孙雯
- 作品数：16 被引量：53H指数：4
- 供职机构：广西医科大学附属肿瘤医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金World Health Organization更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RNA干扰技术沉默MCM7基因对人肝癌SMMC-7721细胞生物学行为和裸鼠移植瘤的影响
- 目的探讨RNA干扰重组慢病毒颗粒(LV-shRNA-MCM7)介导微小染色体维持蛋白7(miniehromosome maintenanceprotein7，MCM7)基因沉默后，对人肝癌SMMC-7721细胞MCM7基...
- 孙雯
- 关键词：肝癌RNA干扰SMMC-7721生物学行为
- 文献传递
- 天津市整合型服务体系的构建、成效及问题分析被引量：2
- 2022年
- 通过访谈调研,总结天津市实施镇村一体化机制、构建区级牵头医院与基层医疗机构紧密型医共体开展基层数字健共体,打造云管理、云服务、云药房和云检验平台的经验。通过构建整合型服务体系,牵头医院出院患者三四级手术占比由2018年的31.49%增加至2020年的33.44%,县域内基层机构门急诊人次数占比由2018年的50.2%上升至2020年57.4%。在医共体内统一药品目录,确保基层单位配备常用慢性病药品45个品种、196个品规。门诊收费中药占比快速上升,由2018年的76.6%增加至2020年的85.7%。天津市在构建整合型服务体系的实践中成效明显,但在紧密型医共体的组织框架和运行机制、牵头医院医防融合、城市城区紧密型医共体专科特色和数字健共体嵌入式发展运行机制等方面还需要进一步明确和加强。
- 王书平曾宇琦潘斐斐孙雯闫丽娜窦双祥
- 树鼩肝枯否细胞的分离及鉴定被引量：2
- 2014年
- 目的建立对树鼩枯否细胞(Kuffer cells,KCs)进行分离、原代培养和鉴定的方法。方法经肝活检手术分别获取6只树鼩的肝组织,后采用胶原酶体外灌注结合机械法分离肝脏细胞,经差速离心法、Percoll梯度密度离心法及贴壁法分离、纯化KCs后进行原代培养,最后通过细胞免疫组化、墨汁吞噬实验及透射电镜对KCs进行鉴定。结果树鼩肝组织分离获得的KCs数量为(1.2±0.2)×106个/g肝组织,细胞活力为90%,细胞纯度达85%以上。结论本组建立的胶原酶体外灌注结合机械分离树鼩KCs的方法稳定实用,为同一研究个体的KCs进行多次分离培养和动态观察奠定基础。
- 阮萍杨春欧超骆成漂秦虹孙雯李瑗
- 关键词：树鼩枯否细胞原代培养
- MCM7基因沉默对肝癌细胞生长的影响
- 目的：探讨沉默微小染色体维持蛋白7(miniehromosome maintenance protein7,MCM7)基因的表达对肝癌细胞生长的影响.方法：将shRNA干扰MCM7基因表达的慢病毒转染人肝癌细胞株SMMC...
