孙艳
- 作品数：32 被引量：71H指数：5
- 供职机构：广东药科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金国务院侨办重点学科基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学历史地理更多>>
- 小鼠胚胎神经干细胞的体外生长特性和相关基因的表达被引量：2
- 2006年
- 目的:观察小鼠胚胎神经干细胞的体外生长特性并检测其相关基因的表达。方法:实验于2005-02/06在暨南大学医学院中心实验室进行。①取妊娠13.5d昆明小鼠分离胚胎大脑中的神经干细胞,用添加碱性成纤维细胞生长因子的无血清培养基进行体外培养,取培养3d的神经球接种于多聚赖氨酸包被的培养瓶,用含血清的培养基诱导分化。②免疫细胞化学检测细胞表面抗原。③四甲基偶氮唑盐法绘制生长曲线。④流式细胞术检测细胞周期。⑤反转录-聚合酶链反应和免疫细胞化学技术对神经干细胞进行鉴定。结果:①胚胎神经干细胞及其分化细胞的抗原表达:血清诱导8h,分化细胞中(8.9±5.6)%细胞呈Tubulin阳性,(87.5±7.4)%细胞胞浆呈胶质纤维酸性蛋白阳性表达。未诱导细胞近100%呈巢蛋白阳性,仅有极少数细胞Tubulin阳性或胶质纤维酸性蛋白阳性。②胚胎神经干细胞的细胞周期:从小鼠胚胎大脑获取的神经干细胞3d左右进入指数生长期;原代培养细胞83.8%处于静止期/DNA合成前期。③原代与传代细胞均表达巢蛋白mRNA,聚集形成的神经球巢蛋白阳性。血清诱导4h胚胎神经干细胞开始转录神经元相关基因Tau和胶质细胞相关基因胶质纤维酸性蛋白。结论:从小鼠胚胎大脑可成功分离获得大量胚胎神经干细胞,并在含碱性成纤维细胞生长因子的条件培养基中迅速增殖,血清诱导下分化生成神经元和星型胶质细胞。
- 山爱景郭国庆孙艳沈伟哉
- 关键词：细胞分化细胞逆转录聚合酶链反应
- 小鼠胎肝间充质干细胞在缺血脑组织中迁移机制的研究被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨小鼠胎肝间充质干细胞(flMSC_S)在缺血脑组织中迁移的机制。方法:分离和培养小鼠flMSC_S,制备小鼠脑缺血再灌注模型,RT-PCR方法检测小鼠flMSC_S表达的趋化因子受体及其唯一配体基质细胞来源因子1α(SDF-1α)在缺血损伤脑组织中的mRNA表达;Westem blot检测SDF-1α蛋白在缺血损伤脑组织中的表达;免疫组织化学检测SDF-1α在缺血损伤脑组织中的表达和分布;Boyden chamber法进行SDF-1α诱导flMSC_S迁移的体外实验。结果:flMSC_S经RT-PCR检测表达趋化因子受体CR1,CR3,CXCR1,CXCR2,CXCR3,CXCR4。脑缺血损伤侧脑组织SDF-1αmRNA表达显著增高,与正常脑组织SDF-1αmRNA比,具有显著差异(P<0.01)。Western blot检测显示缺血侧脑组织SDF-1α蛋白表达量在12、24、48 h分别为0.35±0.05,0.88±0.04,0.74±0.07,与正常脑组织SDF-1α蛋白(0.22±0.04)比,差异有显著性(P<0.01)。免疫组织化学检测显示,缺血损伤后24 h,缺血侧脑皮质,海马等缺血边缘区SDF-1α表达显著增高,缺血对侧及正常脑组织未见明显SDF-1α表达。体外迁移实验显示SDF-1α体外可以趋化flMSC_S发生迁移,CXCR4阻断抗体可以阻断SDF-1α诱导flMSC_S发生的迁移。结论:SDF-1α可以诱导flMSC_S发生迁移,趋化因子受体CXCR4及其配体SDF-1α的相互作用是flMSC_S在缺血损伤脑组织中迁移的机制之一。
