孙雨婷
- 作品数:20 被引量:46H指数:5
- 供职机构:西北农林科技大学更多>>
- 发文基金:公益性行业(农业)科研专项陕西省重大科技创新专项计划项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 奶山羊短链脂肪酸受体GPR41 CDS区的克隆及组织表达分析
- 随着生活水平的提高,人们对肉、奶等食品的需求不仅是色、香、味,更是营养价值的全面提高。转基因技术在改良家畜的肉质、产奶、产毛等经济性状方面具有不可替代的优势,目前己成为畜禽抗病育种及生产性能改良的重要手段。了解家畜脂代谢...
- 孙雨婷罗军王伟赵旺生石恒波
- 关键词:奶山羊转基因克隆
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- 奶山羊乳腺甘露糖6磷酸受体结合蛋白1(TIP47)CDS区的克隆和组织表达分析
- PAT家族蛋白是脂滴表面重要的结构蛋白,包括perilipin、 ADRP、T1P47等。本研究采用RT PCR技术克隆了西农萨能奶山羊TIP47基因的CDS区序列,并且通过RT-qPCR技术检测了该基因在山羊各组织中的...
- 郝娟罗军赵旺生孙雨婷
- 关键词:奶山羊
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- 短链脂肪酸受体GPR41基因在奶山羊乳腺上皮细胞脂代谢中的作用研究
- 脂肪是乳中重要的组成部分,其含量高低影响着乳品质。泌乳时期乳腺是反刍动物合成乳脂的主要器官之一。G蛋白偶联受体41(G protein-coupled receptor 41,GPR41)是多细胞生物体内G蛋白偶联受体超...
- 孙雨婷
- 关键词:奶山羊乳腺上皮细胞短链脂肪酸
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- 一种快速测定山羊乳腺上皮细胞脂肪酸成分的方法
- 本发明公开了一种快速测定山羊乳腺上皮细胞脂肪酸成分的方法,步骤包括:利用细胞刮铲收集细胞;应用超声波破碎细胞并利用硫酸/甲醇溶液进行脂肪酸甲酯化;利用HCl/正己烷溶液进行萃取抽提;利用无水Na<Sub>2</Sub>S...
- 罗军朱江江孙雨婷石恒波李君王伟
- 文献传递
- 西农萨能羊乙酰/丙二酸单酰基转移酶基因重组腺病毒载体的构建被引量:2
- 2012年
- 本研究旨在通过构建西农萨能羊脂肪酸合酶(FASN)基因乙酰/丙二酸单酰基转移酶(MAT)区域的重组腺病毒载体,为研究其在奶山羊乳腺上皮细胞中过表达以及功能和作用机制做准备。根据GenBank收录的西农萨能羊MAT序列设计引物,PCR扩增并克隆测序。将目的基因连接到穿梭载体pAdTrack/CMV上并线性化后,转化含有腺病毒骨架载体pAdEasyⅠ的E.coli Bj5183感受态细胞进行同源重组,得到重组腺病毒质粒pAd-MAT-HIS,并用PacⅠ酶切鉴定,将经过PacⅠ线性化的pAd-MAT-HIS转染HEK 293细胞进行病毒包装和扩增,用LaSRT法测定病毒滴度。将本次克隆的MAT序列与GenBank收录的山羊序列对比发现,在601bp处碱基由G转变为A,导致氨基酸序列由丙氨酸(Ala)201转变为苏氨酸(Thr)201。酶切鉴定、绿色荧光蛋白观察、PCR及Western blot检测均证明,重组腺病毒质粒构建成功,病毒滴度为2×109 PFU.mL-1。本研究成功构建了重组腺病毒pAdEasy-MAT-HIS。
- 朱江江罗军王紫骞许会芬孙雨婷石恒波郝娟赵丽媛
