６０Ｃｏ照射（６０ Ｇｙ）Ｍ４５／ｍＩＬ－１２细胞对荷瘤小鼠进行瘤内接种，每周一次，连续治疗三次，观察其治疗效果。结果：病毒上清中重组逆转录病毒滴度为５×１０~５ＣＦＵ／ｍｌ。 ＰＣＲ及ＲＴ－ＰＣＲ证明外源基因已整合至小鼠肝癌细胞基因组中，以及外源基因在ｍＲＮＡ水平上的表达。
- 唐展云孙文长陈诗书
- 关键词：白细胞介素12基因治疗
- IL-2基因转导涎腺腺样囊性癌细胞的生物学特性变化
- ＜正＞目的:目前临床上对腺样囊性癌的治疗尚缺乏行之有效的方法,本文旨在探索细胞因子基因IL-2治疗腺样囊性癌的可行性。方法:将IL-2基因构建入多顺反子逆转录病毒载体pGCEN中,并将其导入肺高转移性人涎腺腺样囊性癌细胞...
- 孙春晓何荣根张志愿刘兴坤唐展云陈诗书
- 文献传递
