唐科志
- 作品数：93 被引量：258H指数：11
- 供职机构：西南大学柑桔研究所更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划重庆市科技攻关计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 同时检测柑桔4种重要病原的一步法多重PCR检测方法
- 本发明公开了一种同时检测柑桔4种重要病原的一步法多重PCR检测方法，通过对4种重要嫁接传播病原柑桔衰退病毒，柑桔裂皮病类病毒，柑桔碎叶病毒，柑桔黄龙病菌的引物优选，以及对引物浓度，PCR扩增条件等的优化，实现了同时检测柑...
- 刘金香周常勇李中安唐科志王雪峰
- 柑桔黄脉病毒的实时荧光定量RT-PCR 检测试剂盒及检测方法
- 本发明涉及生物检测技术领域，具体涉及一种利用实时荧光定量RT-PCR法对柑桔黄脉病毒（CYVCV）进行检测的引物、试剂盒及检测方法等。本发明针对柑桔黄脉病毒（CYVCV）的实时荧光定量RT-PCR法检测用引物序列如SEQ...
- 陈洪明周彦王雪峰李中安唐科志周常勇
- 文献传递
- 柑橘麻风病毒RT-PCR检测技术研究
- ＜正＞柑橘麻风病是由柑橘麻风病毒（Citrus leprosis virus,CiLV）引起的一类重要柑橘病毒病害,于20世纪20年代首次在巴拉圭发现,主要由短须螨（Brevipalpus spp.）传播。
- 王雪峰李中安周彦唐科志周常勇
- 关键词：RT-PCR
- 文献传递
- 柑橘褐斑病菌信号转导基因研究进展
- 由链格孢菌(Alternaria alternata)引起的柑橘褐斑病(Alternaria brown spot,ABS)是一种严重的真菌病害,近年来在我国柑橘主产区迅速蔓延,造成巨大的经济损失。目前,国内外已经相继开...
- 张倩王洪秀唐科志
- 关键词：信号转导基因
- 文献传递
- 植物组织和单头蚜虫中柑橘衰退病毒的快速分子检测技术被引量：11
- 2010年
- 【目的】探寻一种快速、简便、灵敏而可靠的检测植物组织和单头蚜虫中柑橘衰退病毒的方法。【方法】运用反转录多聚酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)、反转录巢式多聚酶链式反应(reverse transcription nested polymerase chain reaction,RT-nested-PCR)、印记捕获反转录巢式多聚酶链式反应(print capture reverse transcription nested polymerase chain reaction,PC-RT-nested-PCR)方法检测接种Citrus tristeza virus(CTV)四年以上的柚以及采用挤压捕获反转录巢式多聚酶链式反应(squash capture reverse transcription nested polymerase chain reaction,SC-RT-nested-PCR)检测单头蚜虫中CTV,并比较几种方法的检出率、灵敏度以及SC-RT-nested-PCR方法的有效性。【结果】对染病柚的总核酸或印迹稀释后检测,RT-PCR、RT-nested-PCR、PC-RT-nested-PCR的检测限分别为10-3、10-5和10-1倍。用质粒梯度稀释后模板进行nested-PCR检测,灵敏度达到13-14拷贝·μL-1。饲毒一周后的蚜虫经SC-RT-nested-PCR检测,除在健康琯溪蜜柚上饲喂的蚜虫未检测到目标条带外,其余在感病琯溪蜜柚上饲喂的蚜虫体内都获得132bp的目标片段。【结论】PC-RT-nested-PCR和RT-nested-PCR方法具有相同的检出率,SC-RT-nested-PCR检测单头蚜虫非常有效,PC-RT-nested-PCR和SC-RT-nested-PCR都勿需提取核酸,适用于柑橘苗木和接穗的无毒认证以及柑橘衰退病的流行监测和蚜传机理研究。
- 刘永清曹孟籍王雪峰李中安唐科志周常勇
- 关键词：柑橘衰退病毒分子检测植物组织
- 基于SSR标记的中国亚洲韧皮杆菌种群结构研究被引量：4
- 2014年