- 关键词:奶山羊重组腺病毒
- 山羊脂肪酸合酶基因(FASN)启动子结构与功能的初步分析被引量:6
- 2012年
- 本研究旨在对山羊脂肪酸合酶基因(Fatty acid synthase,FASN)启动子进行结构与功能的初步分析,进而对其转录调控机制进行探讨。采用PCR技术从西农萨能羊基因组DNA中克隆FASN基因启动子,通过缺失分析,构建7个包含不同缺失片段的荧光素酶报告基因载体,转染山羊乳腺上皮细胞和MCF-7细胞,利用双荧光素酶系统检测不同片段的启动活性。结果表明,克隆得到FASN基因的启动调控序列2 589bp,生物信息学分析发现,该启动子序列含有典型的启动转录元件TATA-box和E-box,分别位于转录起始位点(+1)上游-41和-74bp处。报告基因分析表明,启动子核心区域定位在-293~-79bp,在线软件预测发现,该区域含有Sp1、NF-Y、USF和SREBP等转录因子结合位点。结果显示,FASN基因启动子前端存在负调控元件,Sp1、NF-Y、USF和SREBP等转录因子可能参与FASN基因的转录调控。
- 李君葛婷罗军孙雨婷石恒波朱江江郝娟赵旺生
- 关键词:山羊脂肪酸合酶启动子山羊乳腺上皮细胞
- 腺病毒介导的shRNA对奶山羊乳腺上皮细胞嗜乳脂蛋白基因表达的影响
- 嗜乳脂蛋白(BTN)作为乳腺特异表达蛋白,其命名来源于希腊术语‘butyros’和‘philos'以此反映它们与乳脂球形成的密切关系。本研究通过包装扩繁好的腺病毒感染乳腺上皮细胞,检测细胞内脂肪酸代谢相关基因的表达情况,...
- 赵旺生罗军王伟郝娟孙雨婷
- 关键词:基因表达奶山羊乳腺上皮细胞脂肪酸
- 文献传递
- 奶山羊短链脂肪酸受体GPR41基因的克隆分析与腺病毒RNA干扰载体构建
- GPR41(G protein-coupled receptor 41)和GPR43(G protein-coupled receptor 43)是生物体内G蛋白偶联受体超家族的成员,其可以被短链脂肪酸(short ch...
- 孙雨婷
- 关键词:奶山羊克隆
- 文献传递
- 奶山羊短链脂肪酸受体GPR43基因CDS区的克隆及组织表达分析
- 实验旨在克隆奶山羊短链脂肪酸受体GPR43(G protein-coupled receptor 43)并分析其组织表达谱,为进一步研究其在奶山羊中的功能提供实验基础。根据GenBank上已登录的牛(NM01163784...
- 孙雨婷罗军朱江江李君王慧吴敏
- 关键词:奶山羊克隆
- 文献传递
- 奶山羊短链脂肪酸受体GPR41基因的克隆及组织表达分析被引量:10
- 2012年
- 旨在克隆奶山羊GPR41(G protein-coupled receptor 41)基因并分析其组织表达谱,为进一步探讨其功能奠定基础。根据GenBank上已登录的牛、人和鼠的GPR41基因序列设计1对特异性引物,采用RT-PCR方法克隆奶山羊GPR41基因,利用实时荧光定量PCR方法分析奶山羊GPR41mRNA表达的组织特异性。测序结果表明奶山羊GPR41基因的CDS区为978bp,共编码325个氨基酸。奶山羊GPR41基因序列同源性分析表明:其与牛、人和鼠的核苷酸序列同源性分别为96%、78%和74%,与牛、人和鼠的氨基酸序列同源性分别为97%、76%和74%。实时荧光定量PCR分析结果表明:奶山羊GPR41基因在小肠组织中表达量最高,其次是乳腺组织,在心脏和肾脏中表达量极低。试验结果表明GPR41可能在小肠和乳腺组织中发挥着重要的生理作用。
- 孙雨婷罗军朱江江赵旺生李君钟瑜郝娟
- 关键词:奶山羊克隆