姚小艳
- 作品数:13 被引量:6H指数:1
- 供职机构:南方医科大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 一种人泛素偶联酶UbcH10单克隆抗体杂交瘤DY01及单克隆抗体
- 本发明公开了一种人泛素偶联酶UbcH10单克隆抗体杂交瘤DY01及单克隆抗体。抗人泛素偶联酶UbcH10单克隆抗体杂交瘤DY01,于2010年11月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMC...
- 杜红延姚小艳徐伟文李明
- 抗人hnRNP A1单克隆抗体的制备及在颅咽管瘤组织中的应用被引量:1
- 2008年
- 目的制备核不均一核糖核蛋白A1(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1,hnRNP A1)的单克隆抗体,探讨hnRNP A1蛋白的生物学功能。方法利用重组hnRNP A1蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞和同系小鼠的骨髓瘤细胞SP2/0进行常规融合,通过间接ELISA的筛选和有限稀释克隆化,获得鼠抗hnRNPA1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,通过ELISA、Western Blot和免疫组织化学实验等方法分别对其效价和特异性进行鉴定。结果成功地建立了3株稳定分泌抗hnRNPA1的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为E006、E009和E012。3株单克隆抗体的免疫球蛋白亚类均为IgG1。3株单克隆抗体通过组织化学实验和Western Blot实验都能特异性地结合真核细胞内源性的hnRNPA1蛋白。结论获得了效价高、特异性好的抗hnRNP A1蛋白的单克隆抗体,这为进一步研究hnRNP A1的生物学功能及它在癌发生事件中的作用奠定了基础。
- 王穗海赵玉梅黄湘潘华政李明姚小艳
- 关键词:HNRNPAL抗体单克隆组织化学
- 抗人双特异性蛋白磷酸化酶Dusp23单克隆抗体的制备及鉴定
- 2009年
- 目的制备高亲和力、高特异性的抗人双特异性磷酸化酶23(Dusp23)单克隆抗体,并对其生物学特性进行鉴定,为Dusp23功能的研究奠定基础。方法以纯化的原核表达Dusp23为免疫原,免疫BALB/c小鼠,待免疫小鼠血清效价满足融合需要,取其脾细胞与Sp2/0细胞融合,经多次筛选及克隆化建立可稳定分泌抗Dusp23单克隆抗体的杂交瘤细胞株,将细胞株打入BALB/c小鼠腹腔制备腹水,用ProteinG亲合层析柱纯化所得腹水获得纯化抗体,ELISA及Western-blot检测抗体的效价和亲和力,并用亚型鉴定试纸条鉴定单克隆抗体的亚型。利用纯化后的两株单克隆抗体对临床收集的肝癌组织标本进行免疫组化分析。结果筛选到2株(N012和N013)可以稳定分泌人双特异性磷酸化酶23(Dusp23)单克隆抗体的细胞株,并对其进行纯化和鉴定,两株杂交瘤细胞培养上清效价分别为1:5120和1:2560,腹水效价分别为1:25600和1:12800,以肝癌细胞HepG2和重组Dusp23蛋白为抗原,利用纯化后的两株抗体Western-blot鉴定结果均在预期位置出现阳性条带。两株杂交瘤细胞分泌抗体的亚型鉴定N012和N013均为IgG1型,轻链均为κ型。两株抗体分别与临床肝癌组织标本免疫组化结果均为阳性。结论成功制备两株能特异性识别Dusp23的单克隆抗体,为进一步研究Dusp23的生物学功能,揭示其与肿瘤发生发展之间的关系奠定了基础。
- 杜红延杨学习姚小艳李明
- 关键词:单克隆抗体
- 联合免疫在高通量单克隆抗体制备中的初步评价与分析被引量:1
- 2007年
- 目的了解联合免疫在高通量单克隆抗体制备中的意义。方法对本室两年来105次联合免疫和单一抗原免疫的融合进行回顾性分析。结果联合免疫的融合率、建株率、最终成功率与单一抗原免疫均无明显差异,但所花费时间短、免疫成本及融合成本低。结论联合免疫方案短期内可使单克隆抗体的产出率显著提高,制备周期明显缩短,是一种可以选择的高通量制备单克隆抗体策略。
- 徐伟文徐洲稳郝文波姚小艳王穗海李明
- 关键词:联合免疫单克隆抗体高通量
- 一种人泛素偶联酶UbcH10单克隆抗体杂交瘤DY01及单克隆抗体
- 本发明公开了一种人泛素偶联酶UbcH10单克隆抗体杂交瘤DY01及单克隆抗体。抗人泛素偶联酶UbcH10单克隆抗体杂交瘤DY01,于2010年11月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMC...
