目的建立超高效液相-串联质谱(UPLC-MS/MS)法测定犬血浆中的雷公藤次碱的浓度,并用于雷公藤次碱的体内药代动力学研究。方法色谱柱为ACE Super C18柱(2.1×100 mm id,5μm,菲罗门),以2 mM醋酸铵(0.2%甲酸)-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为350μL·mL^-1,柱温30℃,进样量2μL。以雷公藤春碱为内标,血浆样本前处理后,采用ESI-Positive-MRM模式,进样检测。将Beagle犬分为高中低剂量组(400、200、100μg·kg^-1),给药后测定不同时间点犬血浆中雷公藤次碱的浓度,采用DAS3.0软件对雷公藤次碱药时曲线进行拟合,并计算药代动力学参数。结果建立的UHPLC-MS/MS法在5.0-250 ng·mL^-1范围内雷公藤次碱色谱响应与浓度相关性良好,定量限为4.94 ng·mL^-1,雷公藤次碱及内标的保留时间分别为2.99、2.73 min,该方法无明显的离子抑制或增强效应,批内批间精密度及准确度RSD均小于15%,提取回收率在82.86%^-112.76%之间,稳定性各项数据显示中、高浓度RSD均小于15%,低浓度RSD均小于20%,均符合要求。雷公藤次碱吸收较快,在Beagle犬体内的系统暴露随剂量的增大而增加,有呈比例增加的趋势;其消除与性别有关,与剂量无关。结论该检测方法灵敏度高、专属性强、准确度良好,适用于犬血浆中雷公藤次碱的浓度测定及其药动学研究。