- 目的亚洲韧皮部杆菌是柑橘黄龙病病原。通过筛选SSR(Simple sequence repeat)位点,分析中国境内亚洲韧皮部杆菌(‘Candidatus Liberibacter asiaticus’)的群体结构。方法根据已报道亚洲韧皮部杆菌基因组上的25个SSR位点,使用中国不同地理来源的样品,对报道的SSR位点进行筛选,找出其中适宜进行中国样品群体结构分析的位点。应用PCR的方法,对收集的中国境内的285个亚洲韧皮部杆菌相应SSR位点进行扩增,聚丙烯酰胺凝胶电泳。所得电泳图导入软件Quantity One 4.5.0读取产物的碱基数。通过Pop Gen version1.31软件评估选出的位点和不同地理来源的样品的多态性,分别使用软件Powermarker 3.25和structure 2.3.4进行聚类分析。结果共选出5个SSR位点可用于中国种群结构研究,Nei's多样性指数0.1542—0.9556。其中Las A位点多态性最高,有效等位基因数NE=22.5,Nei's多样性指数H=0.9556。通过这5个位点分析中国境内8个不同地理来源的样品,发现云南省样品存在较高多态性,NE=5.7,H=0.6580。8个地理种群间的遗传距离0.0236—0.5786,遗传相似度0.5607—0.9767,广西和四川遗传距离最大,遗传相似度最小。Powermarker软件以UPGMA方法进行聚类分析的结果显示,所有样品分为两个组群,四川和云南为一个组群;福建、浙江、贵州、广东、广西和江西为一个组群。Structure软件分析也得出了相似的结果,云南和四川样品的种群构成较为单一,90%以上个体为同一组群,而其他6个地理来源不同程度的为两个组群的混合。结论基于5个SSR位点分析中国境内的Ca.L.asiaticus表明其可能存在两种不同的群体结构,为进一步研究中国柑橘黄龙病的发生和流行规律提供了有价值的线索。
- 黄爱军苏华楠王雪峰唐科志李中安周常勇
- 关键词：柑橘黄龙病种群结构
- 应用多重PCR技术同步检测柑橘4种重要嫁接传播病原(英文)被引量：2
- 2014年
- 柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV),柑橘碎叶病毒(Citrus tatter-leaf virus,CTLV),柑橘裂皮病类病毒(Citrus exocortis viroid,CEVd)和柑橘黄龙病(Huanglongbing,HLB)亚洲种病原(Candidatus liberobacter asiaticus)是重要的柑橘嫁接传播病原。本文建立了同时检测HLB病菌、CTV、CEVd和CTLV 4种柑橘嫁接病原的一步法、双温多重PCR检测技术体系,同时在体系中设置内参基因。应用该体系快速评价了4种嫁接传播病原在田问侵染情况,结果表明28个田间样品CTV、CEVd、CTLV和HLB感染率分别为89.3%、17.9%、10.7%和28.6%,接近半数样品为混合感染。并且将该方法应用于快速评价茎尖嫁接苗病毒的脱除情况。
- 刘金香周常勇唐科志李玲娣刘科宏田晓李中安
- 关键词：柑橘衰退病毒柑橘碎叶病毒多重PCR
- 柑桔木质陷孔病类病毒贵州分离物的分子鉴定
- 2009年
- 从采自贵州感染了啤酒花矮化类病毒(Hopstunt viroid,HSVd)的柑桔植株中抽提总核酸,通过一对鉴别引物,经RT-PCR扩增初步筛选出柑桔木质陷孔病类病毒(Citrus cachexia viroid,CCaVd)。扩增该类病毒的全长核苷酸片段,通过克隆和测序,结果发现,该片段全长298 bp,与GenBank中报道的木质陷孔病类病毒分离物同源性达到96%以上。这是中国发生的木质陷孔病类病毒的分子生物学特征的首次报道。
- 王雪峰唐科志李中安周彦兰建强周常勇
- 关键词：分子生物学特征
- 应用PCR技术快速检测柑桔溃疡病的研究被引量：15
- 2005年
- 应用PCR检测柑桔溃疡病,所用引物为5'TTGGTG TCGTCGCTTGTAT 3'和5'CACGGGTGCAAAAAATCT3'.从病样的叶片、果皮和枝皮抽提溃疡病菌的PCR扩增,其产物经琼脂粮凝胶电泳,产生大约220bp的特征条带,与纯培养溃疡病菌的PCR产物一致.试验比较两种核酸抽提方法,微量快速抽提法的灵敏度明显高于高盐抽提法.有症状病样品的不同部位均能检测到溃疡病;病株的无症状叶片、果皮、枝皮有部分检测到病菌.病果园健康植株大多数检测不到病菌,少数植株PCR产物电泳务带较弱.取样量以10～20mg为宜.该PCR技术可用于快速检测柑桔溃疡病.
- 唐科志周常勇王雪峰周彦刘科宏刘英
- 关键词：柑桔溃疡病溃疡病菌病株PCR产物抽提方法
- 柑橘麻风病毒RT-PCR检测技术研究
- 柑橘麻风病是由柑橘麻风病毒(Citrus leprosis virus,CiLV)引起的一类重要柑橘病毒病害。本文在国内首次建立了检测cirv的RT-PCR技术体系，为CiLV快速诊断提供依据，确保中国柑橘的安全生产。
- WANG Xue-feng王雪峰LI Zhong-an李中安ZHOU Yan周彦TANG Ke-zhi唐科志ZHOU Chang-yong周常勇
- 关键词：病理机制分子检测
