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唐馨: 作品数：15 被引量：22H指数：3; 供职机构：新疆大学生命科学与技术学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金广州市科技计划项目博士科研启动基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

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黄粉虫抗菌肽TmAMP3m在大肠杆菌中的高效表达及其应用: 本发明公开黄粉虫抗菌肽TmAMP3m及其在大肠杆菌中高效表达的方法。利用GenBank公布的黄粉虫抗菌肽序列设计特异引物，以RT-PCR法从黄粉虫体内克隆了抗菌肽基因，并将其突变成TmAMP3m，将基因TmAMP3m亚克...; 刘忠渊张富春唐馨

水稻OsWRKY17基因定位表达载体的构建(英文): 2012年; [目的]研究水稻OsWRKY17基因的生理生化特性,确定OsWRKY17蛋白在植物中的定位。[方法]根据GenBank数据库中OsWRKY17全序列设计引物,进行OsWRKY17的RT-PCR扩增,克隆了OsWRKY17基因,将该片段与带绿色荧光蛋白(GFP)基因的质粒载体pBinGFP重组,将构建正确的表达载体pBinGFP-OsWRKY17通过农杆菌介导的花蕾浸泡法转化到拟南芥中。[结果]经菌落PCR与酶切鉴定表明成功构建了Os-WRKY17基因与GFP融合的植物表达载体pBin-GFP/OsWRKY17,并成功将OsWRKY17基因整合到拟南芥的基因组中,获得了抗性植株。[结论]OsWRKY17基因表达载体的构建为研究该基因的生理生化特性奠定了基础。; 王小兰唐馨刘忠渊; 关键词：GFP基因

黄粉虫抗菌肽TmAMP3在大肠杆菌中的高效表达及活性检测被引量：2: 2011年; 昆虫抗菌肽具有广谱抗菌活性,克隆黄粉虫Tenebrio molitor抗菌肽基因,进行原核表达和活性检测,为昆虫抗菌肽推广应用奠定一定基础。根据GenBank公布的黄粉虫抗菌肽序列设计特异引物,以RT-PCR法从黄粉虫体内克隆了抗菌肽基因TmAMP3,将其亚克隆至pET-30a表达载体中,转化到大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中进行原核表达,SDS-PAGE检测融合蛋白的表达,同时检测生物活性。结果表明我们成功构建了重组质粒pET-30a-TmAMP3,大部分目的蛋白呈可溶性分泌表达。经Ni2+亲和层析,获得较纯融合蛋白HIS-TmAMP3,诱导表达的融合蛋白使BL21转化菌生长受到一定程度的抑制。融合蛋白在100℃煮沸10h、与pH2～12的缓冲液混匀后,依然保持稳定的抗菌活性,具有较强的稳定性。同时检测了融合蛋白对5种菌株的最小抑菌浓度(minimun inhibitory concentration,MIC)。本研究为具有稳定活性抗菌肽进行大规模生产发酵提供了理论基础。; 唐馨毛新芳热西力·克来木刘忠渊; 关键词：黄粉虫抗菌肽蛋白纯化抗菌活性

水稻OsWRKY78与GFP融合基因的拟南芥转化及亚细胞定位: 2012年; [目的]确定OsWRKY78蛋白在植物中的定位。[方法]根据GenBank数据库中OsWRKY78全序列设计引物,进行OsWRKY78的RT-PCR扩增,克隆了OsWRKY78基因,将该片段与带绿色荧光蛋白(GFP)基因的质粒载体pBinGFP重组,并对重组载体进行菌液PCR和酶切验证,最后利用农杆菌介导的花蕾浸泡法将重组载体转化到拟南芥中,对其亚细胞定位进行研究。[结果]试验克隆得到了pBinGFP-OsWRKY78重组载体,经菌落PCR与酶切检测表明构建的表达载体正确,其转化到拟南芥中后得到了转基因植株,荧光显微镜检测结果表明,OsWRKY78基因表达产物主要定位在细胞核中。[结论]该研究结果为深入研究OsWRKY78基因的功能及其在相关信号传导中的作用奠定了基础,也为进一步研究OsWRKY78基因与褐飞虱之间的关系提供了理论依据。; 刘顺枝张美唐馨王小兰; 关键词：绿色荧光蛋白基因亚细胞定位

OsWRKY79基因克隆和植物表达载体的构建: 2011年; WRKY是植物体中重要的转录因子,克隆水稻OsWRKY79基因将为其在植物体内的定位和功能研究奠定基础。根据GenBank公布的OsWRKY79基因序列设计特异引物,以RT-PCR法从水稻幼苗中克隆OsWRKY79基因,将其亚克隆至含有GFP基因的pBinGFP表达载体中,经菌落PCR和酶切鉴定,成功构建了重组质粒pBinGFP-OsWRKY79。; 唐馨刘忠渊王小兰; 关键词：绿色荧光蛋白基因克隆

