孙慧勤
- 作品数：70 被引量：273H指数：10
- 供职机构：第三军医大学军事预防医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学农业科学更多>>
- 案例教学法在防原医学教学中的作用
- 在防原医学教学中始终强调以学员为认知主体的作用,注重培养学员应用知识解决问题的综合能力,通过引入案例教学法联系实际,构建相关学习情境,在此情景中设置和发现问题创建调动学员学习积极性,有利思维的环节;针对问题讲解和讨论解决...
- 孙慧勤邹仲敏李蓉徐辉罗成基冉新泽粟永萍
- 关键词：防原医学案例教学法
- 文献传递
- 微波辐射对主要组织修复细胞的效应及影响
- 目的 观察微波辐射对其增殖、迁移、凋亡及细胞周期作用的影响,以进一步明确其生物效应及可能的毒理学意义.方法 采用CH310T1/2(小鼠成纤维细胞株)及VE(人肺静脉内皮细胞株)培养,以不同功率(峰值功率密度各为0,30...
- 孙慧勤粟永萍杨涛郝娜邹仲敏王钰程红缨周青高鹏冉新泽
- 左旋多巴诱发异动症大鼠模型的制作及其纹状体c-fos和ENK表达研究
- 目的探讨左旋多巴(L-dopa)诱发帕金森病(PD)大鼠异动症模型的建立与行为学特点,以及多巴胺受体激动剂与拮抗剂对异动症大鼠不自主运动的影响。研究多巴胺D2受体激动剂和拮抗剂对左旋多巴诱发的LID大鼠纹状体区脑啡肽(E...
- 孙慧勤
- 关键词：左旋多巴异动症脑啡肽多巴胺D2受体
- 文献传递
- hPDGF-A／hBD2双基因修饰骨髓源间充质干细胞外源基因体外与体内的表达被引量：3
- 2009年
- 本研究观察腺病毒介导hPDGF-A/hBD2双基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSC)体外以及移植后体内局部的外源基因表达情况。将已成功构建和包装的hPDGF-A/hBD2双基因共表达腺病毒体外感染原代分离培养的BM-MSC后,采用免疫荧光细胞化学法检测目的基因蛋白的表达。收集经重组腺病毒感染的BM-MSC的无血清培养上清,采用划痕试验检测培养上清中分泌的hPDGF-A的促迁移效应。将重组腺病毒感染的BM-MSC局部点状注射至大鼠放射创伤复合伤创面,在各时相点进行冰冻切片并观察创面移植的BMSC的分布,同时采用免疫组织化学的方法观察外源基因的表达。结果表明:在体外重组腺病毒感染后的大鼠BM-MSC表达报告基因EGFP。免疫荧光细胞化学检测显示双基因修饰的BM-MSC表达hPDGF-A和hBD2。划痕实验证实双基因修饰BMSC培养上清组在8、12、24和30小时的愈合面积百分比显著高于对照组(p<0.05)。荧光显微镜观察大鼠创面移植的外源性基因修饰的BM-MSC显示,至少在移植后2周之内BM-MSC可以较高水平地表达以EGFP为指示的外源基因。创面免疫组织化学染色表明,外源基因从第3天开始表达,第7天达到高峰,第21天仍有少量表达。结论:hPDGF-A/hBD2双基因修饰BM-MSC在体外、体内均可使目的基因得到有效表达,成为hPDGF-A/hBD2双基因修饰BMSC促进难愈创面愈合的基础。
- 郝磊孙慧勤郭晓姝闫国和罗成基程天民粟永萍邹仲敏
- 关键词：间充质干细胞创伤愈合
- 左旋多巴诱发异动症大鼠模型的制作及其行为学研究被引量：4
- 2009年
- 目的探讨左旋多巴(L-dopa)诱发帕金森病(PD)大鼠异动症模型的建立,以及多巴胺受体激动剂与拮抗剂对异动症大鼠不自主运动的影响。方法6-羟多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)立体定向注射制备偏侧PD大鼠模型并给予L-dopa+苄丝肼治疗21d,对其异常不自主运动(AIM)进行录像并评分,观察肢体运动功能及旋转行为改变情况。对出现异动症的大鼠给予多巴胺受体激动剂和拮抗剂并观察其行为学改变。结果PD大鼠在接受L-dopa慢性治疗后出现不自主运动,第3天评分:(31.13±0.32)分,肢体运动功能在接受治疗过程中同时改善。D2受体激动剂可诱发大鼠不自主运动(48.24±1.27)分,D2受体拮抗剂可减轻L-dopa诱发的大鼠不自主运动(41.93±2.27)分,但同时拮抗L-dopa运动功能改善效应。结论慢性脉冲式L-do-pa治疗PD大鼠可以诱发大鼠AIM,与人类L-dopa诱导的异动症(LID)具有相似的特点,可作为研究异动症的动物模型。
- 孙慧勤陈先文李芳许奇王烈成李光武
- 关键词：左旋多巴帕金森病疾病模型动物
- 基因捕获技术的现状及应用被引量：1
- 2014年