- 孙雯朱伶群卢晓旭李瑗欧超苏建家杨春曹骥
- 关键词：MCM7基因沉默肝癌细胞生长
- RNA干扰技术沉默MCM7基因对人肝癌SMMC-7721细胞生物学行为的影响被引量：3
- 2014年
- 目的:探讨微小染色体维持蛋白7(minichromosome maintenance protein 7,MCM7)基因沉默后对人肝癌细胞系SMMC-7721增殖和凋亡的影响及可能作用机制.方法:利用RNA干扰技术,构建4个靶向MCM7基因shRNA载体(MCM7-shRNA表达载体),并对不同靶点进行有效筛选.将人肝癌细胞系SMMC-7721接种于六孔板,分为3组:以MCM7基因沉默重组慢病毒颗粒(LVshRNA-MCM7)感染SMMC-7721,作为实验组;以对照慢病毒颗粒(LV-shRNA-NC)感染SMMC-7721,作为阴性对照组;空白对照组常规培养,不做任何处理.应用RT-PCR、实时荧光定量PCR和Western blot技术检测MCM7基因mRNA和蛋白的表达,评价干扰效果并筛选有效靶点;MTT法检测细胞体外增生能力,Giemsa染色法检测各组细胞的克隆形成;流式细胞技术(flow cytometry,FCM)分别检测各组细胞增殖和凋亡的变化情况.结果:成功构建MCM7-shRNA表达载体,经测序验证无误,感染SMMC-7721细胞后,细胞荧光显示感染率>90%,内源性靶点得到确认.Western blot及Real-time PCR结果显示:实验组的四种靶点MCM7-shRNA干扰序列中,与阴性对照组和空白对照组比较,MCM7 mRNA和MCM7蛋白的表达水平下调均达50%以上,其中以LV-shRNA-MCM7(4)靶点敲减效率最高,分别达88.95%、87.89%和82.25%、81.63%,差异具有统计学意义(P<0.05),以此作为实验组.MTT法结果显示:实验组细胞490 nm处的吸光度(A)值在转染后24、48、72和96 h时均低于阴性对照组、空白对照组,差别显著(P<0.05).同时Giemsa染色法结果显示:LV-shRNA-MCM7组的克隆形成率(6.00%±0.50%)明显低于空白对照组(14.10%±0.36%)、阴性对照组(13.73%±0.17%),实验组细胞生长明显受到抑制(P<0.05).流式细胞技术显示:实验组较阴性对照组、空白对照组G1期延长,S期缩短,差别显著(P<0.05).实验组细胞凋亡率为(22.27%±1.22%),明显高于阴性对照组(0.05%±0.07%)和空白对照组(0.03%±0.06%),实验组较阴性对照组、空白对照组出现了明显的细胞凋�
- 孙雯曹骥卢晓旭朱伶群杨春欧超骆成飘李瑗苏建家
- 关键词：肝癌MCM7RNA干扰
- “十四五”时期医院高质量发展总体战略规划方法学探讨被引量：20
- 2021年
- 以医院总体战略规划为研究对象,介绍医院总体战略规划方法的分析框架、分析方法、规划思路和规划核心,并以“十四五”时期医院战略规划为例,从总结成绩、分析问题、明确目标、实现路径和保障制度等方面,对规划方法学进行应用和讨论。
- 王书平黄二丹孙雯胡晔康
- Cdc25a在跨种属肝癌组织中的表达及其意义被引量：5
- 2014年
- 目的:研究细胞周期通路中的细胞分裂周期蛋白25a(Cdc25a)在人、大鼠和树鼩不同种属的肝癌、癌旁及正常肝组织中的表达和意义,进一步验证跨种属筛选肝癌关键基因研究策略的可行性。方法:采用实时荧光定量PCR和Western blotting技术检测人、大鼠和树鼩的肝癌及其相应癌旁组织以及正常肝组织中Cdc25a mRNA和蛋白表达水平。结果:Cdc25a mRNA表达水平在人、大鼠和树鼩的肝癌组织中均高于正常肝组织(均P<0.05);在人和大鼠肝癌组织中的表达高于其对应的癌旁组织(P<0.05);其余各组织间mRNA表达水平的差别无统计学意义(均P>0.05)。Cdc25a mRNA在人肝癌组织中的表达水平与病人的临床分期、门脉癌栓及肝外转移明显相关,而与术后复发、肿瘤直径、肿瘤个数、血清甲胎蛋白水平和肿瘤分化无明显关系。Western blotting检测结果显示Cdc25a在人、大鼠和树鼩肝癌组织中的蛋白表达水平均较癌旁和正常肝组织显著上调。结论:Cdc25a有可能是影响肝癌发生和发展的重要分子之一,跨种属筛选肿瘤关键基因策略可能有助于发现肝癌关键基因。