一种重组突变的黄粉虫抗菌肽的高效表达及其应用: 本发明公开一种突变的黄粉虫抗菌肽及其制备获得方法及其应用。所述的突变的黄粉虫抗菌肽具有如序列表SEQ ID NO.1所示的碱基序列，全长为195bp，其编码由序列表中序列表SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列中65个氨...; 刘忠渊张富春唐馨

新疆家蚕抗菌肽在毕赤酵母中表达及活性研究被引量：3: 2011年; 目的:在毕赤酵母中表达新疆家蚕抗菌肽基因(Cecropin-XJ)并检测其活性。方法:根据作者实验室已克隆获得的新疆家蚕抗菌肽Cecropin-XJ基因设计引物,通过PCR方法扩增Cecropin-XJ,将PCR产物和表达载体pPIC9K用EcoRⅠ及NotⅠ双酶切,构建重组表达质粒pPIC9K-Cecropin-XJ,酶切及测序正确后,电转化到毕赤酵母GS115,对分泌表达的重组蛋白进行活性检测。结果:PCR扩增获得192 bp Cecropin-XJ,成功构建pPIC9K-Cecropin-XJ,优化诱导条件证明在pH 6的BMMY培养液中,0.5%甲醇诱导约48h后,获得的表达产物活性较强,对多种革兰氏阴性菌和阳性菌具有抗菌活性,在100℃条件下,其活性可维持100min以上。结论:新疆家蚕抗菌肽在毕赤酵母中分泌表达,为大规模发酵生产奠定了基础。; 唐馨王慧热西力.克来木毛新芳刘忠渊; 关键词：新疆家蚕抗菌肽毕赤酵母分泌表达抑菌活性

水稻OsWRKY17基因定位表达载体的构建: 2012年; [目的]研究水稻OsWRKY17基因的生理生化特性,确定OsWRKY17蛋白在植物中的定位。[方法]根据GenBank数据库中Os-WRKY17全序列设计引物,进行OsWRKY17的RT-PCR扩增,克隆了该基因,将该片段与带绿色荧光蛋白(GFP)基因的质粒载体pBinG-FP重组,将构建正确的表达载体pBinGFP-OsWRKY17通过农杆菌介导的花蕾浸泡法转化到拟南芥中。[结果]经菌落PCR与酶切鉴定表明成功构建了OsWRKY17基因与GFP融合的植物表达载体pBinGFP-OsWRKY17,并成功将OsWRKY17基因整合到拟南芥的基因组中,获得了抗性植株。[结论]OsWRKY17基因表达载体的构建为研究该基因的生理生化特性奠定了基础。; 王小兰唐馨刘忠渊; 关键词：GFP基因

水稻OsWRKY78与GFP融合基因的拟南芥转化及亚细胞定位(英文)被引量：1: 2012年; [目的]确定OsWRKY78蛋白在植物中的定位。[方法]根据GenBank数据库中OsWRKY78全序列设计引物,进行OsWRKY78的RT-PCR扩增,克隆了OsWRKY78基因,将该片段与带绿色荧光蛋白(GFP) 基因的质粒载体pBinGFP重组,并对重组载体进行菌液PCR和酶切验证,最后利用农杆菌介导的花蕾浸泡法将重组载体转化到拟南芥中,对其亚细胞定为进行研究。[结果]试验克隆得到了pBinGFP-OsWRKY78重组载体,经菌落PCR与酶切检测表明构建的表达载体正确,其转化到拟南芥中后得到了转基因植株,荧光显微镜检测结果表明,OsWRKY78基因表达产物主要定位在细胞核中。[结论]该研究结果为深入研究OsWRKY78基因的功能及其在相关信号传导中的作用奠定了基础,也为进一步研究OsWRKY78基因与褐飞虱之间的关系提供了理论依据。; 刘顺枝张美唐馨王小兰; 关键词：GENE FLUORESCENT GENE VECTOR SUBCELLULAR

抗菌肽的研究现状和挑战被引量：7: 2019年; 抗菌肽(AMPs)广泛存在于生物体内,可以协助机体抵御外源微生物的侵害,是生物体先天性防御系统中的重要组成成分。普遍认为,抗菌肽通过膜损伤机制,破坏微生物细胞膜或细胞壁的完整性,达到抑杀微生物的目的。然而,越来越多的证据表明抗菌肽还存在非膜损伤机制,作用于胞内靶位点杀伤细胞。由于其独特的作用机制及广谱抗菌活性,抗菌肽被应用于各行各业。但是,抗菌肽的推广应用也面临着诸多难题,如生物稳定性、抗菌活性的维持和微生物耐受性等。主要对抗菌肽的种类、作用机制、微生物对抗菌肽耐受性的产生机制及抗菌肽的应用和挑战进行综述。; 唐馨毛新芳马彬云苟萍; 关键词：抗菌肽抗菌机制耐受性

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