孙世琪
- 作品数:195 被引量:215H指数:7
- 供职机构:中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生一般工业技术更多>>
- 猪水泡病病毒HK′1/70株基因组全长cDNA的构建及其序列测定被引量:1
- 2007年
- 从实验感染猪水泡病病毒(SVDV)的乳鼠组织中提取RNA,利用长距离的RACE技术,扩增出覆盖SVDVHK′1/70株全基因组的2个忠实性的cDNA重叠片段(3′PCR片段和5′PCR片段),分别克隆进pGEM-T Easy载体。利用AatⅡ和BssHⅡ酶切含5′PCR片段的重组质粒,回收目的片段,定向克隆于含3′PCR片段的重组质粒,构建出了SVDV HK′1/70株全长cDNA重组质粒,然后进行序列测定。结果表明,HK′1/70株基因组全基因组序列长7 401 nt(poly A除外),其中5′NCR长743 nt,该毒株蛋白编码区的核苷酸序列为6 558 nt,编码一个长2 185个氨基酸的聚合蛋白,3′NCR长102 nt,其后是至少含有74个A碱基的poly A尾。在HK′1/70株全长cDNA序列的5′端引入了T7启动子序列,在poly A3′端引入了Psp1406Ⅰ识别序列。通过序列同源性和进化树分析,结果表明,HK′1/70属于第Ⅱ抗原遗传群,SVDV与CB5的遗传关系最近,且位于CB5遗传进化树的分支上。HK′1/70株全长cDNA的序列测定及构建,为拯救SVDV和在分子水平进一步深入研究SVDV打下坚实的基础。
- 郑海学刘湘涛尚佑军张淼涛冯霞白兴文吴锦艳吕建亮孙世琪尹双辉郭建宏谢庆阁
- 关键词:猪水泡病病毒RACE全长CDNA克隆分子克隆
- 一种基于ORF2抗原功能区的检测猪圆环病的方法
- 一种基于ORF2抗原功能区的检测猪圆环病的方法,以PCV2 ORF2上的特定氨基酸区段(113-147aa)为目标,将其与GST融合表达得到GST-ORF2-E融合蛋白,利用亲和层析柱将融合蛋白纯化后作为抗原包被ELIS...
- 郭慧琛孙世琪刘湘涛尹双辉尚佑军殷宏才学鹏
- 文献传递
- O型口蹄疫病毒中和抗体液相阻断ELISA检测试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种O型口蹄疫病毒中和抗体液相阻断ELISA检测试剂盒及其应用。所述的液相阻断ELISA试剂盒中包含用作包被抗体的O型口蹄疫病毒中和抗体Ab1、用作反应抗原的O型口蹄疫病毒样颗粒抗原以及用作检测抗体的生物素标...
- 孙世琪张韵郭慧琛董虎李昊洲白满元尹双辉滕志东谭书桢吴金恩周静静魏甜丁耀忠
- 口蹄疫-塞内卡二联病毒样颗粒疫苗及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种口蹄疫‑塞内卡二联病毒样颗粒疫苗及其制备方法和应用,属于动物疫苗与兽用生物制品技术领域。本发明以口蹄疫(O型和A型)病毒样颗粒和塞内卡A型病毒样颗粒为抗原,制备新型二联病毒样颗粒疫苗,并通过确定配苗工艺、...
- 郭慧琛孙世琪宋河涛白满元丁耀忠尹双辉张韵董虎滕志东周静静吴金恩
- 猪细小病毒VLPs抗体检测试剂盒及其制备方法、应用
- 本发明公开了猪细小病毒VLPs抗体检测试剂盒及其制备方法、应用,其检测试剂盒包括预包被猪细小病毒VLPs的酶标板、封闭液、样品稀释液、酶结合物、浓缩洗涤液、酶底物溶液和终止液。本发明是首次采用猪细小病毒的病毒样颗粒作为包...
- 郭慧琛孙世琪白满元韩世充董虎宋品魏衍全张韵殷宏
- 文献传递
- 口蹄疫病毒多基因重组质粒在BHK-21细胞中的表达被引量:3
- 2003年
- 利用定点突变的原理 ,获得包含有口蹄疫病毒P1,2A ,3C及部分 2B编码区的目的基因片段 ,KpnⅠ和XbaⅠ双酶切后 ,定向克隆于真核表达质粒载体pcDNA3 1(+) ,经筛选、鉴定及DNA序列分析后 ,将重组质粒pcDNA3.1 P12X3C转染BHK 2 1细胞 ,通过双抗体夹心ELISA方法和间接免疫荧光标记方法 ,检测细胞中表达的口蹄疫病毒抗原。结果表明 ,口蹄疫病毒基因片段正确克隆到真核表达质粒载体上 ,重组质粒pcDNA3.1 P12X3C可在BHK 2
- 郭慧琛刘在新孙世琪卢增军周广清祁淑云靳野刘湘涛谢庆阁
- 关键词:口蹄疫病毒真核表达质粒细胞
- 一种耐热型口蹄疫重组病毒株及其在制备口蹄疫灭活疫苗中的应用
- 本发明公开了一种耐热型口蹄疫重组病毒株及其在制备口蹄疫灭活疫苗中的应用。本发明所述的一种耐热型口蹄疫重组病毒株,命名为rM10,其是由SEQ ID NO.1所示的感染性cDNA通过病毒拯救获得的。实验证明,该重组病毒株的...
- 郭慧琛孙世琪董虎卢源录张韵白满元吴金恩茹嘉喜尹双辉冯霞马军武
- 文献传递
- 犬细小病毒中和单域抗体的筛选及应用
- 本发明属于生物技术领域,具体涉及犬细小病毒抗体的筛选及应用,尤其涉及犬细小病毒中和单域抗体的筛选及应用;具体公开了一种种犬细小病毒中和单域抗体或其抗原结合片段,所述中和单域抗体或其抗原结合片段的免疫原性风险低,能有效阻断...
- 郭慧琛孙世琪穆素雨谭书桢尹双辉董虎张韵王嘉宁白满元吴金恩滕志东
- 猪细小病毒的病毒样颗粒的制备及用途
- 本发明公开一种猪细小病毒的病毒样颗粒、其制备方法及应用。本发明的猪细小病毒的病毒样颗粒的制备方法是:对猪细小病毒VP2基因进行优化,得到优化的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的猪细小病毒VP2基因,将优化的VP2基...
- 郭慧琛孙世琪宋品董虎常艳燕魏衍全张韵茹嘉喜刘湘涛殷宏
- 文献传递
- 免疫增强重组流感病毒体
- 2004年
- 自英国医生Edward Tenner提出免疫接种的概念之后,疾病的预防已成为提高人类生活质量的最高要求.由于病原不断进化,自然免疫反应不可能实现理想的免疫保护,而且由于病原体可能影响宿主的免疫反应,甚至在一定程度上抑制宿主免疫系统的抗感染能力,因此,需要在对病原分子生物学、致病机理以及病原与免疫系统间相互作用的综合理解基础上,研究更安全、有效的免疫方法.
- 郭慧琛孙世琪刘在新谢庆阁
- 关键词:免疫增强免疫接种自然免疫