- 卢晓旭曹骥李瑗孙雯朱伶群杨春苏建家
- 关键词：肝肿瘤
- RNAi沉默MCM7基因对人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠移植瘤影响研究被引量：4
- 2015年
- 目的探讨微小染色体维持蛋白7(miniehromosome maintenanceprotein7,MCM7)基因RNAi(RNA interference)的重组慢病毒载体,对人肝癌细胞SMMC-7721 MCM7基因表达和裸鼠移植瘤生长的影响。方法构建重组逆转录慢病毒载体MCM7-shRNA,以MCM7基因沉默重组慢病毒颗粒(LV-shRNA-MCM7)感染SMMC-7721细胞,作为实验组;以对照慢病毒颗粒(LV-shRNA-NC)感染SMMC-7721细胞,作为阴性对照组;空白对照组常规培养,不做任何处理。通过嘌呤霉素筛选出稳定转染细胞株。3组细胞分别接种至裸鼠皮下,建立人肝癌裸鼠移植瘤模型。观察裸鼠成瘤情况、移植瘤生长情况并绘制肿瘤生长曲线;4周后测定肿瘤体积和质量,并用RT-PCR、实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法及免疫组织化学法检测移植瘤中MCM7的表达情况。结果 MCM7-shRNA慢病毒载体构建成功。裸鼠接种癌细胞后第6天均有肿瘤形成,与空白对照组和阴性对照组相比,实验组的肿瘤生长速度明显减慢,实验组、阴性对照组和空白对照组的瘤体平均体积分别为(27.72±7.80)、(81.86±10.91)和(79.75±16.61)mm3,差异有统计学意义,F=61.949,P<0.05;实验组、阴性对照组和空白对照组的瘤体平均质量分别为(0.19±0.06)、(0.501±0.14)和(0.509±0.18)g,差异有统计学意义,F=18.41,P<0.05。实验组MCM7mRNA的相对表达量为0.253±0.198,阴性对照组1.213±0.548,空白对照组1.201±0.744,实验组相比阴性对照组和空白对照组明显下降,差异有统计学意义,F=4.091,P<0.05;实验组MCM7蛋白相对表达量为0.207±0.015,阴性对照组1.116±0.062,空白对照组1.088±0.040,实验组相比阴性对照组和空白对照组明显下降,差异有统计学意义,F=292.778,P<0.05。MCM7蛋白在阴性对照组和空白对照组中阳性表达率均为100%(10/10),在实验组中为30%(3/10),实验组明显低于阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义,χ2=18.261,P<0.001。结论慢病毒沉默SMMC-7721细胞MCM7基因表达能
- 孙雯曹骥卢晓旭朱伶群杨春欧超骆成飘李瑗苏建家
- 关键词：裸鼠
- 医院高质量发展内部组织变革研究与应用被引量：1
- 2023年
- 以波特价值链模型为依据,基于医院高质量发展要求,结合医院内部组织变革,演变出医院高质量发展的“六大体系”——医疗服务体系、人才培养体系、科技创新体系、精细化管理体系、开放协作体系和党建文化体系。参考国内外先进医院的实践,分别论述“六大体系”的内涵,从系统性、适应性和实用性角度讨论“六大体系”在公立医院高质量发展中的应用。
- 王书平黄二丹袁海鸿孙雯闫丽娜
- Cdc25A与肿瘤被引量：4
- 2013年
- 细胞周期调节失控是多步骤癌变过程中最基本的一步,几乎所有的癌症都表现为细胞周期的紊乱和不规则。Cdc25A是细胞周期控制蛋白,它的过表达与多种肿瘤的发生有关。本文主要综述Cdc25A在细胞周期调控中的作用及其在肿瘤中的表达和作为抗肿瘤靶点的相关研究进展。
- 卢晓旭孙雯曹骥
- 关键词：CDC25A肿瘤细胞周期