- 杜红延姚小艳徐伟文李明
- 文献传递
- 抗人骨唾液蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
- 2011年
- 目的制备高亲和力、高特异性的抗人骨唾液蛋白(BSP)单克隆抗体(mAb),并对其生物学特性进行鉴定,为BSP作为乳腺癌骨转移临床诊断靶点的研究奠定基础。方法重组BSP蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0细胞融合,经筛选建立可稳定分泌抗BSPmAb细胞株,制备腹腔积液,ProteinG纯化。ELISA检测抗体的效价和亲和力,并用亚型鉴定试纸条鉴定mAb的亚型。应用Western blotting检测mAb的特异性,进一步利用纯化的mAb经免疫组织化学法检测乳腺癌细胞MDA-MB-231中BSP的表达情况。结果获得9株抗BSPmAb细胞株,选择其中2株(D001和D002)进一步鉴定,其上清效价分别为1:5120和1:10240,腹腔积液效价分别为1:25600和1:51200。2株抗体亚型均为IgG1型,轻链均为K型。Western blotting结果均在预期位置出现阳性条带。利用此2株细胞株所得抗体均可在乳腺癌细胞MDA-MB-231中检测到BSP的表达。结论成功制备能特异性识别BSP的mAb,为进一步研究BSP的生物学功能以及对BSP作为乳腺癌骨转移的标志物进行临床评价奠定基础。
- 杜红延接力刚姚小艳李明
- 关键词:乳腺肿瘤
- 一种人泛素偶联酶UbcH10单克隆抗体杂交瘤DY03及单克隆抗体
- 本发明公开了一种人泛素偶联酶UbcH10单克隆抗体杂交瘤DY03及单克隆抗体。抗人泛素偶联酶UbcH10单克隆抗体杂交瘤DY03,于2010年11月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMC...
- 杜红延姚小艳徐伟文李明
- 文献传递
- 抗人双特异性蛋白磷酸化酶18单克隆抗体的制备及鉴定被引量:1
- 2009年
- 目的制备高亲和力、高特异性的抗人双特异性磷酸化酶18(Dusp18)单克隆抗体,并对其生物学特性进行鉴定,为Dusp18功能的研究奠定基础。方法重组Dusp18免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经筛选建立可稳定分泌抗Dusp18的单抗细胞株,制备腹腔积液,ProteinG纯化所得腹腔积液,ELISA及Westernblotting检测抗体的效价和亲和力,用亚型鉴定试纸条鉴定单克隆抗体的亚型。应用免疫组织化学检测Dusp18在肝癌组织中的表达情况。结果获得两株(F003和F004)单抗,上清效价分别为1:5120和1:10240,腹腔积液效价分别为1:25600和1:51200,Westernblotting结果均在预期位置出现阳性条带。利用两株抗体均可在肝癌组织中检测到Dusp18的表达。两株抗体亚型均为IgG1型,轻链均为k型。结论成功制备能特异性识别Dusp18的单克隆抗体,为进一步研究Dusp1的生物学功能,揭示其与肿瘤发生、发展之间的关系奠定了基础。
- 杜红延姚小艳杨学习吴英松徐伟文李明
- 关键词:抗体单克隆
- 一种人泛素偶联酶UbcH10单克隆抗体杂交瘤DY03及单克隆抗体
- 本发明公开了一种人泛素偶联酶UbcH10单克隆抗体杂交瘤DY03及单克隆抗体。抗人泛素偶联酶UbcH10单克隆抗体杂交瘤DY03,于2010年11月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMC...
- 杜红延姚小艳徐伟文李明
- 一种人泛素偶联酶UbcH10单克隆抗体杂交瘤DY02及单克隆抗体
- 本发明公开了一种人泛素偶联酶UbcH10单克隆抗体杂交瘤DY02及单克隆抗体。抗人泛素偶联酶UbcH10单克隆抗体杂交瘤DY02,于2010年11月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMC...
- 杜红延姚小艳徐伟文李明
- 文献传递