- 孙艳何冬梅张洹
- 关键词：胎肝间充质干细胞脑缺血趋化因子
- 药学院生物专业免疫学教学改革的探索和实践
- 2014年
- 通过对药学院生物专业免疫学实验教学改革的探索，与生物技术专业紧密相连，调整教学内容，适应专业发展；加强讨论式、启发式教学，实验教学与科研相结合，提高学生科研思维和实践能力；多种教学手段联合应用，提高免疫学的教学质量和教学效果。
- 张帆孙艳王辉吴凤麟刘剑
- 关键词：免疫学教学改革教学与科研结合
- 阻断Sonic Hedgehog信号对不同人肝癌细胞生长的影响被引量：5
- 2016年
- 目的:研究阻断Sonic Hedgehog(Shh)信号对不同人肝癌细胞生长的影响,探讨阻断Shh信号抑制肝癌细胞生长的机制。方法:RT-PCR法检测Shh信号分子在3株人肝癌细胞(BEL-7402、Huh7和HepG2)中的表达,并检测Shh阻断抗体作用后BEL-7402细胞Shh信号效应分子表达变化;MTT法检测人肝癌细胞增殖活性;流式细胞术检测人肝癌细胞凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白表达。结果:Shh信号分子在3株人肝癌细胞中均有表达,Shh阻断抗体可以下调Shh信号效应分子patched(Ptch)、Gli1和Gli2的表达;Shh阻断抗体可以抑制3株肝癌细胞生长,增加G0/G1期细胞,并诱导细胞凋亡;Shh阻断抗体作用后,BEL-7402细胞pro-caspase-3、pro-caspase-8和pro-caspase-9蛋白表达水平下降,cleaved caspase-3、cleaved caspase-8和cleaved caspase-9蛋白表达水平升高。结论:阻断Shh信号可抑制Shh高表达的人肝癌细胞生长,阻滞细胞周期于G0/G1期,并诱导肝癌细胞凋亡。
- 刘爱梅余功旺黄莉霞孙艳迟作华
- 关键词：肝癌细胞HEDGEHOG细胞凋亡
- 一种融合抗体ScFv-Fc通用表达载体的构建被引量：2
- 2011年
- 为了构建一个可供自由替换的ScFv区,表达人小分子融合抗体ScFv-Fc的通用载体,利用RT-PCR技术扩增人抗体IgG1的Fc片段克隆至毕赤酵母表达载体pPICZα,将一段人工合成的互补寡核苷酸链插入重组载体pPICZα/Fc中Fc区的上游,引入2个可供小分子抗体ScFv-Fc的ScFv区自由替换的限制性酶切位点。分别扩增人抗狂犬病毒以及抗乙型肝炎表面抗原的ScFv片段,克隆至已构建的通用载体pPICZα/Fc,在毕赤酵母中诱导表达。进一步在1L条件下对活性抗体进行发酵,并利用proteinA亲和层析柱进行纯化。应用酵母基因组PCR、ELISA、Western blotting、活性检测等试验对此小分子抗体的表达进行生物学及免疫学分析。结果表明具有狂犬病毒抗原结合活性以及乙肝表面抗原结合活性的人源抗体分子均获得成功表达,1L发酵条件下表达量达到20～30mg/L,protein A亲和层析纯化后纯度>95%。研究构建了可用于功能性抗体分子ScFv-Fc筛选和表达的通用载体并对其发酵、纯化条件进行了摸索,为重组抗体分子诊断、治疗试剂的开发以及抗体的人源化奠定了物质基础。
- 王丁丁苏曼曼胡丽莉袁丽颖孙艳汪炬颜炜群
- 关键词：毕赤酵母
- 小鼠胎肝间充质干细胞的分离及鉴定
- 2008年
