常彩琴 作品数:55 被引量:130 H指数:6 供职机构: 公安部物证鉴定中心 更多>> 发文基金: 国家科技攻关计划 更多>> 相关领域: 政治法律 医药卫生 生物学 更多>>
鼠抗人转铁蛋白抗体轻链与重链可变区基因库的制备 2001年 以纯化的人转铁蛋白免疫小鼠,测其血清效价,合乎要求后杀鼠取脾脏并以异硫氰酸胍和酚的混合溶液将其匀浆,再以氯仿抽提、异丙醇沉淀和乙醇洗涤,所得总RNA以oligo(dT)纤维素离心柱分离纯化制备mRNA,使mRNA达到cDNA合成所需的浓度后,反转录制备出cDNA,在合成的cDNA中加入轻、重链引物,扩增制备出小鼠抗人转铁蛋白抗体的轻、重链可变区基因库。 李兆隆 郭红玲 常彩琴 涂政 肖卫民 王明鑫 王俭关键词:基因工程抗体 小鼠脾脏 总RNA提取 6种特殊生物检材的DNA提取 被引量:6 2002年 郭燕霞 刘开会 邱宁 常彩琴 王坚 季安全关键词:生物检材 DNA检验 案例分析 鼠抗人转铁蛋白单链抗体基因的表达 被引量:1 2002年 目的 制备抗人转铁蛋白单链抗体。方法 拼装好并带有酶切位点粘性末端的鼠抗人转铁蛋白的单链抗体基因经凝胶电泳定量后,同载体pCANTAB 5E连接,以其转化E.coli TG1细胞,经辅助噬菌体M13K07挽救构建噬菌体抗体表面呈现文库、抗原包被固相材料富集选择阳性重组噬菌体克隆(Panning)。感染能产生可溶抗体片段的大肠杆菌菌株E.coli HB2151,制备可溶抗体,以Anti-E末端抗体进行Western blot、ELISA检验和分子量测定。结果 人转铁蛋白的单链抗体基因成功表达。结论 用基因工程抗体技术制备抗体是可行的。 李兆隆 郭红玲 常彩琴 肖卫民 涂政 王明鑫 王俭关键词:噬菌体抗体库 基因表达 单链抗体基因 法医物证 检验人精浆特异蛋白P_(30)免疫胶体金试剂条的研制 被引量:10 2002年 目的制备用于检验人精浆特异蛋白P30—主要是来自法医学案件的免疫胶体金层析试剂条。方法选取针对不同抗原决定簇的抗P30单克隆抗体细胞株,并制备其小鼠腹水,分离纯化单克隆抗体。制备胶体金并以纯化抗体包被,制成免疫胶体金,以免疫胶体金浸泡玻璃纤维。选取适宜的硝酸纤维素膜并于其上不同位置以未金标的另一株P30单克隆抗体和羊抗鼠IgG包被。搭建试剂条并检测其灵敏度和特异性。结果所制成的试剂条灵敏度至少可达4ng/ml;对6人份混合的人精液物质在稀释20万倍后仍出阳性结果,且无非特异性反应。结论检验人精浆特异蛋白P30的免疫胶体金试剂条可对嫌疑人精物质做出排查,有利于法医物证检验。 李兆隆 徐秀兰 林涛 张英兰 常彩琴 郭红玲 吴博韬 蒋之连 涂政 王俭关键词:胶体金 鼠抗人转铁蛋白单链抗体基因序列测定及分析——人转铁蛋白基因工程抗体研制(6) <正>从携带人转铁蛋白单链抗体基因载体转化的大肠杆菌菌株中提取质粒,经电泳分析及筛选、纯化出线状质粒DNA,定量后以载体上人转铁蛋白单链抗体基因插入子两边的已知DNA序列经合成后作为引物进行测序扩增凝胶电泳,将得到的人转... 李兆隆 郭红玲 常彩琴 涂政 肖卫民 王明鑫 王俭文献传递 鼠抗人转铁蛋白抗体轻、重链可变区基因的制备——人转铁蛋白基因工程抗体研制(3) <正>将以人转铁蛋白成功免疫的小鼠脾脏取出,以异硫氰酸胍和酚的混合溶液匀浆脾脏组织,再以氯仿抽提、异丙醇沉淀和乙醇洗涤,所得总RNA以oligo (dT)纤维素离心柱分离纯化制备mRNA,使mRNA 李兆隆 郭红玲 常彩琴 涂政 肖卫民 王明鑫 王俭文献传递 北京地区汉族群体间-α-胰蛋白酶抑制因子重链H1基因的多态性研究 2002年 目的 研究间 -α-胰蛋白酶抑制因子重链 (inter-α- trypsin inhibitor,ITI) H1基因的多态性。方法 用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性方法 ,调查了北京地区汉族群体 ITI重链 H1基因多态性。结果 ITI重链 H1具有 3个等位基因 ,ITIH1* 1,ITIH1* 2和 ITIH1* 3,其基因型频率分别为 0 .5 6 41、0 .410 3和 0 .0 2 5 6。 ITI H1第 14外显子等位基因频率与蛋白水平上显示的等位基因频率一致。结论 ITI重链 H1基因多态性对法医学具有重要的应用价值和实际意义。 裴黎 张世崇 姜成涛 邓华 赵兴春 常彩琴 王俭关键词:遗传多态性 聚合酶链反应 特殊生物检材DNA提取方法的比较研究 刘开会 王坚 季安全 邱宁 常彩琴 郭燕霞 该研究建立了C-有法、C-有一柱法及C-磁法等特殊生物检材DNA提取纯化方法及5ulPCR扩增体系。采用这些DNA提取纯化方法并通过增加循环圈数等参数的调整,系统的研究了荧光标记复合扩增毛干及多个肿瘤组织STR及Amel...关键词:关键词:法医物证 生物检材 DNA提取 鼠抗人转铁蛋白单链抗体的基因表达及鉴定 <正>拼装好并带有酶切基因座粘性末端的鼠抗人转铁蛋白的单链抗体基因经凝胶电泳定量后,同载体 pCANTAB 5E连接,以其转化E.coli TG1细胞,经辅助噬菌体M13K07挽救构建噬菌抗体表面呈现文库、抗原包被固相材... 李兆隆 郭红玲 常彩琴 肖卫民 涂政 王明鑫 王俭文献传递 不同抗人血红蛋白金标试剂条的可应用性比较 被引量:4 2004年 抗人血红蛋白金标试剂条(Strip of gold-labeledanti-human-hemoglobin,SGI-antiHb),由于其使用方便、出现结果快速、直观可辨等优点,日益受到法医,尤其是基层法医的普遍欢迎.但国外公司生产的SGl-antiHb,本是为临床医学检验大便潜血所用,是否合乎法医学检验的标准和要求,未经检测很难定论. 李兆隆 张英兰 常彩琴 徐秀兰 王俭关键词:法医物证学 法医学检验 单克隆抗体