廖富荣
- 作品数:70 被引量:249H指数:9
- 供职机构:福建出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金:国家质检总局科技计划项目福建省自然科学基金厦门市科技计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学理学自动化与计算机技术更多>>
- 影响胡萝卜种子蛋白质提取的几种因素探讨
- 2009年
- 探讨了提取液比例、pH值、提取缓冲液、浸提时间、PVP用量、提取介质、SDS等因素对胡萝卜种子蛋白质提取的影响。结果表明:蛋白质的提取受料液比、pH值、浸提时间、缓冲液种类、提取介质的影响较大。初步确定,在4℃条件下,胡萝卜种子蛋白提取的较佳条件为:料液比(W∶V)1∶10,pH值8.0的50mmol.L-1Tris-HCL缓冲液,浸提时间1 h。
- 王慧英林石明廖富荣陈青刘斌
- 关键词:胡萝卜种子蛋白料液比浸提时间
- 进境西瓜种子中西瓜细菌性果斑病菌的检测鉴定被引量:3
- 2010年
- 由嗜酸菌属西瓜种(Acidovorax citrulli)引起的西瓜细菌性果斑病是西瓜等葫芦科作物上的一种极具毁灭性的病害,该病原细菌可以由种子携带传播。本研究通过直接研磨种子,用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(DAS-ELISA)和免疫捕捉聚合酶链式反应法(IC-PCR)对进境的西瓜种子进行检测,并且对PCR产物进一步克隆测序。结果表明,在DAS-ELISA产生阳性结果的样品中,IC-PCR结果也产生阳性。序列分析表明,该序列与已知的该病菌16S rRNA基因的相应序列具有100%同源性。因此,2006年这批来自台湾的西瓜种子携带有嗜酸菌属西瓜种(Acidovorax citrulli)。
- 廖富荣林石明方志鹏黄蓬英陈红运陈青吴媛
- 关键词:西瓜种子DAS-ELISA种子携带
- 辣椒轻斑驳病毒反转录-环介导等温扩增检测用引物及其应用
- 本发明涉及一种用于辣椒轻斑驳病毒反转录-环介导等温扩增检测的引物、检测方法及其应用,所述引物为PMMoV-F3、PMMoV-B3、PMMoV-FIP和PMMoV-BIP,其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1~4所示...
- 黄天培廖富荣关雄方志鹏吴媛郭木金
- 文献传递
- 马铃薯黄矮病毒的联合基因检测试剂盒及检测方法
- 本发明公开了马铃薯黄矮病毒联合基因检测试剂盒及检测方法。本发明的试剂盒包括针对马铃薯黄矮病毒RdRp基因的1套特异性引物和荧光探针、针对马铃薯黄矮病毒NP基因的1套特异性引物和荧光探针、RT Buffer、随机引物、RN...
- 沈建国高芳銮张永江陈细红廖富荣
- 美人蕉黄斑驳病毒荧光定量PCR检测试剂盒及其检测方法
- 本发明涉及一种美人蕉黄斑驳病毒荧光定量PCR检测试剂盒及其检测方法,专用于美人蕉黄斑驳病毒的检测。该试剂盒包括:正向引物、反向引物、荧光探针、TaqMan PCR Master Mix、阳性对照、阴性对照和ddH<Sub...
- 沈建国李敏张总泽蔡伟廖富荣
- 文献传递
- 水仙潜隐病毒检测试剂盒及其检测方法
- 本发明涉及一种水仙潜隐病毒检测试剂盒及其检测方法,专用于水仙潜隐病毒的检测。该试剂盒包括:上游引物、下游引物、RT Buffer、RNA酶抑制因子、反转录酶、dNTPs、PCRBuffer、Mgcl<Sub>2</Sub...