- 随着越来越多生物基因组测序的完成,生物医学研究已进入后基因组时代。基因捕获技术由于其在克隆、发现新基因及揭示基因功能方面具有独特的优点,已成为功能基因组时代研究的有力工具,在生物医学研究各个领域的应用日趋广泛。主要对基因捕获技术的原理、分类、一般操作流程、优缺点及基因捕获在发育生物学、新基因鉴定、干细胞分化、肿瘤和生殖医学研究方面的应用作一综述,为相关研究者提供借鉴。
- 王明科孙慧勤粟永萍邹仲敏
- 关键词：发育生物学干细胞分化肿瘤生殖医学
- 3种不同survivin基因启动子驱动Apoptin表达的重组慢病毒构建及体外抑瘤效果比较被引量：2
- 2012年
- 目的构建3种不同长度的survivin基因启动子融合6×his标签Apoptin cDNA的重组慢病毒载体,经鉴定后行慢病毒包装并感染人结直肠癌细胞(SW480),体外实验观察并比较抑瘤效果。方法克隆3种不同长度的人survivin基因启动子(160、270、987 bp)和Apoptin-6×his cDNA,将其分别连接到pMD18-T载体并在该载体上完成survivin基因启动子和Apoptin基因组装。将组装好的表达盒构建入polyA改造后的慢病毒载体FG12中,利用三质粒包装系统包装成慢病毒。为观察重组慢病毒的抑瘤效果,以最适MOI值感染SW480肿瘤细胞后第5天及第30天,利用AnnexinV-PE/7-AAD凋亡试剂盒和流式细胞术检测细胞凋亡和周期变化,Western blot检测Apoptin-6×his表达。结果成功构建3种重组慢病毒载体,经包装浓缩后获得高滴度病毒,可以有效地感染目的细胞(感染效率大于80%)。体外结果提示病毒感染的SW480可以正确表达Apoptin-6×his蛋白,并能在感染后第30天出现明显的凋亡/坏死。其中,含有270 bp启动子的慢病毒抑瘤作用更为明显。结论采用270 bp survivin启动子,apoptin基因构建的重组慢病毒在靶细胞中显示出较好的抑瘤效果。
- 叶枫钟波但国蓉姜帆赛燕赵吉清孙慧勤梁后杰邹仲敏
- 关键词：SURVIVIN启动子慢病毒肿瘤特异性
- 去甲二氢愈创木酸抗血管生成的鸡胚绒毛尿囊膜实验观察被引量：16
- 2000年
- 孙慧勤陈意生史景泉卞修武邹仲敏
- 关键词：胶质瘤微血管密度去甲二氢愈创木酸
- 新基因mgt-16反转录病毒载体的构建及其在小鼠间充质干细胞中的表达被引量：1
- 2014年
- 目的构建表达小鼠新基因mgt-16的反转录病毒载体,并观察其在小鼠胚胎间充质干细胞C3H/10T1/2(简称10T1/2细胞)中的表达。方法以含小鼠新基因mgt-16的DNA序列为模板PCR扩增得到mgt-16编码序列,T-A克隆后测序获得pMD18T-16质粒,与真核表达载体pEGFP-N1酶切、连接、转化,通过PCR、酶切鉴定和测序获得正确的pEGFP-N1-16载体。将pEGFP-N1-16载体中含mgt-16的片段克隆至反转录病毒载体pLEGFP-N1,通过酶切鉴定和测序获得正确的pLEGFP-N1-16反转录病毒载体。将pLEGFP-N1-16转染反转录病毒包装细胞Phoenix,制备携带mgt-16与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)的反转录病毒,感染小鼠间充质干细胞10T1/2后,400μg/mL G418筛选获得稳定表达mgt-16与EGFP融合蛋白的10T1/2细胞克隆。荧光显微镜观察MGT-16蛋白的表达及亚细胞定位。结果 PCR扩增得到大小约300bp的mgt-16条带,T-A克隆后测序显示获得的mgt-16序列与Genbank数据库序列相同。构建的pEGFP-N1-16载体经PCR、酶切鉴定和测序验证构建成功,构建的反转录病毒载体pLEGFP-N1-16经酶切鉴定和测序验证构建成功。荧光显微镜观察MGT-16主要在Phoenix细胞和小鼠间充质干细胞的细胞质表达,核周表达水平较高。结论成功构建了小鼠新基因mgt-16的反转录病毒载体,并在间充质干细胞中表达,为进一步研究新基因mgt-16在间充质干细胞中的功能奠定了基础。
- 王明科孙慧勤程晋姜帆粟永萍邹仲敏
- 关键词：过表达反转录病毒间质干细胞
- 融合蛋白TETPH、表达载体及其构建方法
- 本发明涉及“融合蛋白TETPH、表达载体及其构建方法”，采用RT-PCR法克隆sTrail基因，经引物延伸法构建sTrail-uPAc-his融合基因并亚克隆至原核表达载体pET-32a中，该表达载体经诱导成功获约38k...
- 熊玮闫国和梁宇佳缪殿南戴晓天孙慧勤
- 文献传递