- 目的分离培养小鼠胎肝间充质干细胞(flMSCs)。方法改良贴壁法分离BABL/c胎鼠肝脏间充质干细胞,测定生长曲线检测增殖能力;流式细胞术分析细胞周期和表型;体外诱导贴壁细胞向脂肪、软骨、骨组织分化并鉴定。结果贴壁法分离的flMSCs呈均一梭形,细胞倍增时间约为24h。83.76%±2.88%的flMSCs处于G0/G1期,表达间质系列表面标志CD44、CD29,不表达造血细胞表面标志CD45、CD11b;诱导后能向脂肪、软骨、骨组织方向分化。结论贴壁法可以分离flMSCs,传代有助其纯化;flMSCs具有强增殖能力和分化潜能,是理想的干细胞治疗来源。
- 孙艳张洹
- 关键词：胎肝间充质干细胞
- 我国研究生教育质量评估与保障体系分析被引量：6
- 2008年
- 研究生质量保障体系的建设是近年来国内外高等教育发展的一个新趋势。我国的研究生质量保障体系也处在积极的研究和探索中,文章结合我国学位与研究生教育评估体系现状,提出了我国研究生质量评估与保障体系建设中应进一步完善的几个方面内容。
- 李朋军孙艳
- 关键词：研究生教育
- 点地梅提取物saxifragifolin B体外抗实体瘤活性研究被引量：4
- 2011年
- 目的:初步探讨点地梅提取物saxifragifolin B体外抗实体瘤活性及其作用机制。方法:Saxifragifo-lin B作用于体外培养的人肝癌细胞BEL-7402、肺癌细胞A549和胃癌细胞SGC7901。光镜下观察肿瘤细胞形态学变化;AO/EB双染法观察细胞死亡;MTT法检测细胞增殖水平,计算IC50;流式细胞术检测细胞凋亡和坏死。结果:Saxifragifolin B诱导3种实体瘤细胞出现凋亡样和坏死样改变。Saxifragifolin B以浓度依赖的方式抑制肿瘤生长,作用24 h IC50分别为13.13μmol/L、9.61μmol/L和11.64μmol/L。Saxifragifolin B可以诱导肿瘤细胞凋亡和坏死。结论:点地梅提取物saxifragifolin B具有抗多种实体瘤的活性,其作用机制可能与诱导细胞凋亡和促进细胞坏死有关。
- 李朋军沈伟哉叶文才张冬梅孙艳
- 关键词：BEL-7402细胞A549细胞SGC7901细胞
- TNF-α、INF-γ和EPO与肿瘤伴ACD造血功能低下的相关性被引量：4
- 2009年
- 目的:探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(INF-γ)和红细胞生成素(EPO)对肿瘤伴慢性病贫血(ACD)造血功能的影响。方法:检测肿瘤患者铁代谢参数;ELISA法检测患者血清TNF-α、IFN-γ和EPO水平;观察3种细胞因子及患者血清对骨髓红系集落生成单位(CFU-E)生成的影响。结果:肿瘤伴ACD患者血清EPO水平高于正常对照,而低于IDA患者;血清TNF-α、IFN-γ水平显著升高,且与血球压积、血清铁水平负相关;TNF-α、IFN-γ可抑制正常骨髓CFU-E生成,患者血清可抑制自身骨髓CFU-E生成,rhEPO可部分纠正细胞因子对CFU-E的抑制。结论:TNFα-、IFN-γ和EPO与肿瘤伴ACD造血功能低下有关。
- 孙艳刘新月张纯刘革修
- 关键词：干扰素Γ肿瘤慢性病贫血
- 一种重组可溶性hSHH-N蛋白的制备方法
- 本发明公开了一种重组可溶性hSHH-N蛋白的制备方法。该方法是以SEQIDNO:1~2为引物扩增出hSHH-N基因，再连接到载体pET43.1a(+)构建重组表达载体，转化大肠杆菌，IPTG诱导其产生重组可溶性hSHH-...
- 孙艳王丁丁胡耀华金嘉怡苏晓朴
- 文献传递
