崔岩
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：大连医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：大连市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- SHH-N基因腺相关病毒表达载体的构建及其对神经干细胞增殖相关基因的影响被引量：1
- 2011年
- 目的构建rAAV-SHH-N-EGFP载体并检测其对神经干细胞增殖相关基因影响。方法分离并培养大鼠脑室下区神经干细胞,提取RNA、反转录、PCR得到SHH-N的cDNA,克隆入pSNAV2.0-CMV-IRES-EGFP,包装得到腺相关病毒rAAV-SHH-N-EGFP,感染神经干细胞48 h后,采用实时定量PCR检测SHH信号通路下游相关基因的mRNA水平变化,并观察rAAV-SHH-N-EGFP载体在神经干细胞内的表达情况。结果 (1)克隆得到SHH-N基因,测序结果与NCBI报道序列一致。(2)成功构建pSNAV2.0-CMV-SHH-N-IRES-EGFP表达载体并鉴定,包装得到rAAV-SHH-N-EGFP。(3)实时定量PCR分析rAAV-SHH-N-EGFP感染神经干细胞48 h后,rAAV-SHH-N-EGFP处理组较感染rAAV-EGFP的对照组,Gli1和Nmyc的mRNA水平上调。(4)rAAV-SHH-N-EGFP可有效感染神经干细胞,在感染14 d后稳定表达SHH-N。结论成功构建rAAV-SHH-N-EGFP过表达载体并使其在神经干细胞内稳定表达。过表达SHH-N可使神经干细胞内SHH信号通路相关基因Gli1转录水平上调,并使细胞增殖相关基因Nmyc转录水平上调。
- 刘东升崔岩申仑杜延平李桂林王任直王岩张波
- 关键词：神经干细胞SHH信号通路
- Oct-4在胚胎来源神经前体细胞向神经元分化中的作用被引量：1
- 2013年
- 目的应用RNA干扰方法抑制胚胎来源神经前体细胞Oct-4基因表达，以观察Oct-4基因在胚胎来源神经前体细胞向神经元分化中的作用。方法采用“五步法”诱导小鼠胚胎干细胞向神经元分化，进入扩增期后给予Oct-4干扰RNA，采用Real-timePCR方法检测干扰后细胞Oct-4表达情况，进行分化计数，免疫组化鉴定分化后的细胞，计数分化后的新生神经元比例。结果Oct-4干扰RNA使神经前体细胞Oct-4表达下降约40％，正常未干扰胚胎干细胞分化的神经元为（75．5±5．2）％，GFP组为（73．8±4．7）％，Oct4干扰RNA组为（33．8±2．9）％，与正常组和GFP组比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论采用RNA干扰方法可以有效降低神经前体细胞0ct-4的表达，使分化后新生神经元生成减少，证实了Oct-4基因在胚胎来源神经前体细胞向神经元分化中发挥着重要作用。
- 杜延平张波申仑郭恺崔岩张维杰关云谦陈凌王任直
- 关键词：胚胎干细胞RNA干扰OCT-4诱导分化