- 沈建国林双庆蔡伟廖富荣闫诚
- 文献传递
- 进境欧洲水仙种球上病毒的检测与鉴定被引量:1
- 2017年
- 为明确2013年福建口岸截获的进境欧洲水仙种球上携带的病毒种类,应用血清学、电镜观察和分子生物学检测方法对其可能携带的病毒进行了检测与鉴定。结果显示,水仙花叶病毒(Narcissus mosaic virus,NMV)、水仙黄条病毒(Narcissus yellow stripe virus,NYSV)、水仙潜隐病毒(Narcissus latent virus,NLV)、水仙迟季黄化病毒(Narcissus late season yellows virus,NLSYV)和南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic virus,ArMV)5种病毒为阳性,其中NLSYV、ArMV为强阳性;NMV、NYSV、NLV和NLSYV为阳性的样品中含有大小约500~750 nm×12 nm的线状病毒粒体,ArMV为阳性的样品中含有直径约30 nm的球状病毒粒体;经序列测定和分析,扩增到的目的片段大小与各病毒预期扩增片段大小一致,并与已报道的各病毒序列高度同源;病毒复合侵染检测结果显示,该批水仙种球39.7%的样品存在2种以上病毒复合侵染。研究表明,该批进境欧洲水仙种球上携带有NMV、NYSV、NLV、NLSYV和ArMV,且复合侵染现象明显。
- 沈建国高芳銮蔡伟金晶廖富荣吴祖建
- 关键词:欧洲水仙病毒
- 进境加拿大豌豆中豌豆细菌性疫病菌的检测被引量:5
- 2016年
- 利用MT选择性培养基从进境加拿大豌豆样品上分离到一株细菌分离物(编号1314),对该分离物进行PCR检测、16S和23S rRNA序列扩增、多位点序列分析、Biolog测定、烟草过敏性反应和致病性测试。豌豆细菌性疫病菌(Pseudomonas syringae pv.pisi,Ppi)特异引物AN7F/AN7R扩增分离物1314和Ppi菌株ATCC 11043得到预期272 bp的条带,二者的PCR产物序列一致,与GenBank中Ppi(X97405)的序列相似性为99.57%。分离物1314的部分16S rRNA、23S rRNA序列以及16S-23S序列均与Ppi菌株ATCC 11043一致。选择gap1、gltA、gyrB和ropD 4个看家基因进行多位点序列分析,系统发育树显示分离物1314与Ppi菌株聚在同一组内。Biolog鉴定结果表明:分离物1314为Ppi,PROB值为0.898,SIM为0.72。该分离物人工接种豌豆茎秆能引起水渍状症斑,接种烟草叶片产生过敏性反应。基于上述试验结果,将分离物1314鉴定为豌豆细菌性疫病菌。
- 陈青钱俊婷林振基方志鹏廖富荣陈红运易建平
- 关键词:豌豆
- 漳州琯溪蜜柚果实黑斑病菌的分子鉴定被引量:9
- 2010年
- 2008年从漳州采集到疑似由柑橘球座菌(Guignardia citricarpaKiely)引起的黑斑病症状的溪琯蜜柚(Citrus grandis(Linn.)Osbeck cv.guanxi-miyou)果实。使用柑橘球座菌(G.citricarpa)特异引物对该果实上的病斑进行PCR检测及序列分析。PCR检测结果表明从溪琯蜜柚果实病斑上扩增到约490bp的条带。序列分析结果表明,与已知的亚洲柑橘叶点霉(Phyllosticta citriasiana)、G.citricarpa和G.mangif-erae的相应序列同源性分别为99.8%、98.2%和94.0%。该序列含有部分的内转录间隔区1(ITS1)、5.8S核糖体RNA基因(5.8S rRNA)和部分的内转录间隔区2(ITS2)序列。结果表明,引起溪琯蜜柚果实病害的病原菌并不是G.citricarpa,而是一种新描述的病原菌——亚洲柑橘叶点霉(Phyllosticta citriasianaWulan-dari,Crous&Gruyter),该病原菌引起的病害称为柑橘褐斑病。
- 林石明廖富荣方志鹏黄蓬英陈红运陈青吴媛
- 关键词:琯溪蜜柚柑橘黑斑病分子鉴定
- 进境大豆种子上菜豆荚斑驳病毒和大豆花叶病毒的多重RT-PCR检测被引量:14
- 2016年
- 【目的】针对进境大豆种子上症状相似的菜豆荚斑驳病毒(Bean pod mottle virus,BPMV)和大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV),建立同时快速检测2种病毒的多重RT-PCR技术。【方法】根据GenBank公布的BPMV、SMV外壳蛋白基因序列,设计2对特异性引物,以复合感染BPMV、SMV的大豆种子为材料,提取dsRNA作为模板进行多重RT-PCR的引物浓度、退火温度和循环数的优化。利用优化建立的多重RT-PCR方法分别对健康大豆种子、BPMV、SMV及2种病毒复合感染的大豆种子进行检测,测定该方法的特异性。利用健康大豆种子提取的dsRNA,将从复合侵染BPMV、SMV大豆种子中提取的dsRNA按10倍梯度稀释,依次稀释为原液的10^(-1)、10^(-2)、10^(-3)、10^(-4).10^(-5)和10^(-6)倍作为模板,分别进行多重RT-PCR和单一RT-PCR扩增,测定灵敏度。多重RT-PCR扩增产物回收纯化后,连接于pMD18-T载体,进行克隆测序和序列比对,进一步验证该方法的可靠性。应用建立的多重RT-PCR方法对来自于美国、阿根廷、中国和巴西的疑似带病大豆种子进行检测,同时以单一RT-PCR检测进行验证。以BPMV、SMV抗体等体积混合液包被PCR管后再加入样品提取液或直接以样品提取液包被PCR管,将免疫捕获、试管捕捉和多重RT-PCR相结合,建立同时检测BPMV、SMV的多重一步IC-RT-PCR、多重一步TC-RT-PCR方法。【结果】多重RT-PCR的优化结果显示,最佳引物浓度为BPMV 0.4μmol·L^(-1)、SMV 0.4μmol·L^(-1),最佳退火温度为52℃,最佳循环数为35。特异性测定结果表明,多重RT-PCR能够从复合感染BPMV、SMV的大豆种子上同时扩增到大小约542、221 by特异性目的条带,从单一感染BPMV的大豆种子上扩增到大小约542 by特异性目的条带,从单一感染SMV的大豆种子上扩增到大小约221 by特异性目的条带,而从健康大豆种子材料上未扩增出任何特异性条带。灵敏度测定结果表明,当dsRNA原液稀释至10^(-3)倍�
- 沈建国高芳銮蔡伟金晶廖富荣吴祖建
- 关键词:菜豆荚斑驳病毒大豆花叶病毒多重RT-PCR双链RNA